Efeitos do laser sobre a cirrose hepática

The effect of laser irradiation on liver cirrhosis

EFEITOS DO LASER SOBRE A CIRROSE HEPÁTICA

THE EFFECT OF LASER IRRADIATION ON LIVER CIRRHOSIS

Adriana Augusta Lopes de Araujo Lima¹; Claudia Adriana de Sousa Melo²;

Ivelise Regina Canito Brasil¹; Leandra Náira Zambelli Ramalho³; Sérgio Zucoloto⁴;

Vanderlei Salvador Bagnato⁵; Orlando de Castro e Silva Júnior⁶.

Departamento de Cirurgia e Anatomia, Departamento de Patologia, Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo;

Instituto de Física de São Carlos,Universidade de São Paulo.

Resumo: O presente estudo relata os efeitos da aplicação de LASER sobre fígados cirróticos de ratos Wistar. A cirrose hepática foi induzida através da ligadura do ducto biliar. Aproximadamente vinte e cinco dias após a cirurgia inicial, os animais foram submetidos à irradiação LASER com exposição hepática direta. O experimento compôs-se da análise morfométrica dos constituintes do fígado após 24 horas da irradiação. Os resultados revelaram maior proliferação vascular nos animais irradiados sem alteração dos demais componentes.

Unitermos: Cirrose hepática. LASER.

Introdução: A cirrose hepática constitui o estágio final, irreversível e comum a elevado número de hepatopatias crônicas de distintas etiologias. Apesar da diversidade quanto à origem e respeitando certas particularidades de cada hepatopatia, a atitude geral de seguimento e tratamento é similar para todos os casos. A cirrose hepática define-se histologicamente pela existência de nódulos de regeneração circundados por pontes de tecido fibroso e abundante proliferação ductal, demonstrados por microscopia.

A despeito dos recentes avanços em cirurgia hepática, a ressecção sobre fígados cirróticos ainda é bastante temida devido às suas complicações que levam a altas taxas de morbidade e mortalidade (4). Isto ocorre pelo fato do fígado cirrótico possuir uma reserva funcional inferior ao normal, não suportando grandes ressecções, o que pode levar até a uma insuficiência hepática aguda.

O raio LASER é um sistema que amplifica a intensidade de luz, produzindo um feixe forte altamente direcionado com o comprimento de onda específico. A luz LASER conduz a alterações conformacionais na estrutura dos citocromos dos hepatócitos de modo que haveria um incremento na produção de ATP, expressando um aumento no metabolismo energético de fígado de ratos normais hepatectomizados (2).

Sabe-se que, para a mesma intensidade de LASER, para diferentes tipos de tecidos há variação da penetração e distribuição da luz. Isto varia também em um mesmo órgão quando acometido de afecções que modifiquem sua morfologia. Em recente estudo, verificou-se que o fígado cirrótico apresenta uma profundidade de penetração inferior ao normal (3). No entanto, sobre o fígado cirrótico as pesquisas são incipientes, sendo este o objetivo deste estudo.

Método: Cirrose hepática foi induzida através da ligadura do ducto biliar de ratos Wistar adultos (1); um grupo de animais normais serviu como controle experimental (n= 7). Aproximadamente vinte e cinco dias após a cirurgia inicial, todos os animais foram reoperados, sendo sete animais submetidos à aplicação de LASER. Após 24 horas deste procedimento, foram colhidos os fígados para avaliação histopatológica. O LASER utilizado foi o de gás Argônio, comprimento de onda de 630 nm, luz vermelha, 50 mW/cm² durante 5 minutos. As frações de volume da fibrose, hepatócitos, ductos biliares e vasos foram avaliados através da morfometria sobre os cortes corados com o Tricrômico de Masson. Utilizou-se a ocular integradora com 100 pontos (Integrating eyepiece II, Zeiss, Oberkochen, FRG) com aumento de 10x e objetiva de 40x. O primeiro campo foi selecionado aleatoriamente no corte histológico e, por movimentos unidirecionais, novos campos foram selecionados em seqüência. O número de campos analisados para cada biopsia hepática foi calculado em função da média acumulada da fração de volume de cada componente. Nos animais com obstrução biliar e nos submetidos à operação simulada, a análise de 30 campos perfazendo 3000 pontos foi estatisticamente adequada. As frações de volume das estruturas histológicas em um determinado campo foram dadas pelo número de pontos da tela sobre os respectivos elementos histológicos. Cada ponto determina a fração de volume ocupada pelo componente do corte histológico (6).

Resultado: Em relação ao grupo controle, os grupos cirróticos apresentaram todos os componentes alterados com significância estatística (p<0,05). Entre os animais cirróticos, o grupo no qual foi aplicado LASER apresentou-se com maior número de vasos sangüíneos, sem alteração estatisticamente significante dos demais componentes (Fig 1). No grupo controle normal os respectivos valores medianos da fração volumétrica de hepatócitos, ductos bilires, fibrose e vasos foram 95; 3; 1;1; no grupo cirrótico foram 44; 31; 19; 5; no grupo cirrótico irradiado foram 42; 30; 18; 11.

Discussão: O LASER vem sendo utilizado em vários setores da medicina, aplicado com sucesso em várias modalidades terapêuticas. No entanto, a interação de LASER com tecidos biológicos vem sendo pesquisada exaustivamente e ainda não totalmente elucidada.

Neste estudo, observou-se que a luz LASER de 630nm interagindo com fígados cirróticos intactos levou a um aumento do número de vasos sangüíneos quando comparado ao não irradiado. Quanto aos outros componentes (fibrose, hepatócitos e ductos biliares), não foi constatado efeito bioestimulatório ou mesmo inibitório sobre eles. No caso da fibrose, não houve diminuição de seus valores após LASER, o que poderia ser explicado pelo tempo de avaliação após irradiação, que foi apenas de 24h, insuficiente para uma possível recuperação da arquitetura hepática, outrossim o inverso seja comportamento esperado, pois não se constatou aumento de fibrose com LASER.

O estímulo à angiogênese, positivo neste experimento, corrobora achados clínicos, em que o uso de LASER acelera os processos de cicatrização de feridas. Isto ratifica também pesquisas pregressas (5), em que o efeito proliferativo foi constatado em vasos linfáticos, fibroblastos, fibras musculares e tecido cartilaginoso.

Com relação ao funcionamento e mecanismos de ação do LASER, embora a literatura acerca deste tema ainda seja incipiente, várias teorias apontam os possíveis mecanismos das reações fotomediadas nas células, sendo a principal a ativação mitocondrial, no entanto mais estudos são necessários para melhor compreensão destes processos.

Conclusão: O presente estudo mostra que, após a aplicação de LASER em fígados de ratos cirróticos, houve proliferação vascular significativa nos animais irradiados sem, no entanto, alterar a fibrose, o número de hepatócitos e ductos biliares. Ressalta-se que os achados referem-se a uma intensidade, comprimento de onda, tempo de exposição e tempo de análise específicos, podendo haver resultados diferentes quando modificados esses fatores.

• 1. Castro e Silva, Jr. O, Mazzetto, AS, Santos, JS, Ceneviva R, Zucoloto S, Experimental induction of secondary biliary cirrhosis in rats. A new surgical procedure. Res. Surg 1995;7:42-44.
• 2. Castro e Silva, Jr. O, Prozillo LC, Potenciano O, Muccillo G, Zucoloto S. The effect of low-energy He-Ne LASER irradiation on liver regeneration. Res. Surg. 1991;3(3):192-194.
• 3. Melo CAS, Lima AALA, Brasil IRC, Castro e Silva, Jr O, Magalhăes DV, Marcassa LG, Bagnato VS. Light penetration in rats tissues. Journal of  Clinical Laser Medicine & Surgery.
• 4. Noguchi T, Imai T, Mizumoto R. Preoperative estimation of surgical risk of hepatectomy in cirrhotic patients. Hepato-gastroenterology 1990;37:165-171.
• 5. Simunovic Z. Lasers in Medicine and Dentistry :Basic science and up-to-date clinical application of Low Energy-Level Laser Therapy 1.ed. Croatia, A.K.D., 2000.
• 6. Zimmermann H, Reichen J, Zimmermann A, Sagesser H, Thenisch B, Hoflin F. Reversibility of secondary biliary fibrosis by biliodigestive anastomosis in the rat. Gastroenterology 1992;103:579-589.

1

Pós-graduanda do Departamento de Cirurgia e Anatomia da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, USP.

² Pós-graduanda do Departamento de Física do Instituto de Física de São Carlos, USP.

³ Pós-graduanda do Departamento de Patologia da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, USP.

⁴ Professor Titular do Departamento de Patologia da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, USP.

⁵ Professor Titular do Departamento de Física do Instituto de Física de São Carlos, USP.

⁶ Professor Associado do Departamento de Cirurgia e Anatomia da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, USP.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  26 Mar 2001
• Data do Fascículo
  2000