O agente etiológico da mancha branca do milho (MBM) tem sido alvo de discussão e controvérsia. Inicialmente a doença foi descrita como sendo a mancha foliar de Phaeosphaeria causada por Phaeosphaeria maydis. Outros autores sugeriram a existência de diferentes espécies fúngicas provocando sintomas semelhantes. Recentemente a bactéria Pantoea ananatis foi descrita como sendo o agente causal desta doença. O objetivo deste estudo foi oferecer informações adicionais sobre a correta etiologia da doença proporcionando evidências visuais da presença da bactéria no interior de lesões da MBM por meio de microscopia eletrônica de transmissão (MET) e técnicas moleculares. A MET permitiu visualizar um grande número de células bacterianas nos espaços intercelulares em lesões oriundas de plantas naturalmente e artificialmente infectadas. Estruturas fúngicas não foram visualizadas em lesões jovens. Primers bacterianos para os genes 16S rRNA e rpoB foram usados em reações de PCR para amplificar DNA extraído diretamente de lesões jovens e de lesões necróticas. O oligonucleotídeo universal para fungo, ITS4, foi incluído para identificar a possível presença de estruturas fúngicas nas lesões. Amplificação positiva foi obtida com primers bacterianos, a partir de lesões jovens, natural e artificialmente inoculadas, enquanto que nenhuma amplificação foi observada quando o oligonucleotídeo ITS4 foi usado. Amplificação do DNA com o primer ITS4 foi observada quando o DNA foi extraído de lesões em estádio avançado de necrose. Estes resultados reforçam relatos anteriores que descrevem P. ananatis como patógeno primário da doença e a hipótese de que espécies fúngicas podem colonizar lesões pré-estabelecidas pela P. ananatis.

The etiological agent of maize white spot (MWS) disease has been a subject of controversy and discussion. Initially the disease was described as Phaeosphaeria leaf spot caused by Phaeosphaeria maydis. Other authors have suggested the existence of different fungal species causing similar symptoms. Recently, a bacterium, Pantoea ananatis, was described as the causal agent of this disease. The purpose of this study was to offer additional information on the correct etiology of this disease by providing visual evidence of the presence of the bacterium in the interior of the MWS lesions by using transmission electron microscopy (TEM) and molecular techniques. The TEM allowed visualization of a large amount of bacteria in the intercellular spaces of lesions collected from both artificially and naturally infected plants. Fungal structures were not visualized in young lesions. Bacterial primers for the 16S rRNA and rpoB genes were used in PCR reactions to amplify DNA extracted from water-soaked (young) and necrotic lesions. The universal fungal oligonucleotide ITS4 was also included to identify the possible presence of fungal structures inside lesions. Positive PCR products from water-soaked lesions, both from naturally and artificially inoculated plants, were produced with bacterial primers, whereas no amplification was observed when ITS4 oligonucleotide was used. On the other hand, DNA amplification with ITS4 primer was observed when DNA was isolated from necrotic (old) lesions. These results reinforced previous report of P. ananatis as the primary pathogen and the hypothesis that fungal species may colonize lesions pre-established by P. ananatis.

O efeito antimutagênico dos cogumelos Lentinula edodes e Agaricus blazei foram estudados sobre conídios de Aspergillus nidulans quando expostos à luz ultravioleta de comprimento de onda curto. Duas linhagens de A. nidulans foram usadas. Para o preparo dos extratos, os cogumelos frescos permaneceram em infusão aquosa por 12 horas e em seguida foram aquecidos em banho-maria por 15 min à 100ºC e a seguir o material foi filtrado. Os cogumelos desidratados foram deixados em infusão aquosa por 12 horas e a seguir filtrados. Ambos os filtrados foram usados como extratos. Os conídios de A. nidulans foram incubados por três horas em água e em extrato de cogumelo e somente após foram expostos a luz ultravioleta (pré-tratamento). Conídios de A. nidulans foram incubados em água e em extrato de cogumelo e imediatamente submetidos à luz ultravioleta (pós-tratamento). Conídios incubados em água e em extrato de cogumelo, mas sem exposição ao agente mutagênico, foram usados como controle. Após tratamento mutagênico, observou-se um aumento na taxa de sobrevivência de A. nidulans e uma diminuição na porcentagem de mutantes morfológicos em conídios tratados com extrato de cogumelos. Nossos resultados demonstram o efeito radioprotetor e antimutagênico dos cogumelos L. edodes e A. blazei sobre células eucarióticas submetidas à radiação UV.

The antimutagenic effect of the mushrooms Lentinula edodes and Agaricus blazei was studied on conidia of Aspergillus nidulans when exposed to short wave ultraviolet light. Two strains of A. nidulans were used. For the preparation of the extracts, the fresh mushrooms were left in aqueous infusion for 12 hours and heated in a water bath for 15 min at 100ºC, and then the material was filtered. The dehydrated mushrooms were left in aqueous infusion for 12 hours and to filtrated. Both filtrates were used as extracts. A. nidulans conidia were incubated for three hours in water and in mushroom extracts and only after were exposed to UV light (pre-treatment). A. nidulans conidia were suspended in water and in mushroom extracts and immediately submitted to UV light (post-treatment). Conidial suspension in water and in mushroom extracts but without exposure to the mutagenic agent were used as controls. After mutagenic treatment, it was observed an increase in the survival rate of the A. nidulans and a decrease in the percentage of morphologic mutants on conidia treated with mushroom extracts. Our results demonstrated the radioprotective and antimutagenic effect of L. edodes and A. blazei mushrooms on eukaryotic cells when exposed to UV radiation.

Cinco espécies de cogumelos comestíveis, Lentinula edodes, Pleurotus ostreatus, Pholiota nameko, Macrolepiota bonaerensis e Agaricus blazei foram avaliadas quanto ao seu potencial em inibir o crescimento "in vitro" da levedura patogênica Candida albicans. Apenas a espécie L. edodes apresentou efeito fungistático sobre este patógeno humano. O composto inibitório foi produzido intra e extracelularmente em cultivo submerso de L. edodes e também estava presente em basidiocarpos frescos e desidratados do cogumelo. O composto fungistático é termossensível e perde sua atividade após 72 horas.

Five species of edible mushrooms, Lentinula edodes, Pleurotus ostreatus, Pholiota nameko, Macrolepiota bonaerensis and Agaricus blazei, were tested for their potential to inhibit the in vitro growth of the pathogenic yeast Candida albicans. Only L. edodes had a fungistatic effect on this human pathogen. The inhibitory compound was produced intra and extracellularly in submersed L. edodes culture, and was also present in fresh and dehydrated mushroom basidiocarps. The fungistatic compound was heat sensitive and lost activity after 72 hours.