Aim To evaluate the influence of the biomodification of erosive lesions with a chitosan nanoformulation containing green tea (NanoCsQ) on the clinical performance of a composite resin. Methods The study was performed in a split-mouth, randomized and double-blinded model with 20 patients with 40 erosive lesions. The patient’s teeth were randomized into two groups (n=20) according to the surface treatment: 1) Without biomodification (control), and 2) Biomodification with NanoCsQ solution (experimental). The lesions were restored with adhesive (Tetric N-bond, Ivoclar) and composite resin (IPS Empress Direct, Ivoclar). The restorations were polished and 7 days (baseline), 6 months, and 12 months later were evaluated according to the United States Public Health Service (USPHS) modified criteria, using clinical exam and photographics. Data were analyzed by Friedman’s and Wilcoxon signed-rank tests. Results No significant differences were found between the control and experimental groups (p=0.423), and also among the follow-up periods (baseline, six months, and 12 months) (p=0.50). Regarding the retention criteria, 90% of the restoration had an alpha score in the control group. Only 10% of the restorations without biomodification (control) had a score charlie at the 12-month follow-up. None of the patients reported post-operatory sensitivity. Conclusion The NanoCsQ solution did not negatively affect the performance of the composite resin restorations after 12 months.

RESUMO Objetivo Avaliar os efeitos da terapia fotodinâmica (PDT) na dura-máter usando os fotossensibilizadores cloreto de alumínio ftalocianina e azul de metileno em ensaios in vivo. Métodos Cinquenta e seis ratos Wistar machos divididos em dois grupos; um submetido à PDT e o outro submetido aos fotossensibilizadores sem a fotoativação (controle). Os fotossensibilizadores foram aplicados sobre a dura-máter depois de laminectomia no nível T10. Os métodos de avaliação usados foram a escala de avaliação funcional de Basso, Beattie e Bresnahan (BBB) e o estudo da dura-máter por microscopia óptica. Resultados Não foram observadas alterações da atividade motora dos animais submetidos à PDT com relação ao grupo controle. A avaliação histológica e histopatológica não mostrou diferenças entre o grupo exposto aos fotossensibilizadores ativados e o grupo controle, com relação ao processo inflamatório e à necrose tecidual. Conclusões O uso conjunto de PDT e os fármacos fotossensibilizantes cloreto de alumínio ftalocianina e azul de metileno não induziu efeitos neurotóxicos clínicos e/ou alterações histológicas sobre a dura-máter dos animais estudados. Nível de evidência V; Opinião de Especialista.

ABSTRACT Objective To evaluate the effects of photodynamic therapy (PDT) on the dura mater using the photosensitizers aluminum chloride phthalocyanine and methylene blue in in vivo assays. Methods Fifty-six male Wistar rats were divided into two groups; one submitted to PDT and the other submitted to the photosensitizers without their photoactivation (control). The photosensitizers were applied to the dura mater after laminectomy at the T10 level. The methods used for assessment were the Basso, Beattie and Bresnahan (BBB) functional evaluation scale and study of the dura mater by light microscopy. Results No changes in motor activity were observed in the animals submitted to PDT compared to control. Histological and pathological evaluation did not show any differences between the group exposed to activated photosensitizers and the control group with regard to the inflammatory process and tissue necrosis. Conclusion The joint use of PDT with the photosensitizing pharmaceuticals aluminum chloride phthalocyanine and methylene blue did not induce any clinical neurotoxic effects or histological changes in the dura mater of the animals studied. Level de evidence V; Expert Opnion.

RESUMEN Objetivo Evaluar los efectos de la terapia fotodinámica (PDT) en la duramadre utilizando los fotosensibilizadores de ftalocianina de aluminio clorada y azul de metileno en ensayos in vivo. Métodos Cincuenta y seis ratas Wistar machos se dividieron en 2 grupos; uno fue sometido a PDT y el otro sometido a fotosensibilizadores sin fotoactivación (control). Los fotosensibilizadores se aplicaron a la duramadre después de la laminectomía en el nivel T10. Los métodos de evaluación utilizados fueron la escala de evaluación funcional de Basso, Beattie y Bresnahan (BBB) y el estudio de la duramadre mediante microscopía óptica. Resultados No hubo cambios en la actividad motora de los animales sometidos a PDT en relación con el grupo de control. La evaluación histológica e histopatológica no mostró diferencias entre el grupo expuesto a fotosensibilizadores activados y el grupo de control con respecto al proceso inflamatorio y la necrosis tisular. Conclusiones El uso conjunto de PDT con las sustancias fotosensibilizadores ftalocianina de aluminio clorada y azul de metileno no indujo efectos neurotóxicos clínicos o cambios histológicos en la duramadre de los animales estudiados. Nivel de evidencia V; Opinión del Especialista.

Um método analítico por espectrofluorimetria foi desenvolvido para quantificar a protoporfirina IX (Pp IX) em amostras de pele e fase receptora após a realização de testes in vitro de penetração/permeação cutâneas. As condições analíticas utilizadas foram: comprimentos de onda de excitação e emissão: 400 nm e 632 nm; largura de banda: 0,5 nm; fendas de excitação e emissão: 10/10. A PpIX foi extraída de amostras de estrato córneo (EC) e da epiderme sem estrato córneo + derme ([E+D]) através da agitação em vórtex e sonicação por haste e banho, utilizando-se o DMSO como solvente extrator. O limite de detecção e quantificação foram, respectivamente, de 0,002 e 0,005 μg/mL. O método mostrou-se linear da faixa de 0,005 - 0,5 μg/mL. A precisão e exatidão intra e inter-ensaio em DMSO e na fase receptora foram validadas utilizando-se duas concentrações distintas, respectivamente, de 0,004 e 0,2 μg/mL, e 0,01 e 0,08 μg/mL. Os valores de coeficiente de variação e o desvio do valor teórico foram inferiores a 5%. A recuperação da PpIX das camadas da pele (EC e [E+D]) utilizando-se duas concentrações distintas (0,5 e 1,0 μg/mL) foram todas acima de 90,0%. O método descrito pode ser utilizado para determinação da PpIX após estudos de penetração/permeação cutânea in vitro utilizando pele de porco como modelo de membrana.

A fluorometric analytical method was developed for quantification of protoporphyrin IX (PpIX) in skin samples and receptor phase solution after in vitro cutaneous penetration/permeation studies. Analytical conditions used were: excitation and emission wavelengths: 400 nm and 632 nm; bandwidth: 0.5 nm; excitation and emission slits: 10/10. PpIX was recovered from two different layers of skin, the stratum corneum (SC) and the epidermis plus dermis ([E+D]), by vortex homogenization, probe and bath sonication, using DMSO as an extraction solvent. The detection and quantification limits were 0.002 and 0.005 μg/mL, respectively. The assay was linear from 0.005 - 0.5 μg/mL. The within-day and between-day assay precision and accuracy in DMSO and receptor phase solution were each studied at the two concentration levels 0.04 and 0.2 μg/mL, and 0.01 and 0.08 μg/mL, respectively. The coefficients of variation and deviation from the theoretical values were lower than 5%. The skin recovery of PpIX from SC and [E+D] layers using two different concentrations (0.5 and 1.0 μg/mL) were all above 90.0%. The method described has potential application to in vitro penetration/permeation studies of PpIX using porcine skin as a biological membrane model.

FUNDAMENTOS: A terapia fotodinâmica baseia-se na associação de fonte de luz e fotossensibilizador para destruir seletivamente as células. OBJETIVO: Avaliar os efeitos imediatos e tardios, a resposta clínica e os resultados estéticos da terapia fotodinâmica com ácido 5-aminolevulínico em neoplasias cutâneas não-melanoma. MÉTODOS: Trinta e quatro lesões, sendo 19 disceratoses de Bowen e 15 carcinomas basocelulares, foram submetidas à aplicação tópica e oclusiva do ácido 5-aminolevulínico a 20%, por seis horas, e posteriormente a sessão única de laser de diodo (630nm). RESULTADOS: Foram registrados: sensação de queimação durante as sessões; eritema, edema e erosões, nas primeiras 72 horas; cicatrização em média de quatro semanas; resultados estéticos variáveis de excelentes a bons. Aos três meses, a resposta clínica foi de 91,2%, sendo reduzida, aos 18 meses, para 73,3%, de modo similar tanto para disceratose de Bowen (72,2%) quanto para carcinoma basocelular (75%). Foi evidenciada relação de tendência linear entre a redução da freqüência da resposta clínica e o aumento da dimensão das neoplasias cutâneas não-melanoma (p<0,001). CONCLUSÃO: A terapia fotodinâmica com ácido 5-aminolevulínico tópico mostrou destacadas vantagens: minimamente invasiva no tratamento de lesões múltiplas em sessão única ou em sítios de pobre cicatrização com superioridade dos resultados estéticos. O tipo/subtipo(clínico e histopatológico), a dimensão e o adequado seguimento devem ser considerados para a sua indicação no tratamento de neoplasias cutâneas não-melanoma.

BACKGROUND: Photodynamic therapy is based on the association of a light source and photosensitizer in order to selectively destroy cells. OBJECTIVE: To evaluate the short and long-term effects, clinical response, and cosmetic outcome of the photodynamic therapy with 5-aminolaevulinic acid for non-melanoma skin cancer. METHODS: TThirty-four non-melanoma skin cancer - 19 Bowen’s diseases and 15 basal cell carcinomas, were submitted to a single 6-hour topical and occlusive application of 20% 5-aminolaevulinic acid, and were later exposed to 630 nm diode laser single session. RESULTS: Burning sensation during the session; erythema, edema and erosions in the first 72 hours; healing process after 4 weeks on average and excellent or good cosmetic results were observed. After 3 months, tumor-free rate was 91.2% whereas at 18 months,73.3%, similarly in Bowen’s disease (72.2%) and basal cell carcinoma (75%). It was noticed a linear relation between the reduction in complete clinical response frequency and the increase in tumor dimension (p<0.001). CONCLUSION: The 5-aminolaevulinic acid photodynamic therapy showed significant advantages such as minimally invasive for the treatment of multiple lesions in only one session or lesions in poor healing sites with superior esthetical outcome. The clinical and histopathological type/sub-type, the dimension and an appropriate follow-up must be considered to indicate topical 5-aminolaevulinic acid photodynamic therapy for non-melanoma skin cancer.

FUNDAMENTOS - Ftalocianinas são promissores agentes fotossensibilizadores na terapia fotodinâmica (TFD). OBJETIVOS - Avaliar intervalos, veículos e a incorporação de promotor de absorção na formulação tópica da ftalocianina de zinco (FC-Zn). Avaliar alterações macro e micromorfológicas e a expressão de Fas promovidas pela TFD com FC-Zn tópica no modelo murino. MÉTODOS - Por meio da espectrometria de fluorescência, foram avaliadas combinações de diferentes períodos de oclusão tópica das formulações gel ou emulsão de FC-Zn (1mg/dl), com ou sem monoleína 5%, no dorso do camundongo hairless. Após oito horas das diferentes formulações, os camundongos foram expostos ao laser de diodo de 670nm, dose de 50J/cm-². RESULTADOS - A fluorescência foi discretamente superior após oito horas e com a emulsão nos intervalos de uma, duas e quatro horas de oclusão. A intensidade do edema e da erosão correspondeu à necrose da epiderme e à imunoexpressão de Fas nos cortes histológicos de pele. CONCLUSÕES - Os achados indicam a ação fotodinâmica promovida pela interação entre FC-Zn e fonte de luz de 670nm. As alterações macro e micromorfológicas foram correspondentes e mais substanciais com a emulsão FC-Zn e monoleína, sugerindo a acentuação dos efeitos com essa formulação. A imunoexpressão de Fas e as alterações histológicas sugeriram a apoptose como mecanismo de morte celular na TFD com FC-Zn tópica.

BACKGROUND - Phthalocyanines are promising photosensitizers used in photodynamic therapy (PDT). OBJECTIVES - To evaluate the following parameters: intervals, vehicles and enhancer using topical zinc-phthalocyanine (Zn-PC) formulation. To examine macro and micromorphological changes and Fas expression induced by topical Zn-PC-PDT on murine skin. MATERIAL AND METHODS - Using fluorescence spectrometry, different intervals of topical occlusion employing Zn-PC gel or emulsion, with or without monolein 5% were studied. After an 8-hour occlusion of different formulations, the mice were exposed to 670 nm laser, at a 50 J.cm-² dose. RESULTS - Fluorescence was slightly higher after 8 hours, and also with emulsion formulation at one-, two- and four-hour occlusion periods. The intensity of edema and erosion were correlated to epidermal necrosis and to Fas immunoexpression in skin histological specimens. CONCLUSIONS - The results show the effects of photodynamic action promoted by the interaction between Zn-PC formulation and a 670-nm light source. Macro and micromorphological alterations were correlated and more substantial with monolein and Zn-PC emulsion, suggesting more marked effects with this formulation. The Fas immunoexpression and histological changes suggested that apoptosis plays a role in the mechanism of cell death caused by PDT based in Zn-PC.

Estradiol, o mais importante hormônio feminino, foi complexado com hidroxipropil-beta-ciclodextrina (HP-beta-CD) e metil-beta-ciclodextrina randômica (RM-beta-CD). Após a obtenção dos complexos, os mesmos foram caracterizados por estudos de solubilidade, CDV e RMN-H¹. O efeito das CDs sobre a absorção/retenção do estradiol na pele foi investigado in vitro em células de difusão de Franz. As CDs aumentaram a solubilidade aquosa do estradiol em diferentes proporções. As análises de CVD e RMN-H¹ comprovaram a complexação do estradiol com ambas CDs, sendo que RM-beta-CD apresentou interação mais forte com estradiol do que HP-beta-CD. Mais adiante, a formação de complexos aumentou o fluxo de estradiol através da pele (P<0,01), mas o aumento de fármaco no estrato córneo (EC) foi observado somente após complexação com HP-beta-CD. Por outro lado, somente a RM-beta-CD foi capaz de aumentar a retenção do fármaco no EC após o pré-tratamento da pele com CDs. Os resultados sugerem que o efeito promotor das CDs no fluxo de estradiol pode ser descrito principalmente como aumento da disponibilidade de fármaco na superfície da pele devido à complexação. Além disso, a formação de um significativo reservatório do hormônio no EC torna a complexação com HP-beta-CD uma estratégia interessante para liberação transdérmica do estradiol.

Estradiol, the most important hormone in females, was complexed with hydroxypropyl-beta-cyclodextrin (HP-beta-CD) and randomly methylated beta-cyclodextrin (RM-b-CD). After obtaining the inclusion complexes, they were characterized by DSC, ¹H-NMR and solubility studies. The enhancing effect of CDs on estradiol skin permeation/retention was investigated in vitro using Franz diffusion cells. Both CDs increased estradiol aqueous solubility, but in different proportions. DSC and NMR-H¹ analyses showed that estradiol was complexed with both CDs and RM-beta-CD has stronger interactions with the hormone than HP-beta-CD. Moreover, complexes formation increased estradiol flux through the skin (P<0.01), but the hormone retention in the stratum corneum (SC) only increased after complexation with HP-beta-CD. On the other hand, only RM-b-CD was able to modify estradiol retention in the SC after skin pretreatment with CDs. The results suggest that the enhancing effect of CDs on estradiol flux through the skin may be mainly described as an increase in drug availability on the skin surface due to inclusion complexation. Furthermore, the formation of a significant reservoir of estradiol in the SC due to HP-beta-CD complexation makes it an interesting approach for estradiol transdermal delivery.

A terapia fotodinâmica (TFD) está baseada na administração e no acúmulo de fotossensibilizador, por exemplo, de tipo porfirina ou clorina, em tecidos doentes. As clorinas apresentam propriedades fotofísicas semelhantes àquelas das porfirinas, mas com intensificação e deslocamento das bandas Q, o que faz com que sejam bons candidatos para TFD. Neste trabalho relata-se a síntese da 5,10,15-tris(pentafluorofenil)-20-(4-piridil)porfirina, (2), e das clorinas isômeras 4, (5,10,20-tris(pentafluorofenil)-15-(4-piridil)-tetra-hidro-1H- N-metil-pirrolo[3,4-b]porfirina e 5, (5,10,15-tris(pentafluorofenil)-20-(4-piridil)-tetra-hidro-1H- N-metil-pirrolo[3,4-b]porfirina, obtidas a partir de 2, por reação de cicloadição 1,3-dipolar com um ileto azometínico, e respectivas caracterizações estruturais por UV-Vis, RMN e EM-FAB. Foram avaliadas as propriedades fotofísicas, fotoquímicas e fotodegradativas para a nova clorina 4, obtida com melhor rendimento que o seu isômero 5. O rendimento quântico de fotodegradação (fiFd, mol Einstein-1) foi de 0,047±0,014. Foram ainda realizados testes com ácido úrico para demonstrar a capacidade do fotossensibilizador na produção de ¹O2. Os resultados mostraram que a nova clorina 4 pode ser considerada como um bom fotossensibilizador para TFD.

Photodynamic therapy (PDT) is based on the accumulation of a photosensitizer, such as a porphyrin or a chlorin, in a malignant tissue after its administration. Chlorins exhibit photophysical properties similar to those of the porphyrin macrocycles, but with intensified and red-shifted Q bands, making chlorin-containing systems even better candidates for PDT. In this contribution, we report the synthesis of 5,10,15-tris(pentafluorophenyl)-20-(4-pyridyl)porphyrin, (2) and its transformation to the novel chlorin derivatives 4, (5,10,20-tris(pentafluorophenyl)-15-(4-pyridyl)-tetrahydro-1H- N-methyl-pyrrolo [3,4-b]porphyrin and 5, (5,10,15-tris(pentafluorophenyl)-20-(4-pyridyl)-tetrahydro-1H- N-methyl-pyrrolo[3,4-b]porphyrin) by 1,3-dipolar cycloaddition with an azomethine ylide. The new products have been characterized by UV-Vis, ¹H NMR and FAB-MS. The photophysics, photochemical and photobleaching properties of chlorin 4 have been evaluated. Its quantum yield of photobleaching (phiPb, mol Einstein-1) was 0.047±0.014. In order to demonstrate the production of ¹O2 when 4 is used as a photosensitizer, uric acid tests have been carried out. The results indicate that chlorin 4 can be considered a promising photosensitizer in PDT.

As hidroxinitrofenilporfirinas, 5,10,15,20-tetrakis(2-hidroxi-5-nitrofenil)porfirina e 5-mono(carboxifenil)-10,15,20-tris(2-hidroxi-5-nitrofenil)porfirina , estudadas neste trabalho, foram preparadas pelo método de Adler e caracterizadas por ¹H RMN e por espectroscopia de absorção e emissão na região espectral visível. A formação de ¹O2 foi constatada através do teste do ácido úrico (AU), o qual consiste na observação do decréscimo na absorbância da banda do AU em 293 nm, após irradiação da solução, com laser, contendo o fotossenssibilizador e o AU. Os resultado obtidos indicaram que as hidroxinitrofenilporfirinas podem ser consideradas potenciais fotossensibilizadores para terapia fotodinâmica.

The hydroxynitrophenylporphyrins, 5,10,15,20-tetrakis(2-hydroxy-5-nitrophenyl)porphyrin and 5-mono(carboxyphenyl)-10,15,20-tris(2-hydroxy-5-nitrophenyl)porphyrin described in this work were prepared through Adler's method. These compounds were characterized by ¹H NMR and light absorption and emission spectroscopy in the visible region. In order to demonstrate the involvement of ¹O2 production, the uric (UA) acid test was carried out, which considers the decrease in the absorbance of UA at 293 nm following laser light irradiation of a solution containing UA and a photosensitizer. The results obtained demonstrate that these hydroxynitrophenylporphyrins can be considered as promising photosensitizers in PDT.