Resumo Podocarpus lambertii (Podocarpaceae) é conhecido popularmente como pinheiro-bravo. Ocorre em várias formações florestais da Mata Atlântica, principalmente na Floresta Ombrófila Mista. Devido à intensa exploração madeireira sofrida pela espécie, ela está presente na categoria “Quase ameaçada” da Lista Vermelha das Espécies Ameaçadas da IUCN. Diante disso, este estudo teve por objetivo caracterizar a diversidade e estrutura genética de 12 populações no Estado de Santa Catarina, a fim de gerar informações para fundamentar estratégias de conservação para a espécie. Foram coletadas folhas de 50 indivíduos adultos em cada população. Para acessar os níveis e a distribuição da diversidade genética, utilizaram-se 10 sistemas enzimáticos. As frequências alélicas, a porcentagem de locos polimórficos (P100%), as heterozigosidades observada (HO) e esperada (HE), o índice de fixação (f) e a divergência genética (FST) foram calculados com auxílio do programa FSTAT. Os 10 sistemas enzimáticos analisados revelaram 11 locos com um total de 32 alelos (A= 1,8). As populações de Podocarpus lambertii apresentaram baixa diversidade genética (P100% = 52,7; HO = 0,049; HE = 0,079). As frequências alélicas das populações apresentaram desvios significativos das esperadas em Equilíbrio de Hardy-Weinberg, evidenciando um deficit de heterozigotos (f = 0,374). A presença de alelos raros nas populações e uma divergência genética significativa (FST = 0,303) evidenciam um baixo fluxo gênico histórico e um grande risco de perda de diversidade. Os resultados obtidos indicam a necessidade de conservação in situ das várias populações de Podocarpus lambertii e de um aumento da conectividade entre as populações remanescentes.

Abstract Podocarpus lambertii (Podocarpaceae) is popularly known in Brazil as pinheiro-bravo. It occurs in several forest formations of the Atlantic Rain Forest, mainly in the Ombrophilous Mixed Forest. Due to the high wood exploitation suffered by the species, it is listed as ‘Almost Threatened’ in The IUCN Red List of Threatened Species. In face of this, the objective of the present study was to characterize the genetic diversity and structure of 12 natural populations of Podocarpus lambertii in Santa Catarina state, aiming to generate information for the definition of effective conservation strategies for the species. To access genetic diversity levels and distribution, it was used 10 allozymic systems. Along with the assistance of the software Fstat, the allelic frequencies (A), polymorphic loci percentage (P), observed heterozigosity (Ho), expected heterozigosity, fixation index (f) and genetic divergence between populations (FST) were calculated. In 11 loci 32 alleles (A= 1,8) were detected. A low genetic diversity was detected for Podocarpus lambertii populations (P100% = 52,7; H O = 0,049; H E = 0,079). The mean fixation index obtained (f = 0,374) indicates a deficit of heterozygous individuals. A high number of low frequency alleles was detected and together with the high genetic divergence (FST = 0,303), it points towards the necessity of in situ conservation of a large number of Podocarpus lambertii populations and the need to increase the connectivity among the remnant populations.

Este estudo objetivou estabelecer um protocolo de criopreservação para culturas embriogênicas de A. angustifolia, possibilitando a conservação ex situ da espécie. Culturas embriogênicas foram estabelecidas a partir de sementes imaturas e tratadas com variações das soluções crioprotetoras SuDG, SoD e PVS2 antes da imersão em nitrogênio líquido. A viabilidade celular foi avaliada após 30, 60 e 90 dias de recrescimento. O maior recrescimento sem alterações morfológicas e composição bioquímica normal foi obtido com a solução PVS2 com 40 min de imersão em etanol (-20 °C). Este procedimento abre novos horizontes para a conservação ex situ dos recursos genéticos da espécie.

This study aimed to establish a cryopreservation protocol for embryogenic cultures of A. angustifolia, enabling the ex situ conservation of the species. Embryogenic cultures were established from immature seeds and treated with variations of the cryoprotectant solutions SuDG, SoD and PVS2 prior to immersion in liquid nitrogen. Cell viability was evaluated after 30, 60 and 90 days of re-growth. The highest re-growth without morphological alterations and with normal biochemical composition was obtained with the PVS2 solution with 40 min immersion in ethanol (-20 °C). This procedure opens new horizons for the ex situ conservation of the species genetic.

No presente trabalho foram investigadas as condições para a indução, estabilização e proliferação de culturas embriogênicas de A. angustifolia. Foram também descritos os padrões de morfogênese e histodiferenciação de culturas embriogênicas e embriões somáticos desta espécie em resposta a diferentes fontes e concentrações de carboidratos. Embriões zigóticos no estágio pré-cotiledonar, inoculados em meio de cultura BM, suplementados com 5 µM de 2,4-D, 2 µM de BAP e Kin e 3% de maltose ou sacarose resultaram em uma taxa de indução de 66,7%. A fonte de carbono afetou a taxa de indução, a multiplicação e a morfologia das culturas. Culturas embriogênicas mantidas em meio de cultura BM suplementado com maltose apresentaram morfologia bipolar. Embriões somáticos globulares foram obtidos em meio de cultura BM suplementado com PEG e maltose. Os resultados obtidos permitirão avançar na direção de um protocolo regenerativo in vitro visando à conservação e o melhoramento genético desta espécie.

The aim of the present work was to establish in vitro conditions for the induction, stabilization and proliferation of embryogenic cultures of A. angustifolia. Pre-cotyledonary staged zygotic embryos inoculated BM medium supplemented with 5 µM 2,4- D, 2 µM BAP and Kin, and 3% maltose or sucrose resulted in 66.7% induction rate. The rate of induction of embryogenic cultures was affected by the carbon source, as well the multiplication and morphology of the embryogenic cultures. Embryogenic cultures maintained in BM medium with maltose presented bipolar morphology. Globular somatic embryos were obtained BM medium with 9% (PEG) and (9%) maltose. These results could establish an in vitro regenerative protocol towards the conservation and improvement of this important species.