RESUMO Neste estudo, os efeitos tóxicos da melitina em células Madin-Darby Bovine Kidney (MDBK) foram analisados quanto à funcionalidade mitocondrial, por redução de MTT e citometria de fluxo, potencial de apoptose, necrose, produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), peroxidação lipídica e fragmentação de DNA, utilizando-se citometria de fluxo e desestabilização da membrana celular, por microscopia confocal. A toxicidade apresentou características dose-dependentes e a atividade mitocondrial foi inibida até 78,24±3,59% (P<0,01, n = 6) em células MDBK expostas à melitina (10μg/mL). Análises por citometria de fluxo revelaram que a melitina a 2μg/mL apresentou o maior índice necrótico celular (P<0,05). A maior lipoperoxidação de membranas também foi na concentração de 2μg/mL de melitina (P<0,05), o que foi posteriormente confirmado por microscopia confocal. A maior produção de ROS aconteceu quando as células foram expostas a 2,5μg/mL de melitina (P<0,05), e essa concentração também aumentou a fragmentação de DNA (P<0,05). Houve uma significativa correlação positiva entre a lipoperoxidação de membranas e a produção de ROS (R=0,4158), funcionalidade mitocondrial (R=0,4149) e apoptose (R=0,4978). Portanto, o estresse oxidativo gerado pela melitina culminou na elevação de ROS intracelular, que inicia uma cascata de eventos tóxicos nas células MDBK.

ABSTRACT In this study, the toxic effects of melittin on Madin-Darby Bovine Kidney cells (MDBK) were analyzed with respect to mitochondrial functionality by reduction of MTT and flow cytometry, apoptosis potential, necrosis, oxygen reactive species (ROS) production, lipid peroxidation, and DNA fragmentation using flow cytometry and cell membrane destabilization by confocal microscopy. The toxicity presented dose-dependent characteristics and mitochondrial activity was inhibited by up to 78.24 ±3.59% (P<0.01, n = 6) in MDBK cells exposed to melittin (10μg/mL). Flow cytometry analysis revealed that melittin at 2μg/mL had the highest necrosis rate (P<0.05) for the cells. The lipoperoxidation of the membranes was also higher at 2μg/mL of melittin (P<0.05), which was further confirmed by the microphotographs obtained by confocal microscopy. The highest ROS production occurred when the cells were exposed to 2.5μg/mL melittin (P<0.05), and this concentration also increased DNA fragmentation (P<0.05). There was a significative and positive correlation between the lipoperoxidation of membranes with ROS (R=0.4158), mitochondrial functionality (R=0.4149), and apoptosis (R=0.4978). Thus, the oxidative stress generated by melittin culminates in the elevation of intracellular ROS that initiates a cascade of toxic events in MDBK cells.

Abstract The spittlebugs Mahanarva spectabilis economically challenges cattle production of neotropical regions, due to its voracious feeding on tropical grasses. Here, we evaluated biochemical responses of the interaction between M. spectabilis and the widely cultivated tropical grasses Brachiaria spp. (i.e., brizantha and decumbens) and elephant grasses (cvs. Roxo de Botucatu and Pioneiro), regarding lipoxygenases, protease inhibitors, phytohormones, and proteolytic activities in the midgut of M. spectabilis. The M. spectabilis-infested grasses increased lipoxygenases activity, except for cv. Pioneiro. The levels of the phytohormones jasmonic and abscisic acids were similarly low in all genotypes and increased under herbivory. Furthermore, salicylic acid concentration was constitutively higher in Brachiaria sp., increasing only in spittlebug-infested B. decumbens. M. spectabilis infestations did not induce increases of protease inhibitors in any forage grass type. The trypsin activity remained unaltered, and the total proteolytic activity increased only in B. decumbens-fed insects. Our findings revealed that most forage grasses exposed to spittlebugs activate the lipoxygenases pathway, resulting in increased abscisic and jasmonic acids. However, greater amounts of these hormones do not induce protease inhibitory activity in response to spittlebug attack. This knowledge certainly helps to guide future projects aiming at reducing the impact of spittlebugs on forage production.

RESUMO Das células do sistema imunológico, macrófagos desempenham um papel fundamental. Apamina, constituinte do veneno de abelhas, é importante na defesa destas. Objetivou-se avaliar o metabolismo da linhagem de macrófagos J774 1.6 expostos à apamina isolada e purificada, avaliando-se citotoxicidade por redução de MTT e análise por citometria de fluxo (apoptose / necrose, produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), lipoperoxidação membranosa (LPO), potencial elétrico da membrana mitocondrial (MMP) e fragmentação do DNA). Nenhuma concentração testada (10 a 100μg / mL) foi citotóxica. As taxas de apoptose diminuíram nas concentrações 2,5, 5,0 e 10,0μg / mL (P<0,05), enquanto as de necrose aumentaram (P<0,05). Entretanto, as taxas de células saudáveis na maior concentração testada (10μg / mL) não diferiram do controle (P>0,05). A apamina não alterou as ERO, a LPO nem a fragmentação do DNA. Portanto, todas as concentrações analisadas (1,25 a 10μg / mL) diminuíram a mMP. Tal diminuição na apoptose pode ser por uma supressão de mensageiros pró-apoptóticos mitocondriais, já que este peptídeo não causa estresse oxidativo, peroxidação lipídica nem dano ao DNA. Técnicas altamente sensíveis são importantes para adequada interpretação dos mecanismos de citotoxicidade.

ABSTRACT Among the immune system cells, macrophages have an important role. Apamin, a bee venom constituent, is important in the defense of these insects. Thus, we aimed to evaluate the metabolism of J774 1.6 macrophage cell line when exposed to isolated and purified apamin, using cytotoxicity tests by MTT reduction and analysis by flow cytometry (apoptosis / necrosis, production of reactive oxygen species (ROS), membranous lipoperoxidation (LPO), electrical potential of the mitochondrial membrane (mMP) and DNA fragmentation). None of the tested concentrations (10 to 100μg/mL) were cytotoxic according to MTT reductions. Apoptosis rates decreased at concentrations of 2.5, 5.0, and 10.0μg/mL (P<0.05), while necrosis rates increased (P<0.05). However, rates of healthy cells at the highest tested concentration (10μg/mL) did not differ from control (P>0.05). Apamin did not alter ROS, LPO, or DNA fragmentation. Therefore, all analyzed concentrations (1.25 to 10μg/mL) decreased mMP. Such decrease in apoptosis might be due to a suppression of mitochondrial pro-apoptotic messengers, as this peptide causes no oxidative stress, lipid peroxidation, and DNA damage. Highly sensitive techniques are majorly important for proper interpretation of cellular toxicity mechanisms, combined with routine laboratory methods.

RESUMO Neospora caninum é o principal agente etiológico da neosporose em animais domésticos, e sua patogênese compreende duas fases características: aguda e crônica. Roedores são usados como modelos experimentais para simular neosporose bovina aguda e crônica. Neste estudo, foi inoculado um total de 27 gerbilos, fêmeas, com diferentes doses de taquizoítos de N. caninum, visando induzir doença crônica. O DNA foi extraído de diferentes órgãos de cada animal após a morte espontânea ou a eutanásia. Os tecidos encefálicos foram submetidos à PCR em tempo real de alta sensibilidade para detecção de animais com infecção crônica. Todas as outras amostras foram submetidas à PCR padrão. Um total de 11 gerbilos morreu devido à neosporose aguda, como confirmado pela detecção de DNA de N. caninum nos órgãos. A dosagem de antígeno que pode induzir infecção crônica foi de 5x103 taquizoítos/mL de N. caninum. Em seções do encéfalo de alguns animais, que apresentaram sinais clínicos de infecção persistente, encontraram-se 70% de positividade para a seção do encéfalo anterior, sugerindo essa área como preferencial para a formação de cisto. Assim, foram determinadas,, em gerbilos, as dosagens de taquizoítos capazes de induzir infecção crônica ou aguda, bem como foram detectados tecidos positivos, preferencialmente, em órgãos sistêmicos, na fase aguda, e no encéfalo, na crônica.

ABSTRACT Neospora caninum is the main etiologic agent of neosporosis in domestic animals and its pathogenesis comprises two characteristic phases: acute and chronic. Rodents are used as experimental models to mimic acute and chronic bovine neosporosis. In this study, we inoculated a total of 27 female gerbils, with different doses of N. caninum tachyzoites aiming to induce chronic disease. DNA was extracted from different organs of each animal after spontaneous death or euthanasia. Encephalic tissues were submitted to a highly sensitive real time PCR aiming to detect chronically infected animals. All the other samples were submitted to standard PCR. A total of 11 gerbils died due to acute neosporosis, as confirmed by N. caninum DNA detection in organs. 5x103 tachyzoites/mL of N. caninum was the dosage of antigen that can induce chronic infection in gerbils. In the encephalon sections of some animals that showed clinical signs of persistent infection, we found 70% positive for the anterior encephalon section, suggesting this area as preferential for cyst formation. Therefore, we determined the doses of tachyzoites that cause acute or chronic infection and detection of positive tissues, preferably, systemic organs during acute and encephalon in chronic phases.

RESUMO: A buva [Conyza bonariensis (L.) Cronq.] resistente ao glyphosate é uma das principais plantas daninhas do mundo. Um dos fatores que fazem com que esta planta esteja amplamente distribuída nos mais diversos ambientes é sua alta capacidade de produção e dispersão de sementes. Plantas de buva não controladas pela aplicação de herbicidas rebrotam e sobressaem-se ao dossel da cultura, se beneficiam dos recursos do ambiente, interferem com as culturas, completam seu ciclo produzindo milhares de sementes e realimentando o banco de sementes. Estratégias de manejo que reduzam a produção e viabilidade de sementes de buva podem ser adotadas dentro do manejo integrado, a fim de o banco de sementes e prevenir futuras infestações. Foram realizados experimentos em casa de vegetação e em laboratório de análise de sementes com o objetivo de avaliar o efeito da aplicação de glyphosate nos estádios vegetativo e reprodutivo na produção e viabilidade de sementes de buva resistente ao glyphosate (1.480 g e.a. ha-1). Os resultados demonstram que a produção de sementes reduziu em 68,4% e 100% quando o glyphosate foi aplicado em plantas de buva nos estádios vegetativo e início do reprodutivo, respectivamente, em relação a plantas não tratadas. A viabilidade das sementes de buva não foi influenciada pelos tratamentos nos estádios avaliados. Entretanto, a aplicação do glyphosate no estádio vegetativo da buva reduz a produção de sementes. A produção de sementes de buva é inviabilizada quando o glyphosate é aplicado no início do estádio reprodutivo.

ABSTRACT: Glyphosate-resistant hairy fleabane [Conyza bonariensis (L.) Cronq.] is one of the most important weeds in the world. Among the factors that make this weed species widely distributed in the most diverse environments is the high seed production capacity and dispersal. Hairy fleabane plants not controlled by herbicide application regrowth and overcome crop canopy, use environmental resources, interfere with crops, and complete their life cycle by producing thousands of seeds and replenishing the seed bank. Management strategies that reduce production and viability of hairy fleabane seeds can be adopted within the integrated management to reduce the seed bank and prevent further infestations. In this way, experiments were carried out in a greenhouse and laboratory of seed analysis to evaluate the effect of glyphosate (1,480 g a.e. ha-1) on the production and viability of glyphosate-resistant hairy fleabane seeds when applied at the vegetative and reproductive stages. Seed production was reduced by 68.4 and 100% when glyphosate was applied on hairy fleabane plants at the vegetative and early reproductive stages, respectively, regarding to the control. The viability of hairy fleabane seeds was not influenced by treatments at the evaluated stages. However, glyphosate treatment reduced the hairy fleabane seed production when applied at the vegetative stage . Hairy fleabane seed production is not feasible when glyphosate is applied at the early reproductive stage.

RESUMO: A canola é uma importante cultura para rotação na estação fria, e o uso de híbridos com resistência à atrazina pode contribuir para o aumento da produtividade. Este trabalho objetivou avaliar o efeito da atrazina nos processos fotoquímicos e bioquímicos da fotossíntese em canola resistente a triazinas. O experimento foi conduzido em casa de vegetação, com o híbrido resistente à triazina Hyola® 555TT, no delineamento em blocos casualizados com três repetições. Os tratamentos consistiram da aplicação ou não de atrazina nas plantas de canola. As plantas foram avaliadas em um, três, cinco e oito dias após a aplicação (DAA) quanto aos índices de clorofila, fluorescência modulada da clorofila a e troca de gases. Os índices de clorofila foram maiores nas plantas de canola tratadas com atrazina. A aplicação deste herbicida ocasionou aumento na fluorescência em estado estável e redução na eficiência quântica do fotossistema II e na taxa de transporte de elétrons, em 1 DAA, bem como redução na dissipação fotoquímica, em 1 e 3 DAA. Menor condutância estomática, em 1 DAA, e maior taxa de assimilação líquida de carbono, em 8 DAA, foram observados em plantas tratadas com atrazina. A aplicação de atrazina temporariamente o transporte de elétrons entre os fotossistemas e aumenta os índices de clorofila em plantas de canola resistentes, aumentando a taxa de assimilação líquida de carbono aos oito dias após a aplicação.

ABSTRACT: Canola is an important rotation crop for the winter season and the use of atrazine-resistant hybrids can lead to an increase in yield. This work was aimed at evaluating the effect of atrazine on photochemical and biochemical processes of photosynthesis in triazine-resistant canola. The experiment was conducted in a greenhouse, with triazine-resistant hybrid Hyola® 555TT, in a randomized block design with three replications. The treatments consisted of application or no application of atrazine on canola plants. The plants were assessed at one, three, five, and eight days after application (DAA) for chlorophyll indexes, modulated chlorophyll a fluorescence and gas exchange. Chlorophyll indexes were higher in canola plants treated with atrazine. Application of atrazine caused an increase in fluorescence at steady state and a reduction in quantum efficiency of photosystem II and electron transport rate, at 1 DAA, and a reduction in photochemical quenching, at 1 and 3 DAA. Lower stomatal conductance, at 1 DAA, and higher net carbon assimilation rate, at 8 DAA, were found in plants treated with atrazine. The application of atrazine temporarily reduces electron transport between photosystems and increases chlorophyll indexes in resistant canola plants, raising the net carbon assimilation rate at eight days after application.

RESUMO: Este trabalho objetivou comparar a habilidade competitiva de híbridos de canola, suscetível (convencional) ou com resistência aos herbicidas do grupo das triazinas ou das imidazolinonas, com o nabo. Os experimentos foram conduzidos em casa de vegetação, no delineamento inteiramente casualizado com quatro repetições. Foram utilizados os híbridos Hyola 571CL (resistente a imidazolinonas), Hyola 555TT (resistente a triazinas) e Hyola 61 (convencional). Os tratamentos consistiram de proporções (100:0; 75:25; 50:50; 25:75; 0:100%) de plantas de canola e do nabo. A avaliação foi realizada aos 44 dias após a emergência, determinando-se a área foliar (AF), matéria seca de parte aérea (MSPA) e estatura (EST) de plantas. A análise da competitividade foi feita por meio de diagramas e interpretação dos índices de competitividade. Para os híbridos de canola, a competição ocorreu pelos mesmos recursos do meio. Houve prejuízo ao crescimento da cultura em competição com o nabo. O nabo somente não foi beneficiado quando em competição com o híbrido Hyola 571CL, para a variável EST, e com a canola convencional, para a variável AF. Houve significância para os índices de competitividade, demonstrando que o nabo é mais competitivo que a cultura. Maior AF, MSPA e EST ocorreu para plantas de canola nas menores proporções de nabo e, para plantas de nabo, nas maiores proporções de canola. A habilidade em competir com o nabo é semelhante entre os híbridos, havendo prejuízo à cultura e benefício à planta daninha, quando em competição. A competição interespecífica é mais prejudicial para os híbridos de canola, e a competição intraespecífica, para o nabo.

ABSTRACT: This work aimed to compare the competitive ability of canola hybrids susceptible (conventional) or resistant to triazine or imidazolinone group herbicides, with turnip. The experiments were conducted in greenhouse, in a completely randomized design, with four replicates. The hybrids Hyola 571CL (resistant to imidazolinone), Hyola 555TT (resistant to triazine), and Hyola 61 (conventional) were used. The treatments consisted of ratios (100:0; 75:25; 50:50; 25:75; 0:100%) of canola and turnip plants. The evaluation was performed 44 days after emergence, determining the leaf área (AF), dry matter of aerial part (MSPA), and stature (EST) of the plants. The competitiveness analysis was performed through diagrams and interpretation of the competitiveness indexes. For the canola hybrids, the competition occurred by the same mean resources. There was damage to the crop growth in competition with the turnip. The turnip was not benefited only when in competition with Hyola 571CL hybrid, for the EST variable, and with the conventional canola, for the variable AF. There was significance for the competitiveness indexes, demonstrating that turnip is more competitive then the crop. Greater AF, MSPA, and EST occurred for canola plants in the smallest proportions of turnip and, for turnip plants, in the largest proportions of canola. The ability to compete with turnip is similar among hybrids, with injury to the crop and benefit to the weed, when competing. Interspecific competition is more damaging to canola hybrids; and intraspecific competition is more damaging to turnip.

RESUMO: A alta capacidade de produção e dispersão de sementes e a resistência ao glyphosate estão entre os principais fatores que tornaram a buva (Conyza bonariensis) uma das mais importantes e dispersas plantas daninhas no mundo. Populações de plantas resistentes a herbicidas podem apresentar penalidades em função das alterações moleculares, fisiológicas e bioquímicas. O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade fisiológica das sementes de biótipos de Conyza spp. e determinar se a resistência ao glyphosate causa penalidades aos biótipos resistentes. Foram avaliadas sementes de seis biótipos de buva, sendo três resistentes e três sensíveis ao glyphosate, com fator de resistência de 11,7. Entre os biótipos estudados, cinco foram identificados como C. bonariensis e um como C. blakei. As análises das sementes foram realizadas no delineamento completamente casualizado com dez repetições de 100 sementes cada (1.000 sementes por biótipo). As sementes utilizadas nas análises foram originadas de plantas de segunda geração de autopolinização com taxa de segregação conhecida. Os resultados médios indicam que, em relação aos biótipos sensíveis de C. bonariensis, as sementes dos biótipos resistentes apresentaram redução de 16% no vigor e 13% na germinação, aumento de 44% no número de sementes vazias e em torno de cinco vezes mais sementes dormentes viáveis. A menor qualidade fisiológica de sementes da buva resistente ao glyphosate indica que a resistência causa penalidade. Essa penalidade implica redução do potencial invasivo e persistência no ambiente dos biótipos resistentes. Assim, na ausência do fator seletivo glyphosate, a frequência de biótipos resistentes tende a diminuir e retornar a suscetibilidade. Entretanto, o maior número de sementes dormentes viáveis dos biótipos resistentes abastece o banco de sementes do solo. Todos os biótipos de C. bonariensis apresentaram maior qualidade fisiológica das sementes em comparação ao biótipo de C. blakei, indicando que a primeira espécie é mais evoluída do ponto de vista adaptativo para sobrevivência em áreas agrícolas.

ABSTRACT: High seed production and dispersal capacity and glyphosate resistance are among the main factors that have made hairy fleabane (Conyza bonariensis) one of the most important and dispersed weeds in the world. Herbicide-resistant weeds populations may have fitness cost due to molecular, physiological, and biochemical changes. This study aimed to evaluate the physiological quality of seeds of Conyza spp. and determine whether glyphosate resistance causes fitness costs for resistant biotypes. Seeds from six hairy fleabane biotypes, three glyphosate-resistant and three -sensitive, with a resistance factor average of 11.7 were studied. Among the studied biotypes, five were identified as C. bonariensis and one as C. blakei. Seed analyses were performed in a completely randomized design with ten replications of 100 seeds each (1,000 seeds per biotype). The analyzed seeds were originated from second-generation self-pollinating plants with known segregation rate. The mean results indicate that, in relation to sglyphosate-sensitive biotypes of C. bonariensis, seeds from -resistant biotypes showed a 16% reduction in vigor and 13% in germination, a 44% increase in the number of empty seeds and approximately five times more viable dormant seeds. The lower physiological quality of glyphosate-resistant hairy fleabane seeds regarding to -sensitive indicates that resistance affect the seed’s physiology and causes a fitness costs. It implies a reduction of invasive potential and persistence in the environment of resistant biotypes. Therefore, in the absence of glyphosate as a selective factor, the frequency of resistant biotypes tends to decrease and increase the predominancy of glyphosate-sensitivre biotypes. However, the highest number of viable dormant seeds of resistant biotypes supplies the soil seed bank. All biotypes of C. bonariensis showed higher physiological quality of seeds when compared to C. blakei, indicating that the first species is more adaptably evolved for survival in agricultural and disturbed areas.

RESUMO P34 é um peptídeo antimicrobiano produzido pelo Bacillus sp. P34, isolado do conteúdo intestinal de um peixe na Bacia Amazônica. Esse peptídeo demonstrou propriedades antibacterianas contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativas e foi caracterizado como uma substância do tipo bacteriocina. Foi demonstrado que o peptídeo P34 exibiu atividade antiviral contra o herpesvírus felino tipo 1 in vitro. O objetivo deste trabalho foi avaliar o P34 in vitro, em cultivo de células RK 13, contra o vírus da arterite equina, uma vez que não há tratamento específico e uma variável proporção de garanhões pode permanecer persistentemente infectada. Os resultados obtidos mostram que o peptídeo exerce atividade antiviral e virucida contra o vírus da arterite equina, agindo provavelmente no envelope viral. Os ensaios antivirais realizados demonstraram que o P34 reduz significativamente os títulos do vírus nas células infectadas e tratadas. O mecanismo de ação do P34 parece ser tempo/temperatura dependente. Esse peptídeo tende a ser um antiviral promissor para o tratamento e a prevenção das infecções por arterivírus, tendo em vista que ele possui um alto índice terapêutico. Contudo, estudos mais detalhados devem ser realizados para precisar a etapa exata da infecção viral em que o P34 age, para que ele possa ser usado como antiviral in vivo no futuro.

ABSTRACT P34 is an antimicrobial peptide produced by Bacillus sp. P34, isolated from the intestinal contents of a fish from the Amazon basin. This peptide showed antibacterial properties against Gram-positive and Gram-negative bacteria and was characterized as a bacteriocin like substance. It was demonstrated that the peptide P34 exhibited antiviral activity against feline herpesvirus type 1 in vitro. The aim of this work was to evaluate P34 for its antiviral properties in vitro, using RK 13 cells, against the equine arteritis virus, since it has no specific treatment and a variable proportion of stallions may become persistently infected. The results obtained show that P34 exerts antiviral and virucidal activities against equine arteritis virus, probably in the viral envelope. The antiviral assays performed showed that P34 reduces significantly the viral titers of treated cell cultures. The mechanism of action of P34 seems to be time/temperature-dependent. This peptide tends to be a promising antiviral compound for the prevention and treatment of arteriviral infections since it has a high therapeutic index. However, more detailed studies must be performed to address the exact step of viral infection where P34 acts, in order to use this peptide as an antiviral drug in vivo in the future.

Este trabalho teve como objetivo avaliar o comportamento da resistência à compressão, ao longo do tempo, em amostras de argamassas à base de cinzas volantes álcali-ativadas. Como ativador alcalino foi utilizada uma solução combinada de NaOH e Ca(OH)2. A cura das amostras foi realizada de duas formas distintas. Na primeira, as amostras foram mantidas em estufa à 70°C/12 h e à temperatura constante de 22°C em sala climatizada até a idade de ensaio. Apesar de serem obtidas resistências da ordem de 20 MPa nas primeiras 24 h, houve decréscimo da resistência a partir da idade de 7 dias. Verificado esse comportamento, um segundo método de cura foi adotado. Para isso, o traço utilizado para o preparo de novas argamassas foi o mesmo adotado no método anterior. Porém, foram submetidas à temperatura constante de 70°C até a idade de ensaio. Nesse caso, as amostras apresentaram decréscimo mais acentuado da resistência em menor espaço de tempo, quando comparado às amostras curadas no primeiro método. Como estudos complementares foram realizadas análises microestruturais da CV antes e depois da álcali-ativação, utilizando o MEV/EDS. Nas imagens microestruturais foi possível identificar três morfologias distintas nas pastas álcali-ativadas: uma composta de regiões com aspecto denso; outra apresentando partículas de cinzas volantes parcialmente solubilizadas; e outra mostrando a formação de produtos em forma de cristais aciculares. Porém, apenas o uso do MEV/EDS não foi suficiente para que se pudesse entender o mecanismo de reação deletéria provocada entre os ativadores alcalinos e a cinza volante. Portanto, trabalhos futuros deverão contemplar o uso de ferramentas auxiliares às adotadas nesse trabalho com o objetivo de esclarecer tal mecanismo deletério.

The main objective of this work was to evaluate over time the development of the compressive strength of alkali-activated fly ash mortars. A combined solution of NaOH and Ca(OH)2 was used as alkaline activator. The curing of the samples was carried out in two distinct ways. In the first one, samples were kept at 70°C during the first 12 hours after mixing and at 22°C afterwards, until the age of testing. Although compressive strengths of about 20 MPa were achieved during the first 24 hours, the strength started to decrease after 7 days. Considering this behaviour, a second method of curing was adopted. The mix proportions were the same as before, however the mortar samples were kept in an oven at 70°C until the age of testing. In this case, the compressive strength values decreased more significantly and in a shorter period of time, as compared to the results obtained for samples cured using the first method. Complementary studies were performed in order to better understand the observed reduction in compressive strength. Microstructural analyses of the fly ash, before and after the alkali-activation, have been carried out using Scanning Electron Microscopy (SEM) and Energy-Dispersive Spectroscopy (EDS). It was possible to identify three different morphologies in the alkali-activated pastes: one composed by regions with dense aspect; other showing partially solubilised particles of fly ash; and a third showing the formation of products with a needle-like shape. The information provided by the SEM/EDS experiments was not enough to enable the complete understanding of the mechanism of the deleterious reaction that took place among the alkaline activators and the fly ash. Therefore, future studies should address this question by using additional analysis tools in order to clarify this deleterious mechanism.