Modificação do método de Bielschowsky-Gros para cortes em parafina

Fernandez, José

doi:10.1590/S0004-282X1958000100004

Resumos

É proposta uma modificação para o método de Bielschowsky-Gros a ser aplicado em cortes em parafina, utilizável no estudo de terminações nervosas centrais e periféricas. O método é de manipulação fácil e executável em poucas horas, ao contrário da grande maioria de métodos de impregnação em cortes de parafina. A impregnação é precedida de preparador e de mordente e seguida por viragem em ouro. O preparador utilizado é a solução de formol a 2% neutralizada com carbonato de magnésio, adicionada ou não a sonifeno a 1% O emprêgo do sonifeno tem a vantagem de permtir impregnar mais vigorosamente as fibras e terminações nervosas e evitar ao máximo a impregnação das fibras conjuntivas, oferecendo perfeita limpeza da preparação. O mordente é constituído por uma solução recente de nitrato de prata a 10% na qual os cortes permanecem por tempo variável, sendo aconselhável, para a coloração do plexo simpático fundamental, permanência prolongada (cêrca de uma hora). A impregnação é feita em solução de óxido de prata amoniacal preparada como o recomenda Bielchowsky (solução de nitrato de prata a 10% acrescida de amoníaco até completa dissolução do precipitado formado), podendo ser substituída, com idênticos resultados, pelas soluções propostas por Rio-Hortega, Foot, Arteta e Jabonero. A viragem em ouro é feita utilizando a solução aconselhada por Castro (uma gota de ácido acético para cada 10ml de solução de cloreto de ouro amarelo a 1/600). Os resultados obtidos com o método proposto são satisfatórios. Conseguiu-se impregnar com perfeição neurônios do gânglio de Gasser; nas preparações com sonifeno, as fibras nervosas e os prolongamentos celulares apareciam perfeitamente impregnados e a preparação oferecia limpeza absoluta. No apêndice cecal as terminações nervosas resultavam perfeitamente impregnadas, contrastando, principalmente quando foi empregado o sonifeno, com os elementos musculares e conjuntivos. O plexo simpático fundamental, o retículo terminal de Stöhr, as finas terminações simpáticas mostravam relações estreitas com as células intersticiais, observando-se, também, boas figuras de sinapse. Com o método proposto é possível, em 4 ou 5 horas, impregnar cerca de 30 a 40 cortes, o que pode ser considerado excelente rendimento.

A modification is proposed for the Bielschowsky-Gross' method to be used in paraffin cuts for the neurofibrils and the peripheral nerve endings. The method is easy to perform and can be accomplished in a few hours, what cannot be said of most of impregnation methods for paraffin cuts. The fixation is performed with a 2% formalin solution neutralized with magnesium carbonate, either or not combined with 1% Somniphene solution; the use of Somniphene affords a more vigorous impregnation of the fibers and avoids, up to the maximum, the impregnation of conjunctive fibers. The mordansage is made up with a recent 10% silver nitrate solution, a prolonged fixation (about one hour) being advisable for the coloration of the fundamental sympathetic plexus. The impregnation is made up with ammoniacal silver oxide solution prepared after Bielschowsky's recommendations (addition of ammonia to a 10% silver nitrate solution until complete dissolution of precipitate), which can be substituted by the solutions proposed by Rio-Hortega. Arteta and Jabonero. Toning (gold turn-over) is performed with the solution recommended by Castro (one drop of acetic acid for every 10 ml of 1/600 yellow gold chloride solution). The results were satisfactory, a perfect impregnation of neurons of the Gasser ganglion being achieved; in preparations with Somniphene the nervous fibers and the cell processes appeared perfectly impregnated and the preparations showed an absolute cleanliness. In the coecal appendix the nerve endings were also perfectly impregnated, contrasting with muscular and conjunctive elements, specially when Somniphene was employed. The fundamental sympathetic plexus, Stohr's terminal reticulum and the thin sympathetic endings showed close relations to the interstitial cells, with good synaptic pictures. With this proposed method it is possible to impregnate, in 4 to 5 hours, about 30-40 cuts and this can be considered an excellent work profit.

NOVAS TÉCNICAS E APARELHAGENS

Modificação do método de Bielschowsky-Gros para cortes em parafina

Bielchowsky-Gross' method modification for paraffin cuts

José Fernandez

Professor de Histologia e de Citologia da Facuidade Católica de Filosofia; Assistente da Faculdade de Medicina da Universidade da Bahia e da Escola Baiana de Medicina e Saúde Pública; Anatomopatologista da Fundação Hospitalar "Octávio Mangabeira"

RESUMO E CONCLUSÕES

É proposta uma modificação para o método de Bielschowsky-Gros a ser aplicado em cortes em parafina, utilizável no estudo de terminações nervosas centrais e periféricas. O método é de manipulação fácil e executável em poucas horas, ao contrário da grande maioria de métodos de impregnação em cortes de parafina. A impregnação é precedida de preparador e de mordente e seguida por viragem em ouro. O preparador utilizado é a solução de formol a 2% neutralizada com carbonato de magnésio, adicionada ou não a sonifeno a 1% O emprêgo do sonifeno tem a vantagem de permtir impregnar mais vigorosamente as fibras e terminações nervosas e evitar ao máximo a impregnação das fibras conjuntivas, oferecendo perfeita limpeza da preparação. O mordente é constituído por uma solução recente de nitrato de prata a 10% na qual os cortes permanecem por tempo variável, sendo aconselhável, para a coloração do plexo simpático fundamental, permanência prolongada (cêrca de uma hora). A impregnação é feita em solução de óxido de prata amoniacal preparada como o recomenda Bielchowsky (solução de nitrato de prata a 10% acrescida de amoníaco até completa dissolução do precipitado formado), podendo ser substituída, com idênticos resultados, pelas soluções propostas por Rio-Hortega, Foot, Arteta e Jabonero. A viragem em ouro é feita utilizando a solução aconselhada por Castro (uma gota de ácido acético para cada 10ml de solução de cloreto de ouro amarelo a 1/600).

Os resultados obtidos com o método proposto são satisfatórios. Conseguiu-se impregnar com perfeição neurônios do gânglio de Gasser; nas preparações com sonifeno, as fibras nervosas e os prolongamentos celulares apareciam perfeitamente impregnados e a preparação oferecia limpeza absoluta. No apêndice cecal as terminações nervosas resultavam perfeitamente impregnadas, contrastando, principalmente quando foi empregado o sonifeno, com os elementos musculares e conjuntivos. O plexo simpático fundamental, o retículo terminal de Stöhr, as finas terminações simpáticas mostravam relações estreitas com as células intersticiais, observando-se, também, boas figuras de sinapse. Com o método proposto é possível, em 4 ou 5 horas, impregnar cerca de 30 a 40 cortes, o que pode ser considerado excelente rendimento.

SUMMARY AND CONCLUSIONS

A modification is proposed for the Bielschowsky-Gross' method to be used in paraffin cuts for the neurofibrils and the peripheral nerve endings. The method is easy to perform and can be accomplished in a few hours, what cannot be said of most of impregnation methods for paraffin cuts.

The fixation is performed with a 2% formalin solution neutralized with magnesium carbonate, either or not combined with 1% Somniphene solution; the use of Somniphene affords a more vigorous impregnation of the fibers and avoids, up to the maximum, the impregnation of conjunctive fibers. The mordansage is made up with a recent 10% silver nitrate solution, a prolonged fixation (about one hour) being advisable for the coloration of the fundamental sympathetic plexus. The impregnation is made up with ammoniacal silver oxide solution prepared after Bielschowsky's recommendations (addition of ammonia to a 10% silver nitrate solution until complete dissolution of precipitate), which can be substituted by the solutions proposed by Rio-Hortega. Arteta and Jabonero. Toning (gold turn-over) is performed with the solution recommended by Castro (one drop of acetic acid for every 10 ml of 1/600 yellow gold chloride solution).

The results were satisfactory, a perfect impregnation of neurons of the Gasser ganglion being achieved; in preparations with Somniphene the nervous fibers and the cell processes appeared perfectly impregnated and the preparations showed an absolute cleanliness. In the coecal appendix the nerve endings were also perfectly impregnated, contrasting with muscular and conjunctive elements, specially when Somniphene was employed. The fundamental sympathetic plexus, Stohr's terminal reticulum and the thin sympathetic endings showed close relations to the interstitial cells, with good synaptic pictures.

With this proposed method it is possible to impregnate, in 4 to 5 hours, about 30-40 cuts and this can be considered an excellent work profit.

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BIBLIOGRAFIA

Fundação Hospitalar "Octávio Mangabeira" - Departamento de Anatomia Patológica - Salvador, Bahia, Brasil

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Datas de Publicação

Publicação nesta coleção
18 Fev 2014
Data do Fascículo
Mar 1958

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