RESUMO
A presença de hemoglobina em amostras de fluidos corporais é considerada um fator inibitório importante da reação em cadeia da polimerase (PCR). O objetivo deste estudo era examinar a influencia de hemácias no líquido cefalorraquidiano (LCR) como um fator inibitório da RT-PCR para enterovirus (EV). Quatrocentos e quarenta amostras de LCR de pacientes com características de meningite viral foram avaliados para enterovirus por RT-PCR. RNA viral foi extraído com tampão de isotiocianato de guanidina e a detecção viral foi feita com nested PCR in-house. A positividade do EV RT-PCR no LCR foi maior nas amostras de LCR sem hemácias do que as amostras com hemácias: 13 (26%) e 36 (9,2%), respectivamente (p = 0,001). No grupo com resultados EV RT-PCR positivo, a media ± DP do número de hemácias no LCR foi 37 ± 183 cell/mm3 e no grupo com resultados negativos foi 580 ± 2.890 cell/mm3 (p = 0,007). O limite superior aceitável de hemácias no LCR para não inibir o resultado do PCR foi 108 cells/mm3. As amostras de LCR com resultados negativos para RT-PCR EV tem mais eritrócitos em comparação com amostras com resultados positivos.
enterovirus; líquido cefalorraquidiano; reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa; hemoglobinas; eritrócitos; meningite
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Receiver operating characteristic (ROC) curve of the studied groups. The acceptable upper limit for RBCs in CSF that could not influence enterovirus PCR was 108 cell/mm3 AUC= 0.61. The area under the curve (AUC) serves as a single measure, independent of prevalence, which summarizes the discriminative ability of a test across the full range of cut-offs. The greater the AUC, the better the test. A perfect test will have an AUC of 1.0, while a completely useless test (one whose curve falls on the diagonal line) has an AUC of 0.5. Youden’s index (J), is the difference between the true positive rate and the false positive rate. Maximizing this index reveals, from the ROC curve, an optimal cut-off point independently from the prevalence. According to its definition, J is the vertical distance between the ROC curve and the first bisector (or chance line).