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Separation of levan-formation and sucrose-hydrolysis catalyzed by levansucrase of Zymomonas mobilis using in vitro mutagenesis

Um levansucrase (SacB) do Zymomonas mobilis capaz de hidrolisar a sucrose mas não de produzir levan foi isolado completamente in vitro, do gene clonado de sacB. Quando o gene do mutante sacB foi expressado em cadeias de Escherichia coli, somente 50% da atividade sucrose-hydrolysing (2,0 U/mg) foi produzida, comparado ao levansucrase tipo selvagem 4,0 U/mg). Sequência do sacB (gene mutante) revelou mudanças de dois resíduos do amino-ácido (Phe-102 ao Leu e Trp-261 ao Lys no levansucrase). A ausência de mutação no local do Cys de SacB é contraditória à inibição do cinética que demonstrou a participação da Cys em conferir a atividade de formação do levan ao SacB. A presenta descoberta é útil ao entendimento do mecanismo da modulação seletiva da formação do levan (polymerase) atividade do levansucrase.


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