Este estudo avaliou o aumento da área do canal e a espessura de dentina na parede mesial e distal dos canais mesiais de molares inferiores após o uso de Gates Glidden (GG), La Axxess (LA), Orifice Shaper (OS). Um total de 53 canais mesiais de 27 molares inferiores foram incluídos em resina e divididos em 3 grupos. As raízes foram seccionados 3 mm abaixo da junção cemento-esmalte e as imagens foram capturadas antes e depois da instrumentação. O aumento da área do canal em percentagem e a espessura da dentina remanescente nas paredes mesial e furca foram calculados utilizando o software Image Tools. Os dados foram analisados utilizando o Kruskal-Wallis e teste de Dunn. O Nível de significância foi de 5%. Todos os instrumentos promoveram o aumento da área cervical, com diferentes quantidades de remoção da dentina nas paredes mesial e distal do canal radicular. Diferença estatística (p<0,05) foi encontrada entre LA e todos os outros instrumentos após o uso do primeiro instrumento. Quanto à espessura da dentina, não houve diferença significativa (p>0,05) entre as paredes mesial e distal de todos os instrumentos analisados. O LA 35.06 e GG 3 mostraram a menor espessura da parede e sua utilização em canais mesiais de molares inferiores deve ser feito com cuidado.
