Characteristics of Human Natal Stem Cells Cultured in Allogeneic Medium

Resumo

Recentemente, células-tronco da polpa dental humana (hNDP-SCs) foram caracterizadas in vitro e foi demonstrado que elas satisfazem critérios que definem células mesenquimais do estroma humana (MSCs), tal como proposto pela Sociedade Internacional para Terapia Celular. No entanto, esses resultados foram alcançados na presença de meio de expansão xenogênico, que tem o potencial de alterar a capacidade funcional das células. Para determinar a validade das características das hNDP-SCs anteriormente relatadas para a terapia celular humana, cultivamos hNDP-SCs em meio de expansão alogênico. Duas linhagens hNDP-SC foram isoladas de dentes natais vitais, doadas por uma recém-nascida saudável, e cultivadas em plasma rico em plaquetas a 2% (PRP). Análises das expressões fenotípicas, taxas de proliferação, viabilidade, comprimento de telomerase e potenciais de diferenciação adipogênica, osteogênica e condrogênica in vitro das duas linhagens hNDP-SC (Zn001 e Zn002) foram realizadas. Ambas as linhagens apresentaram morfologia, taxas de proliferação, potencial de diferenciação adipogênico, condrogênico e osteogênico semelhantes. O encurtamento dos telômeros em 41,0% e 13,49% ocorreu da 3ª até a 14ª passagem para as linhagens Zn001 e Zn002, respectivamente. A viabilidade de ambas as linhagens foi superior a 90%. A citometria de fluxo demonstrou que ambas as linhagens foram positivas para a maioria dos marcadores testados, incluindo marcadores, que foram negativamente expressados quando hNDP-SCs foram previamente cultivadas em meio xenogênico. Usando análise imunocitoquímica, as células mostraram expressar a beta III-tubulina, nestina, neurofilamentos e Nanog. O PRP usado como meio alogênico mostrou-se adequado para o cultivo de hNDP-SCs.