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Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences, Volume: 45, Número: 4, Publicado: 2009
  • One year of BJPS! Editorial

    Ferreira, Elizabeth Igne
  • Coenzyme Q10 and its effects in the treatment of neurodegenerative diseases Reviews

    Santos, Graciela Cristina dos; Antunes, Lusânia Maria Greggi; Santos, Antonio Cardozo dos; Bianchi, Maria de Lourdes Pires

    Resumo em Português:

    De acordo com estudos clínicos e pré-clínicos, o estresse oxidativo e suas conseqüências podem ser a causa, ou, no mínimo, o fator que contribui para grande número de doenças degenerativas. Estas doenças incluem problemas comuns e debilitantes, caracterizados por perda progressiva e irreversível de neurônios em regiões específicas do cérebro. As doenças degenerativas mais comuns são doença de Parkinson, de Hutington, de Alzheimer e esclerose amiotrófica lateral. A Coenzima Q10 (CoQ10) tem sido intensamente estudada desde sua descoberta, em 1957. É um componente da cadeia de transporte eletrônico e participa da respiração aeróbica celular, gerando energia na forma de trifosfato de adenosina (ATP). A propriedade da CoQ10 de atuar como antioxidante ou pró-oxidante sugere papel importante na modulação do estado redox celular sob condições fisiológicas e patológicas, desempenhando, também, papel no processo de envelhecimento. Em vários modelos animais de doenças neurodegenerativas, a CoQ10 mostrou efeitos benéficos na redução do curso da doença. Entretanto, há necessidade de estudos adicionais para avaliar o efeito e a eficácia da CoQ10 antes de expor os pacientes a riscos de saúde desnecessários e de alto custo.

    Resumo em Inglês:

    According to clinical and pre-clinical studies, oxidative stress and its consequences may be the cause or, at least, a contributing factor, to a large number of neurodegenerative diseases. These diseases include common and debilitating disorders, characterized by progressive and irreversible loss of neurons in specific regions of the brain. The most common neurodegenerative diseases are Parkinson's disease, Huntington's disease, Alzheimer's disease and amyotrophic lateral sclerosis. Coenzyme Q10 (CoQ10) has been extensively studied since its discovery in 1957. It is a component of the electron transportation chain and participates in aerobic cellular respiration, generating energy in the form of adenosine triphosphate (ATP). The property of CoQ10 to act as an antioxidant or a pro-oxidant, suggests that it also plays an important role in the modulation of redox cellular status under physiological and pathological conditions, also performing a role in the ageing process. In several animal models of neurodegenerative diseases, CoQ10 has shown beneficial effects in reducing disease progression. However, further studies are needed to assess the outcome and effectiveness of CoQ10 before exposing patients to unnecessary health risks at significant costs.
  • Guidance for nuclear medicine staff on radiopharmaceuticals drug interaction Reviews

    Santos-Oliveira, Ralph

    Resumo em Português:

    Diversos casos de interações medicamentosas com radiofármacos ocorrem diariamente na rotina hospitalar, contudo muitos deles não são notificados ou mesmo percebidos. Informações a respeito desse tipo de reação não é abundante e os profissionais da medicina nuclear muitas vezes estão assoberbados por essas informações. De modo a entender esse tipo de reação e auxiliar a medicina nuclear a lidar com essa situação uma revisão da literatura foi realizada. Os resultados mostraram que a totalidade dos radiofármacos comercializados no mundo apresentam interação medicamentosa com uma enorme variedade de outros medicamentos. Dessa forma sugere-se que revisões sobre radiofármacos inclua um capítulo sobre efeitos adversos. Além disso, um esforço mundial para notificar efeitos adversos deve ser realizado, pois somente dessa forma se terá um quadro real da situação referente interações medicamentosas com radiofármacos.

    Resumo em Inglês:

    Numerous drug interactions related to radiopharmaceuticals take place every day in hospitals many of which are not reported or detected. Information concerning this kind of reaction is not abundant, and nuclear medicine staff are usually overwhelmed by this information. To better understand this type of reaction, and to help nuclear medicine staff deal with it, a review of the literature was conducted. The results show that almost all of radiopharmaceuticals marketed around the world present drug interactions with a large variety of compounds. This suggests that a logical framework to make decisions based on reviews incorporating adverse reactions must be created. The review also showed that researchers undertaking a review of literature, or even a systematic review that incorporates drug interactions, must understand the rationale for the suggested methods and be able to implement them in their review. Additionally, a global effort should be made to report as many cases of drug interaction with radiopharmaceuticals as possible. With this, a complete picture of drug interactions with radiopharmaceuticals can be drawn.
  • Responsible self-medication: review of the process of pharmaceutical attendance Reviews

    Galato, Dayani; Galafassi, Luciana de Mattos; Alano, Graziela Modolon; Trauthman, Silvana Cristina

    Resumo em Português:

    A reflexão apresentada neste artigo representa um estudo de abordagem qualitativa baseada na pesquisa-ação da prática do atendimento farmacêutico no manejo de transtornos menores, realizada pelo grupo de professores do Estágio em Farmácia Comunitária e por farmacêuticos pós-graduados em Farmácia Clínica, com o objetivo de realizar uma proposta de atendimento padrão para este tipo de procedimento. A interação com o indivíduo é iniciada pelo acolhimento, momento no qual o farmacêutico deve ser receptivo e empático. A seguir, se executa a coleta de dados sobre a história do paciente, para obtenção de informações relevantes. Com base nas informações, o farmacêutico deve desenvolver um raciocínio clínico e tomar uma decisão, levando em consideração o contexto do paciente. Após esta análise é realizada a intervenção mais adequada ou o conjunto dessas que podem ser: procurar outro profissional de saúde, utilizar uma terapia não-farmacológica ou auxiliar na escolha de um medicamento de venda livre. O próximo passo é o acompanhamento do paciente com vistas a identificar a efetividade e segurança do tratamento. A padronização do processo de atendimento farmacêutico no manejo de transtornos menores, contribui para o uso racional de medicamentos.

    Resumo em Inglês:

    This article presents a review, based on a qualitative study, of pharmaceutical orientation in the management of minor illness. Action research methodology was used by a group of faculty members responsible for the community pharmacy internship and by postgraduates in clinical pharmacy, to carry out the study with the objective to present a standard service for this kind of procedure. The interaction with the individual starts with a welcoming reception, at which point the pharmacist should be receptive and show empathy. Subsequently, data from the history of the patient are collected to obtain relevant information. Based on this information, the pharmacist must develop a line of clinical reasoning and make a decision, taking the context of the patient into account. After this analysis, the most appropriate intervention is performed. This intervention could indicate the need for referral to another health professional, the use of a non-pharmacological therapy or the provision of sound advice on medicines available without prescription. The next step is monitoring the patient in order to identify the effectiveness and safety of treatment. The standardization process of pharmaceutical attendance in the management of minor disorders contributes to the rational use of medicines.
  • Estimating the turnover number in enzyme kinetic reactions using transient and stationary state data Original Papers

    Uludag-Demirer, Sibel; Duran, Jorge; Tanner, Robert D.

    Resumo em Português:

    Dados de concentração de substrato e de produto obtidos por simulação de equações de velocidade de reação enzima-substrato foram usados neste estudo para testar duas técnicas para estimar constantes cinéticas. Na primeira técnica, a constante, k3, foi calculada utilizando os dados de domínio do tempo inicial de transição, que são difíceis de serem obtidos experimentalmente. A técnica usou uma aproximação iterativa para calcular k3 cujo valor pôde ser estimado com erro de 33%. A segunda técnica calculou k3 usando dados de domínio no estado estacionário e o valor de k3 pôde ser estimado com erro de 5%. Esta segunda técnica também ofereceu uma consistência interna no cálculo de k3, por calculá-lo tanto pela intersecção quanto pela inclinação da reta derivada deste estudo. Uma série de análises de sensibilidade foi realizada para avaliar a robustez da segunda técnica na estimativa de k3 utilizando dados que foram simulados quanto às mudanças nas constantes de taxa de reação (k1, k2 e k3) e na concentração inicial de enzima. Foi encontrado que a segunda técnica, em geral, proporcionou boa estimativa de k3, exceto para os dados simulados para as conversões rápidas de substrato, como no caso de valores elevados de k3 e de [E]o. Este último método, portanto, mostra ser promissor quando se usam dados experimentais tardios da concentração de substrato/produto para obter k3. O uso dados de tempo tardio evita a necessidade do uso de técnicas difíceis e caras na medida de tempo iniciais para estimativa de k3. Uma vez que é obtida uma estimativa razoável de k3, o valor inicial da enzima pode ser facilmente determinado a partir da constante de velocidade máxima estabelecida por ajuste das equações de Michaelis-Menten ou de Briggs-Haldane e partir de dados de substrato e de produtos no estado estacionário (tempo tardio). Enquanto a primeira técnica pode estimar k3 com somente um ponto no regime transiente, sugere-se que o segundo método seja melhor uma vez que ele requer apenas dados do estado estacionário tardio e parece ser mais preciso.

    Resumo em Inglês:

    Substrate and product concentration data obtained by simulating enzyme-substrate reaction rate equations were used to test two proposed kinetic rate constant estimation techniques in this study. In the first technique, the turnover number, k3, was calculated using early transient time domain data, which are difficult to obtain experimentally. The technique used an iterative approach to calculate k3 with a pair of data and the value of k3 could be retrieved with 35% error. The second technique calculated k3 using stationary domain data and the value of k3 could be retrieved with less than 5% error. This second technique also offered internal consistency in the calculation of k3 by calculating k3 both from the intercept and the slope of the linear plot derived in this study. A series of sensitivity analyses was conducted to understand the robustness of the second technique in estimating k3 from simulated data to the changes in the reaction rate constants (k1, k2, and k3) and the initial concentration of enzyme used for simulation. It was found that the second technique generally worked well in the estimation of k3 except for the simulated data for fast substrate conversions such as in the large k3 and [E]0 cases . This latter method, thus, shows promise for the use of late time experimental substrate/product concentration data to obtain k3. Exclusively using late time data avoids the need for difficult and expensive rapid early time measurement techniques for estimating k3. Once a reasonable estimate for k3 is obtained, the initial enzyme value can easily be determined from the maximum velocity constant established from fitting the Michaelis-Menten or Briggs-Haldane equations to substrate and product stationary state domain (late time) data. While the first technique can estimate k3 with only one point in the transient domain, it is suggested that the second method generally be favored since it only requires late-time stationary domain data and appears to be more accurate.
  • Anticonvulsant activity of Bacopa monniera in rodents Original Papers

    Kaushik, Darpan; Tripathi, Ashish; Tripathi, Rashmi; Ganachari, Madiwalayya; Khan, Suroor Ahmad

    Resumo em Português:

    Bacopa monniera, da família Scrophulariaceae, e comumente denominada Brahmi, é bem conhecida na Índia por sua atividade no Sistema Nervoso Central, mas seu efeito neurofarmacológico não foi, ainda, explorado. No presente estudo, investigaram-se os efeitos antiepilépticos da planta. O extrato etanólico da Bacopa monniera foi testado quanto à atividade anticonvulsivante em ratos albinos, utilizando-se diferentes modelos de convulsão. O extrato etanólico das folhas produziu atividade anticonvulsivante significativa para todos os diferentes modelos estudados. O presente estudo mostra provável mecanismo de ação semelhante ao dos benzodiazepínicos (agonista do GABA). Assim sendo, esses resultados enfatizam a necessidade de diversificar, utilizando-se abordagens terapêuticas alternativas da medicina natural, em que uma planta facilmente disponível pode fornecer soluções para vários desafios terapêuticos, como o observado na ação anticonvulsivante do extrato etanólico de Bacopa monniera.

    Resumo em Inglês:

    Bacopa monnieri (L), belonging to the Scrophulariaceae family and commonly known as Brahmi, is well known in India for its CNS activity but its neuropharmacological effect has not yet been explored. In the present study, the antiepileptic effects of the plant were investigated. The ethanolic extract of Bacopa monniera was tested for anticonvulsant activity in albino rats, using different convulsive models. The ethanolic extract of leaves produced significant anticonvulsant activity for all the different models studied. The present study shows a probable mechanism of action similar to that of benzodiazepines (GABA agonist). Thus, these results emphasize the need to diversify by using alternative therapeutic approaches pertaining to herbal medicine, where a single easily available plant may provide solutions to several therapeutic challenges, as observed in the anticonvulsant action of ethanolic extract of B. monniera.
  • Standardization of method for determining glycosylated hemoglobin (Hb A1c) by cation exchange high performance liquid chromatography Original Papers

    Antunes, Marina Venzon; Wagner, Sandrine Comparsi; Camargo, Joíza Lins; Linden, Rafael

    Resumo em Português:

    A hemoglobina A1c é o parâmetro laboratorial mais importante no monitoramento do controle metabólico de pacientes portadores de diabetes melito. Dentre as metodologias existentes para a quantificação desta fração de hemoglobina, a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) baseada em troca catiônica apresenta a melhor precisão, sendo o método de escolha. O objetivo deste trabalho foi adaptar o método Mono S a um sistema de CLAE convencional permitindo a disponibilidade da determinação altamente seletiva de Hb A1c sem a aquisição de kits e comparar os resultados obtidos com o método imunoturbidimétrico Tinaquant® (Roche®) e com o método de cromatografia líquida Bio-Rad Variant®. O método desenvolvido apresentou precisão intra-ensaio de 1,39-3,65% e inter-ensaio de 2,80-3,02%. Os coeficientes de determinação entre os métodos foram: CLAE Mono S x Tinaquant®: r² = 0,9856 (n=60) e CLAE Mono S x Bio-Rad Variant®: r² = 0,9806 (n=16). Não foram observadas diferenças entre CLAE Mono S e Bio-Rad Variant® através de gráfico de Bland-Altman e regressão de Passing-Bablok. Foi obtida uma equação de conversão entre os valores do método teste e os valores obtidos por métodos rastreáveis ao National Glycohemoglobin Standardization Program (NGSP), permitindo a obtenção de valores comparáveis e intercambiáveis entre as metodologias com o uso de instrumentos convencionais de CLAE e com custo reduzido.

    Resumo em Inglês:

    Hemoblobin A1c is the most important parameter for the monitoring of metabolic control of patients with diabetes mellitus. The purpose of this study was to adapt the Mono S method to a conventional HPLC system, allowing highly selective HbA1c determination without the acquisition of kits or the use of dedicated systems The results obtained were compared to the Tinaquant® immune turbidimetric method and the Bio-Rad Variant® chromatographic method. The developed method presented intra-study precision (C.V. %) of 1.39-3.65 and inter-study precision (C.V. %) of 2.80-3.02%. The determination coefficients among methods were: HPLC Mono S x Tinaquant®: r²: 0.9856 (n=60) and HPLC Mono S x HPLC Bio-Rad Variant®: r²: 0.9806 (n=16). A conversion equation between HPLC Mono S and Bio-Rad Variant® was calculated allowing yielding comparable and interchangeable values. The HPLC Mono-S is a precise, low-cost method which yields similar values to the Bio-Rad Variant® method on conventional HPLC equipment.
  • Enantioselective metabolism of hydroxychloroquine employing rats and mice hepatic microsomes Original Papers

    Cardoso, Carmem Dickow; Bonato, Pierina Sueli

    Resumo em Português:

    A hidroxicloroquina (HCQ) é um importante fármaco quiral usado, principalmente, no tratamento de artrite reumatóide, lupus eritematoso sistêmico e malária e cujas propriedades farmacocinéticas e farmacodinâmicas parecem ser estereosseletivas. Em relação às propriedades farmacocinéticas, alguns estudos prévios indicam que a estereosseletividade pode se expressar nos processos de metabolismo, distribuição e excreção e que o metabolismo estereosseletivo parece ser função da espécie estudada. Sendo assim, o metabolismo in vitro da HCQ foi investigado usando microssomas de fígado de ratos e de camundongos. A fração microssômica de fígados de ratos Wistar e de camundongos Balb-C foi isolada por ultracentrifugação e 500 μL foram incubados por 180 minutos com 10 μL de HCQ racêmica 1000 μg mL-1. Dois métodos analíticos estereoespecíficos, por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e eletroforese capilar (CE), foram usados para separar e quantificar os metabólitos formados. Verificou-se que o principal metabólito formado é o (-)-(R)-desetilidroxicloroquina para ambas as espécies de animais.

    Resumo em Inglês:

    Hydroxychloroquine (HCQ) is an important chiral drug used, mainly, in the treatment of rheumatoid arthritis, systemic lupus erythematosus and malaria, and whose pharmacokinetic and pharmacodynamic properties look to be stereoselective. Respecting the pharmacokinetic properties, some previous studies indicate that the stereoselectivity could express itself in the processes of metabolism, distribution and excretion and that the stereoselective metabolism looks to be a function of the studied species. So, the in vitro metabolism of HCQ was investigated using hepatic microsomes of rats and mice. The microsomal fraction of livers of Wistar rats and Balb-C mice was separated by ultracentrifugation and 500 μL were incubated for 180 minutes with 10 μL of racemic HCQ 1000 μg mL-1. Two stereospecific analytical methods, high performance liquid chromatography (HPLC) and capillary electrophoresis (CE), were used to separate and quantify the formed metabolites. It was verified that the main formed metabolite is the (-)-(R)-desethyl hydroxychloroquine for both animal species.
  • Development of granules from Phyllanthus niruri spray-dried extract Original Papers

    Souza, Tatiane Pereira de; Gómez-Amoza, José Luiz; Pacheco, Ramón Martínez; Petrovick, Pedro Ros

    Resumo em Português:

    O objetivo deste estudo foi desenvolver grânulos de extrato Phyllantus niruri seco por aspersão e por granulação úmida e avaliar técnicas que possibilitem a produção de grânulos com características tecnológicas e rendimentos aperfeiçoados. Os grânulos foram caracterizados por granulometria, parâmetros reológicos, compressão e comportamento higroscópico. Independentemente da técnica de granulação, os grânulos tecnologicamente desenvolvidos apresentaram diâmetro de partículas, densidades aparente e compactada e índices de compressibilidade adequados para a formulação sólida. O comportamento de compressão mostrou deformação plástica e elástica para os grânulos produzidos por técnicas de granulação seca e, predominantemente, deformação plástica para a granulação úmida. Com relação à absorção da umidade, o estudo mostrou que os grânulos absorvem menos umidade do que o extrato seco por aspersão. Entretanto, os grânulos com Eudragit E 100 foram os menos higroscópicos.

    Resumo em Inglês:

    The aim of this study was to develop granules from Phyllanthus niruri spray-dried extract using dry and wet granulation and to assess techniques to enable the production of granules with improved technological characteristics and yields. Granules were characterized by granulometry, reological parameters, compression and hygroscopic behavior. Independent of the granulation technique, technologically developed granules presented particle diameter, bulk and tapped densities and compressibility indexes suitable for a solid dosage form. The compression behavior showed plastic and fragmentary deformation for granules produced by the dry granulation technique and predominantly plastic deformation for wet granulation. Concerning the humidity sorption, the study showed that granules absorb less humidity than the spray-dried extract. However, granules with Eudragit® E 100 were the least hygroscopic.
  • Biological activities of the fermentation extract of the endophytic fungus Alternaria alternata isolated from Coffea arabica L. Original Papers

    Fernandes, Maurette dos Reis Vieira; Silva, Tales Alexandre Costa e; Pfenning, Ludwig Heinrich; Costa-Neto, Cláudio Miguel da; Heinrich, Tassiela Andréa; Alencar, Severino Matias de; Lima, Marisa Aparecida de; Ikegaki, Masaharu

    Resumo em Português:

    Total de 22 fungos endofíticos isolados de café (Coffea arabica L.) foi cultivado in vitro e seus extratos testados. A triagem foi conduzida pelo método de difusão em agar contra bactérias Gram-positiva, Gram-negativa e uma levedura. O isolado mais efetivo foi Alternaria alternata e, subsequentemente, seu extrato foi analisado. O conteúdo de fenólicos totais do extrato bruto foi de 3,44 μg EAG/mg de extrato. Para os testes de atividade antimicrobiana, a concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida e fungicida mínima (CBM e CFM) contra Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Candida albicans foram determinadas. Resultados da CIM variaram entre 50-100 μg/mL para S. aureus e 400-800 μg/mL para E. coli. O extrato bruto não apresentou atividade nas concentrações testadas para C. albicans. Foram analisadas as atividades antioxidantes do extrato bruto. Sua habilidade para seqüestrar radicais DPPH e a atividade antioxidante pela oxidação do sistema β-caroteno/ácido linoléico não foram significativas. Além disso, a atividade antitumoral foi estudada pelo teste do MTT. À diluição de 400 μg/mL, o extrato apresentou atividade de aproximadamente 50% sobre as células HeLa in vitro. Os resultados indicam que fungos endófitos poderiam ser uma fonte promissora de compostos bioativos necessitando de estudos futuros.

    Resumo em Inglês:

    A total of 22 endophytic fungi isolated from coffee (Coffea arabica L.) were cultivated in vitro and their crude extracts tested. The screening was carried out using the agar diffusion method against Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Candida albicans. The most effective isolate was Alternaria alternata, and subsequently, its extract was assayed. The total phenolic content was 3.44 μg GAE/mg of the crude extract. For the antibacterial and antifungal activity assays, minimum inhibitory concentrations (MIC) and minimum bactericidal and fungicidal concentrations (MBC and MFC) were determined. The ranges of MIC values were 50-100 μg/mL for S. aureus and 400-800 μg/mL for E. coli. The extract did not show activity in the tested concentrations for C. albicans. The fungal crude extract was assayed for antioxidant activities. Its ability to scavenge DPPH radicals and antioxidant activity by β-carotene/linoleic acid system oxidation was not significant. In addition, antitumor activity was studied using the MTT assay. At a dilution of 400 μg/mL, the extract displayed a cytotoxic activity of approximately 50% towards HeLa cells in vitro. The results indicate that endophytic fungi could be a promising source of bioactive compounds and warrant further study.
  • Bioavailability of two oral formulas of secnidazole in healthy volunteers Original Papers

    Montovani, Patrícia Andréa Bertuol; Pinto, Ana Maria Pugens; Santos, Mauricio Bedim dos; Vieira, Daiane Loss; Prado, Anelise Weich do; Manfio, Josélia Larger

    Resumo em Português:

    Secnidazol é um agente antimicrobiano utilizado principalmente no tratamento da amebíase. Para este estudo de bioequivalência de secnidazol em voluntários saudáveis, foram incluídos vinte e oito voluntárias mulheres no estudo randomizado cruzado. Cada voluntária recebeu uma única dose oral de secnidazol do produto teste e referência para comparação, com um intervalo de wash-out de duas semanas. As concentrações plasmáticas de secnidazol foram determinados por CLAE, as amostras foram extraídas com terc-butil-metil-éter: dicloromethano (60:40, v/v). O secnidazol e seu padrão interno metronidazol foram separados em uma coluna (C18 ) com fase móvel água ultra-pura:acetonitrila (85:15, v/v) e monitorado em 310 nm. As razões entre as médias geométricas de Cmáx, ASC0-t e ASC0-∞, encontraram-se dentro do estabelecido pela ANVISA, demonstrando que as formulações são bioequivalentes quanto à taxa e extensão de absorção

    Resumo em Inglês:

    Secnidazole is an antimicrobial agent used primarily in the treatment of amoebiasis. For this bioequivalence study of secnidazole, twenty-eight healthy female volunteers were enrolled in a randomized crossover study. Each volunteer was given a single oral dose of secnidazole test preparation and then the reference preparation, or vice versa, with a wash out interval of two weeks. The plasma concentrations of secnidazole were determined by HPLC, and the samples were extracted with tert-butyl-methyl-ether: dicloromethane (60:40, v/v). Secnidazole and its parent compound metronidazole were separated on a C18 column with water:acetonitrile (85:15, v/v) as the mobile phase, and monitored at 310 nm. The ratio of mean Cmax, AUC0-t and AUC0-∞ values for the test and reference products were within the predetermined range established by ANVISA, demonstrating that the two formulations are bioequivalent in rate and extent of absorption.
  • Comparison of microbiological assay and HPLC-UV for determination of fluconazole in capsules Original Papers

    Queiroz, Kelly Marques; Silva, Maria-Luiza Martins; Prado, Nathália Duque; Lima, Paulo Marcelo Andrade; Diniz, Rosiane Dias Lopes; César, Isabela Costa; Pianetti, Gerson Antônio; Santos, Daniel Assis

    Resumo em Português:

    Este trabalho visou ao desenvolvimento e validação de um método microbiológico por difusão em ágar para quantificação de fluconazol em cápsulas utilizando o isolado Candida albicans ATCC 18804 como reagente biológico. O método foi validado e foi verificada linearidade (r²=0,9995), precisão (D.P.R. = 4.0% para precisão intra-dia e 4,5% para precisão inter-dia) e exatidão (recuperação média = 102,9%). Concomitantemente, foi realizado o doseamento de fluconazol nas cápsulas por meio de cromatografia líquida de alta eficiência. Os teores encontrados por ambos os métodos demonstraram alta correlação, confirmada pelo Coeficiente de Correlação de Pearson (r = 0,9884). O ensaio microbiológico desenvolvido pode ser considerado ferramenta valiosa tanto para a pesquisa científica quanto para a rotina da indústria farmacêutica.

    Resumo em Inglês:

    The development of a specific agar diffusion bioassay for the quantitative determination of fluconazole formulated in capsules was carried out using a strain of Candida albicans ATCC 18804 as the test organism. A prospective validation of the method showed adequate linearity (r²=0.9995), precision (R.S.D. = 4.0% for intra-day and 4.5% for inter-day precision) and accuracy (mean recovery = 102.9%). High performance liquid chromatography was chosen as a comparison method for the fluconazole determination. The contents of fluconazole determined by both methods, for four capsule samples, showed a strong correlation, confirmed by Pearson's correlation coefficient value (r = 0.9884). The bioassay is a suitable method for both research and pharmaceutical industry laboratories.
  • Choice of sterilizing/disinfecting agent: determination of the Decimal ReductionTime (D-Value) Original Papers

    Mazzola, Priscila Gava; Jozala, Angela Faustino; Novaes, Letícia Célia de Lencastre; Moriel, Patricia; Penna, Thereza Christina Vessoni

    Resumo em Português:

    Esforços para diminuir o risco de transmissões de infecções incluem programas nos quais os desinfetantes desempenham papel crucial. As superfícies de materiais médico-hospitalares, se não estiverem diretamente ligados à transmissão de doenças, podem contribuir, potencialmente, para uma contaminação cruzada secundária. Cada instrumento ou superfície do estabelecimento do ambiente de saúde que entra em contato com um paciente é um disseminador potencial de infecção. Para estudar e comparar o comportamento dos microrganismos selecionados foram realizados ensaios de determinação do tempo de redução decimal. Os maiores valores D determinados, foram: (i) 0,1% dicloroisocianurato de sódio (NaDCC) (pH 7.0) - E. coli e A. calcoaceticus (D = 5,9 min); (ii) hipoclorito de sódio (pH 7,0) à 0,025% para B. stearothermophilus (D = 24 min), E. coli e E. cloacae (D = 7,5 min); e à 0,05% para B. stearothermophilus (D = 9,4 min) e E. coli (D = 6,1 min). Este estudo estabelece que as suspensões estudadas são indicação da eficácia de desinfecção recomendada pela legislação, mas os resultados podem variar de produto para produto. Para desinfecção de mãos clorexidina pode ser utilizada, pois apresentou valores D baixos. Para desinfecção de nível intermediário de equipamentos e instrumentos recomenda-se a utilização de NaDCC, devido à estabilidade e baixo efeito corrosivo para equipamentos e materiais. Glutaraldeído, apesar de muito aceito para processos esterilizantes, tem eficácia comparável a soluções de formaldeído.

    Resumo em Inglês:

    Efforts to diminish the transmission of infections include programs in which disinfectants play a crucial role. Hospital surfaces and medical devices are potential sources of cross contamination, and each instrument, surface or area in a health care unit can be responsible for spread of infection. The decimal reduction time was used to study and compare the behavior of selected strains of microorganisms. The highest D-values for various bacteria were obtained for the following solutions: (i) 0.1% sodium dichloroisocyanurate (pH 7.0) - E. coli and A. calcoaceticus (D = 5.9 min); (ii) sodium hypochlorite (pH 7.0) at 0.025% for B. stearothermophilus (D = 24 min), E. coli and E. cloacae (D = 7.5 min); at 0.05% for B. stearothermophilus (D = 9.4 min) and E. coli (D = 6.1 min). The suspension studies were an indication of the disinfectant efficacy on a surface. The data in this study reflect the formulations used and may vary from product to product. The expected effectiveness from the studied formulations shows that the tested agents can be recommended for surface disinfection as stated in present guidelines and emphasize the importance and need to develop routine and novel programs to evaluate product utility.
  • Effect of methionine load on homocysteine levels, lipid peroxidation and DNA damage in rats receiving ethanol Original Papers

    Jordao Júnior, Alceu Afonso; Domenici, Fernanda Aparecida; Lataro, Renata Cristina; Portari, Guilherme Vannucchi; Vannucchi, Helio

    Resumo em Português:

    Alterações no metabolismo da metionina podem ocasionar hiper-homocisteinemia, quadro indutivo de aterosclerose, hipertensão e aumento do estresse oxidativo. A geração de radicais livres e dano oxidativo ao DNA são importantes na injúria hepática provocada pelo etanol. Neste estudo avaliaram-se os efeitos da sobrecarga de metionina associada ou não à administração aguda de etanol sobre valores de homocisteína, dano ao DNA, lipoperoxidação e vitamina E. Foram utilizados 30 ratos Wistar distribuídos em 3 Grupos: Grupo Etanol 24 horas (GE24), Grupo Metionina 24 horas (GM24) e Grupo Metionina e Etanol 24 horas (GME24). Realizaram-se determinações hepáticas de SRATB, vitamina E, GSH, homocisteína e Teste do Cometa e determinações plasmáticas de GSH e homocisteína. Valores aumentados de GSH, vitamina E e homocisteína foram observados para o GME24, e de SRATB no GE24. O Teste do Cometa mostrou aumento do dano ao DNA no GE24 e proteção ao DNA no GME24. A administração de etanol diminuiu os níveis de antioxidantes e aumentou o de SRATB, indicando ocorrência de estresse oxidativo, podendo ocasionar dano ao DNA. A presença da metionina associada com o etanol agiu como protetora contra os danos do etanol, mas aumentou os níveis de homocisteína.

    Resumo em Inglês:

    Changes in the metabolism of methionine can cause hyperhomocysteinemia, inducing a triad of atherosclerosis, hypertension, and increased oxidative stress. The generation of free radicals and oxidative damage to DNA is important in the liver damage caused by ethanol. In this study, the effect of methionine overload associated or otherwise with acute administration of ethanol on homocysteine values, damage to DNA, lipoperoxidation and vitamin E was evaluated. Thirty rats were divided into 3 groups: Group Ethanol 24 hours (EG24), Group Methionine 24 hours (MG24), and Group Methionine and Ethanol 24 hours (MEG24). TBARS, vitamin E, GS and, homocysteine values were determined and the Comet assay was carried out. Increased GSH, vitamin E and homocysteine levels were observed for MEG24, and increased TBARS were observed in EG24. The Comet assay showed an increase in DNA damage in EG24 and DNA protection in MEG24. The administration of ethanol decreased antioxidant levels and increased TBARS, indicating the occurrence of oxidative stress with possible DNA damage. The combination of methionine and ethanol had a protective effect against the ethanol-induced damage, but increased the levels of homocysteine.
  • Extracts from Amazonian plants have inhibitory activity against tyrosinase: an in vitro evaluation Original Papers

    Macrini, Daclé Juliani; Suffredini, Ivana Barbosa; Varella, Antonio Drauzio; Younes, Riad Naim; Ohara, Mitsuko Taba

    Resumo em Português:

    Problemas dermatológicos relacionados com a pigmentação resultam em hiperpigmentações ou hipopigmentação cutâneas. Produtos cosméticos e farmacêuticos com atividade despigmentante são utilizados para o tratamento de pacientes que apresentam distúrbios de hiperpigmentação, tais como melasma ou cloasma, hiperpigmentação pós-inflamatória, lentigem senil e efélides. Os despigmentantes atualmente utilizados não são totalmente eficazes ou seguros, razão pela qual há intensa pesquisa, principalmente em países asiáticos, com a finalidade de se obter novos agentes com esta ação, em especial inibidores de enzimas envolvidas na melanogênese, como a tirosinase. Considerando-se que algumas substâncias obtidas de plantas apresentam essa atividade, a flora brasileira constitui-se uma fonte potencial de obtenção de novos despigmentantes. Por essa razão, 25 extratos aquosos e 24 orgânicos obtidos de 19 plantas da Floresta Amazônica e Mata Atlântica, provenientes de 11 diferentes famílias, foram avaliados quanto à atividade de inibição da tirosinase. Do total de 49 extratos testados, 9 mostraram atividade. Os valores de concentração da atividade inibitória 50% (AI 50%), foram calculados e o mais ativo foi o extrato orgânico das folhas e caule de Ruprechtia sp. (AI50 33,76 mg.mL-1) seguido do extrato orgânico dos órgãos aéreos de Rapanea parviflora (AI50 64,19 mg.mL-1).

    Resumo em Inglês:

    Dermatological disorders related to pigmentation result in tenuous hyper or hypopigmentation Cosmetic and pharmaceutical products containing depigmenting substances are used in the treatment of patients who have high pigmentation disorders, such as melasma or chloasma, post-inflammatory hyperpigmentation, senile lentigo and ephelides. Skin lightening agents are not yet totally effective or safe and therefore intensive research for the discovery of new agents is continuous. Enzyme inhibitors involved in melanogenesis, such as tyrosinase, have been discovered in Asian countries, including those isolated from plant extracts. The Brazilian flora has the highest species diversity in the world, and the chemical, pharmacological and cosmetic potential for the discovery of new skin whitening agents is in proportion with this biodiversity. For these reasons, 25 aqueous and 24 organic extracts obtained from 19 plants native to the Amazon rain forest and to the Atlantic forest, belonging to 11 different families, were evaluated as tyrosinase inhibitors. Nine out of 49 extracts showed inhibitory activity in the screening process. The 50% inhibitory activity (IA50) was calculated, revealing that the most active extracts were the organic extracts from the leaves and stem of Ruprechtia sp. (IA50 33.76 mg.mL-1) and the organic extract from the aerial organs of Rapanea parviflora (IA50 64.19 mg.mL-1).
  • Development of a new analytical method for determination of acetylsalicylic and salicylic acids in tablets by reversed phase liquid chromatography Original Papers

    Aguiar, José Luiz Neves de; Leandro, Katia Christina; Abrantes, Shirley de Mello Pereira; Albert, André Luis Mazzei

    Resumo em Português:

    O ácido acetilsalicílico (AAS) é um fármaco utilizado como analgésico, antiinflamatório, antipirético, sendo amplamente comercializado e consumido no Brasil e no mundo. Como precursor de sua síntese utiliza-se o ácido salicílico (AS) que também é produzido através de sua degradação. A metodologia oficial da Farmacopéia Americana (USP) preconiza a determinação destes fármacos por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção por ultravioleta, mas este método não possui boa sensibilidade (S AAS=0,12 mAbs/(μg/mL) e S AS=0,48 mAbs/(μg/mL)) e resolução (Rs =1,61). O objetivo deste trabalho, visando a melhor adequação do sistema cromatográfico em relação à metodologia oficial, foi o desenvolvimento e otimização de um novo método por cromatografia em fase líquida para determinar os teores tanto do ácido acetilsalicílico quanto do salicílico em comprimidos. Os parâmetros da adequação do sistema cromatográfico para o AAS e para o AS foram satisfatórios. A seletividade foi verificada por comparações dos espectros de absorção no ultravioleta (UV) antes, durante e depois do tempo de retenção da substância. A faixa linear de trabalho para o AAS foi de 0,21 a 0,39 mg/mL e a do AS foi de 6,3 a 11,7 μg/mL. Os coeficientes de correlação (r) das curvas analíticas do AAS e do AS foram de 0,9995 e 0,9988, respectivamente e os limites de detecção e quantificação para o AS foram 0,23 e 0,69 μg/mL. A sensibilidade (S AAS=1,88 mAbs/(μg/mL) e S AS=1,84 mAbs/(μg/mL)) e a resolução (Rs=5,06) atestam a melhoria em relação ao método descrito na USP.

    Resumo em Inglês:

    Acetylsalicylic acid (AAS) is a drug utilized as analgesic, anti-inflammatory, and antipyretic medication, available worldwide and commonly used in Brazil. Salicylic acid (AS) is a precursor in AAS synthesis and is also produced during its degradation. The official United States Pharmacopoeia (USP) suggests the determination of these drugs by high performance liquid chromatography (HPLC), with ultraviolet detection, but this method has neither a high sensitivity (S AAS=0.12 mAbs/(μg/mL) and S AS=0.48 mAbs/(μg/mL)) nor resolution (Rs=1.61). The purpose of this study was to develop a new more adequate, accurate method by liquid phase chromatography than the current official methodology, and to use this new method in the determination of the tenors of acetylsalicylic, as of salicylic acids in tablets. The parameters of the chromatographic system for both the AAS and AS were satisfactory. Selectivity was verified by absorption spectra comparison in the ultraviolet (UV) range, during and after substance retention time. The linear range for AAS was 0.21 to 0.39 mg/mL, and that for AS was 6.3 to 11.7 μg/mL. The correlation coefficients (r) of the analytical curves of AAS and AS were 0.9995 and 0.9988, respectively; and the detection and quantification limits for the AS were 0.23 and 0.69 μg/mL. The sensitivity (S AAS=1.88 mAbs/(μg/mL) and S AS=1.84 mAbs/(μg/mL)) and the resolution (Rs =5.06) show the improvement obtained using this method over that described by the USP.
  • The period between beta-blocker use and physical activity changes training heart rate behavior Original Papers

    Alves, Naiane Ferraz Bandeira; Porpino, Suênia Karla Pacheco; Silva, Alexandre Sérgio

    Resumo em Português:

    A Sociedade Brasileira de Cardiologia (SBC) propõe que os hipertensos que utilizam beta-bloqueadores e praticam exercícios físicos devem ter sua frequência cardíaca de treinamento (HR) corrigida devido ao efeito cronotrópico negativo desse fármaco. Contudo, se a atividade física é realizada fora da meia-vida plasmática do fármaco, a correção pode não ser necessária. Este estudo investigou a resposta cronotrópica ao exercício dentro e fora da meia-vida plasmática do beta-bloqueador. Nove indivíduos que usavam atenolol ou propranolol e seis controles, efetuaram três sessões de caminhada em três dias, de acordo com diferentes esquemas: EX2 (duas horas após a administração do fármaco, no pico plasmático); EX11 (11 horas após a administração do fármaco, no fim da meia-vida plasmática) e EX23 (23 horas após a administração do fármaco, fora da meia-vida plasmática). As caminhadas foram realizadas em esteira ergométrica e a HR foi monitorada por monitor de freqüência cardíaca. Durante os exercícios, as HR médias foram de 97,2, 108,4 e 109, para EX2, EX11 e EX23, respectivamente, com valor de EX2 estatisticamente mais baixo do que os outros (p<0,05). Não houve diferenças estatísticas no grupo controle (p>0,05). O estudo conclui que a atenuação da resposta cronotrópica positiva, que ocorre durante o exercício em indivíduos que utilizam beta-bloqueadores, é menos evidente quando o exercício é realizado fora da meia-vida plasmática do fármaco.

    Resumo em Inglês:

    The Brazilian Society of Cardiology (SBC) proposes that hypertensive subjects who use beta-blockers and practice physical exercises must have their training heart rate (HR) corrected due to the negative chronotropic effect of this drug. Nevertheless, if the physical activity is performed outside of plasmatic half-life, correction may not be necessary. This study investigated the exercise chronotropic response both inside and outside the beta-blocker plasmatic half-life. Nine subjects in use of atenolol or propranolol, and six controls, carried out three walking sessions in three days according to different schedules: EX2 (two hours after drug administration, at the plasmatic peak); EX11 (eleven hours after drug administration, at the end of plasmatic half-life); and EX23 (twenty-three hours after drug administration, outside the plasmatic half-life. The walking sessions were performed on an ergometric treadmill and HR was monitored by a heart rate monitor. During the exercises, mean HRs were 97.2, 108.4 and 109 for EX2, EX11 and EX23, respectively, with the value for EX2 statistically lower than the others (p<0.05). There were no statistical differences in the control group (p>0.05). The study concludes that the attenuation of the positive chronotropic response which occurs during exercise in subjects using beta-blockers, is less evident when the exercise is performed outside the plasmatic half-life of the drug.
  • Quantitation of artemether in pharmaceutical raw material and injections by high performance liquid chromatography Original Papers

    César, Isabela da Costa; Pianetti, Gerson Antônio

    Resumo em Português:

    A quantificação de artemeter em matéria-prima farmacêutica e solução injetável foi realizada por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção na região do ultravioleta. Empregou-se coluna Zorbax C18 (150 x 4.6 mm; 5 μm), mantida a 30 °C, e fase móvel composta por acetonitrila e água (70:30), com fluxo de 1 ml/min. A detecção foi realizada a 216 nm, e o volume de injeção foi 20 μl. O método se mostrou linear (r²=0,9999), preciso (DPR < 2,0% para precisão intra-dia e inter-dias) e seletivo em relação a possíveis impurezas e excipientes das amostras. Os limites de detecção e quantificação obtidos foram 8 μg/mL e 25 μg/mL, respectivamente. O teor médio de artemeter obtido na análise da matéria-prima farmacêutica foi 99,26% e na solução injetável, 102,08%. O método otimizado e validado pode ser utilizado com sucesso para análises rotineiras em controle de qualidade.

    Resumo em Inglês:

    The quantitation of artemether in both pharmaceutical raw material and injections was carried out by high performance liquid chromatography (HPLC) with ultraviolet detection. A Zorbax C18 column (150 x 4.6 mm; 5 μm), at 30 °C, and a mobile phase composed of acetonitrile and water (70:30), at a flow rate of 1ml/min, were used. The detection wavelength was 216 nm and the injection volume was 20 μL. The method proved to be linear (r²=0.9999), precise (RSD < 20% for intra-day and inter-day precision), accurate and selective regarding possible impurities and excipients of the samples. The detection and quantitation limits were 8 μg/mL and 25 μg/mL, respectively. The artemether content obtained in the raw material analysis was 99.26% and in the injections, 102.08%. The optimized and validated method may be successfully employed to perform routine quality control analyses.
  • Study of sensory-motor and somatic development of the offspring of rats (Wistar) treated with caffeine Original Papers

    Silva, Elthon Gomes Fernandes da; Alexandre, Alessandro Aires; Nascimento, Gerlane Karla Bezerra Oliveira; Oliveira, Jaciel Benedito de; Neves, Elizabeth da Silveira; Costa Sobrinho, Austregézilo Vieira da; Silveira, Maria de Fátima Galdino da

    Resumo em Português:

    Estudou-se a influência da cafeína, administrada a ratos, no desenvolvimento somático e sensorial-motor da prole. Ratos Wistar fêmeas foram divididos em grupo controle e grupo tratado e receberam água e solução de cafeína a 0,1%, respectivamente. A prole, também dividida em grupo controle e grupo tratado, foi monitorada diariamente até o 20º. dia de vida para se observar as alterações no desenvolvimento somático neural. O grupo tratado apresentou peso reduzido no dia do nascimento e nos 1º, 5º., 15º e 20º. dias de vida; comprimento focinho-ânus mais curto (avaliação efetuada diariamente); comprimento focinho-cauda mais curto no dia do nascimento e nos 1º, 5º., 15º e 20º. dias de vida e sinais de retardamento da maturação somática e sensorial-motora. Esses resultados permitem que se conclua que a administração da cafeína a ratos afeta o desenvolvimento somático e sensorial-motor da prole.

    Resumo em Inglês:

    The influence of caffeine, administered to rats, on the somatic and sensory-motor development of the offspring was investigated. Female Wistar rats were divided into a control group and a treated group and received drinking water and a 0.1% solution of caffeine orally, respectively. The offspring, also divided into a control group and a treated group, received daily monitoring until the 20th day of life to verify alterations in somatic neural development. The offspring of the treated group had reduced weight on the day of birth and on the 1st, 5th, 15th and 20th days of life; shorter snout-anus length (evaluation done daily); shorter snout-tail length on the day of birth and on the 1st, 5th and 10th days of life, and signs of retardation of somatic and sensory-motor maturation. These results allowed the conclusion that administration of caffeine to rats affects somatic and sensory-motor development of offspring.
  • Creatine supplementation: effects on blood creatine kinase activity responses to resistance exercise and creatine kinase activity measurement Original Papers

    Machado, Marco; Pereira, Rafael; Sampaio-Jorge, Felipe; Knifis, Franz; Hackney, Anthony

    Resumo em Português:

    O objetivo do presente estudo foi determinar o efeito da suplementação de creatina e do exercício na integridade das fibras musculares e, também, o efeito da suplementação na técnica de mensuração da atividade da creatina kinase (CK). Quarenta e nove sedentários participaram de um estudo duplo-cego e foram divididos em dois grupos: C (n=26) que receberam 4x5 dias embalagens com 0,6 g.kg-1 de massa corporal com 50% de creatina + 50% de dextrose, e P (n=23) que receberam embalagens contendo apenas dextrose. No primeiro dia, eles realizaram o teste de 1RM para os exercícios supino reto, remada sentada, cadeira extensora, mesa flexora, e leg press. No D7 receberam os suplementos. No décimo quarto dia eles realizaram uma sessão de treinos com os cinco exercícios, cada um com 3x10 repetições a 75% de 1RM. Sangue foi coletado antes (D14) e depois da sessão de exercícios (D15). Diferentes concentrações de creatina no sangue foram testadas para determinar a influência nos métodos de medida da atividade de CK. ANOVA e o teste post-hoc de Tukey foram usados para comparar os grupos e as diferentes coletas (P<0,05). Não foram observadas mudanças significativas na atividade de CK nos grupos em D0, D7 e D14. Em D15 a atividade de CK aumentou 140% (mulheres) e 200% (homens). Não houve diferenças na atividade de CK entre os grupos. Concentrações sanguíneas de creatina até 5 mM não produziram efeitos significativos nos resultados de CK. A atividade de CK aumenta após o exercício, mas a creatina não tem influência na integridade da fibra muscular ou compromete o método de análise da CK.

    Resumo em Inglês:

    The purpose of this study was to determine the effects of creatine supplementation and exercise on the integrity of muscle fiber, as well as the effect of the supplementation on the creatine kinase (CK) assay measurement. Forty-nine sedentary individuals participated in a double-blind study and were divided into two groups: C (n=26) received 4x5-day packages of 0.6 g.kg-1 of body weight contained 50% of creatine + 50% of dextrose, and P (n=23) received packages containing only dextrose. On the first day the groups performed a 1RM test for bench press, seated row, leg extension, leg curl and leg press. On D7 they received the supplements. On the fourteenth day, they performed a training session of five exercises, each in three sets of ten repetitions at 75% of 1RM. Blood was collected before (D14) and after the exercise session (D15). Differing levels of blood creatine were tested to determine the influence on the assay measurements of CK. ANOVA and Tukey's post-hoc tests were used to compare groups and different times of study protocol (P<0.05). No changes were observed in CK activity of the groups from D0, D7 and D14. On D15 CK activity increases 140% (women) and 200% (men). There was no difference in CK activity between groups. Blood creatine levels up to 5mM produced no significant effect on CK assay results. CK activity increased after resistance exercise, while creatine supplementation produced no difference in the muscle cellular integrity nor compromised assay methodology.
  • Corrositex®, BCOP and HET-CAM as alternative methods to animal experimentation Original Papers

    Cazedey, Edith Cristina Laignier; Carvalho, Flávia Chiva; Fiorentino, Flávia Angélica Másquio; Gremião, Maria Palmira Daflon; Salgado, Hérida Regina Nunes

    Resumo em Português:

    Testes em animais são utilizados como modelos em estudos toxicológicos e de pesquisa. Entretanto, tais testes têm sido considerados desumanos, porque causam dor e sofrimento aos animais experimentais, porquanto estes métodos podem, freqüentemente, ser subjetivos. Protestos clamando pela proteção animal têm questionado a eficácia dos testes in vivo e sugerem a introdução de métodos alternativos in vitro. Organizações internacionais, tais como Comitê de Coordenação Interagências de Métodos de Validação Alternativos (ICCVAM), Instituto Nacional de Saúde (NIH), Organização para Cooperação Econômica e Desenvolvimento (OECD), que regulam e desenvolvem novos métodos alternativos aos modelos animais, indicaram a realização de ensaios preliminares e a execução de testes seqüenciais, que consideram as propriedades físico-químicas e os dados dos ensaios in vitro, antes de efetuarem estudos in vivo. Nessa direção, o objetivo do presente artigo foi selecionar métodos alternativos promissores, tais como Corrositex®, BCOP e HET-CAM, com o intuito de aperfeiçoar ou substituir o uso de animais e reduzir seus sofrimento.

    Resumo em Inglês:

    Tests in animals are used as models in toxicological and investigative studies. However, such tests have been considered inhumane because they can cause pain and suffering to experimental animals, while these methods can often be subjective. Protests calling for animal protection have questioned the effectiveness of in vivo tests and suggest the introduction of alternative, in vitro methods. International organizations, such as the Interagency Coordinating Committee on the Validation of Alternative Methods (ICCVAM), the National Institute of Health (NIH), the Organization for Economic Co-operation and Development (OECD), that regulate and develop new alternative animal models, have indicated the running of preliminary assays and execution of sequential tests, which consider physical-chemical properties and data of in vitro assays, before performing in vivo studies. Towards this background, the objective of the present article was to select promising alternative methods such as Corrositex®, BCOP and HET-CAM, intended to refine or replace the use of animals and reduce their suffering.
  • Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS) and evaluation of antioxidant and antimicrobial activities of essential oil of Campomanesia adamantium (Cambess.) O. Berg (Guavira) Original Papers

    Coutinho, Isabel Duarte; Cardoso, Claúdia Andréa Lima; Ré-Poppi, Nilva; Melo, Adriana Mestriner; Vieira, Maria do Carmo; Honda, Neli Kika; Coelho, Roberta Gomes

    Resumo em Português:

    Os óleos essenciais obtidos das folhas de Campomanesia adamantium foram caracterizados através da combinação de CG-EM e índice de retenção, sendo identificado um total de 95 compostos. Na floração as substâncias majoritárias foram monoterpenos (limoneno, α-pineno e β-pineno) e durante o estágio vegetativo as substâncias majoritárias foram sesquiterpenos (biciclogermacreno e globulol). Os óleos essenciais obtidos da floração e frutificação mostraram alta atividade contra Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Candida albicans e moderada contra Escherichia coli em todos os estágios. Foi avaliada a atividade antioxidante dos óleos essenciais usando o método do DPPH. O óleo essencial das 4 cidades mostrou a presença de α-pineno, β-pineno, limoneno, linalol, β-cariofileno, germacreno D e biciclogermacreno, mas a amostra da cidade de Jardim não apresentou limoneno e linalol.

    Resumo em Inglês:

    The essential oils from Campomanesia adamantium (Cambess.) O. Berg leaves, collected in the reproductive (flowering and fruit-bearing) and vegetative stages, were characterized by GC-MS (Gas Chromatography-Mass Spectrometry). A total of 95 compounds of the essential oils were identified. In the reproductive stage (flowering) the major constituents were monoterpenes (limonene, α-pinene and β-pinene) while during the vegetative stage the major constituents were the sesquiterpenes (bicyclogermacrene and globulol). The essential oil of the reproductive stage shows high antimicrobial activity against Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa and Candida albicans, and all show moderate activity against Escherichia coli. The essential oils were also evaluated for their radical-scavenging activity by DPPH. The chemogeographical variations of the oil composition from the four distinct localities studied all contained α-pinene, β-pinene, limonene, linalool, β-caryophyllene, germacrene D and bicyclogermacrene, however the samples from Jardim city contained neither limonene nor linalool.
  • Analysis of pharmaceutical assistance in the Taquari Valley, Rio Grande do Sul: profile of service users and access to medication Original Papers

    Kauffmann, Carla; Fernandes, Luciana Carvalho; Deitos, Alícia; Laste, Gabriela; Heberlé, Graziela; Castro, Luís César de; Torres, Iraci Lucena da Silva

    Resumo em Português:

    A Assistência Farmacêutica se preocupa com ações desenvolvidas pelo farmacêutico ou outros profissionais com o propósito de promover, proteger e restaurar a saúde. Medicamentos são ferramentas essenciais nesse processo, que se concentra no acesso e no uso racional de fármacos. Este estudo objetivou a avaliação da Assitência Farmacêutica suprida pela Secretaria Municipal da Saúde no Vale do Taquari, no Rio Grande do Sul. Com esse propósito, 2.794 usuários das farmácias públicas foram entrevistados e analisaram-se os dados usando estatística descritiva. Os usuários das farmácias públicas eram, principalmente, mulheres e indivíduos com baixo nível educacional e financeiro. Na média, 2,41 fármacos eram prescritos por prescrição médica e 1,72 destes foram obtidos. Do total de medicamentos prescritos, 76,5% estava inscritos na lista de medicamentos padrão do município (SDL). A medicação foi prescrita pelo nome genérico em 81,8% dos casos. Antibióticos e injeções foram prescritas em 11,9% e 4,0% das prescrições, respectivamente. O acesso dos usuários à informação é parcial, o que pode prejudicar a adesão ao tratamento. Dessa forma, é possível concluir que a revisão do serviço é necessária para que seja eficaz.

    Resumo em Inglês:

    Pharmaceutical assistance concerns actions developed by the pharmacist and other professionals with the purpose of promoting, protecting and restoring health. Medications are an essential tool in this process that focuses on the access to, and the rational use of, drugs. This study is aimed at evaluating the Pharmaceutical Assistance provided by Municipal Health Offices in the Taquari Valley, Rio Grande do Sul. For this purpose, 2,794 users of public pharmacies were interviewed and data was analyzed using descriptive statistics. The users of the public pharmacies were mainly female and individuals with low educational level and income. On average, 2.41 drugs were prescribed per medical prescription and 1.72 of these were procured. Out of the total medicines prescribed, 76.5% were listed in the municipal standard drug list (SDL). Medication was prescribed by its generic name in 81.8% of the prescriptions. Antibiotics and injections were prescribed in 11.9% and 4.0% of the prescriptions, respectively. Users' access to information is partial, which can impair adherence to the treatment. Thus, it is possible to conclude that review of the service is necessary for it to be effective.
  • Evaluation of antibiotics dispensing profile in Tubarão, Santa Catarina, Brazil Original Papers

    Rauber, Claudia; Feltrin, Micheli Regina; Piovezan, Anna Paula

    Resumo em Português:

    Antibióticos são fármacos amplamente utilizados na profilaxia e no tratamento de grande número de doenças. Entretanto, seu uso deve ser cuidadosamente controlado nas farmácias, uma vez que nestas a aquisição sem prescrição médica é elevada. O papel dos farmacêuticos nessas circunstâncias é o de praticar a dispensação de maneira racional. Por meio de questionário estruturado, com questões abertas e fechadas, investigou-se o perfil dos antibióticos dispensados em farmácias de Tubarão, Santa Catarina, Brasil. Pelas respostas, observou-se que 85% das dispensa essa classe de medicamentos sem prescrição médica, principalmente para o tratamento de problemas dos tratos respiratório (62,8%) e urinário (12,0%). Além disso, a orientação dos farmacêuticos se focou amplamente na posologia (66,6%)e nas interações com fármacos (12,6%), em adição às interações com anticoncepcionais, álcool e leite. A importância de se proibir a dispensação sem prescrição médica deve ser enfatizada, assim como os benefícios da educação da população para promover o uso racional de medicamentos.

    Resumo em Inglês:

    Antibiotics are drugs widely used in prophylaxis and treatment of a great number of diseases. However, their use must be carefully controlled as acquisition in pharmacies, often without medical prescription, is elevated. The role of pharmacists in these circumstances is to practice dispensation in a rational manner. Through a structured questionnaire with open and closed questions, this study investigated the profile of antibiotics dispensed in pharmacies of Tubarão, Santa Catarina, Brazil. From the responses, it was observed that 85.0% dispense this class of medicine without medical prescription, mainly for treatment of respiratory (62.8%) and urinary (12.0%) tract disorders. Moreover, pharmacists' guidance was largely focused on posology (66.6%) and drug interaction (12.6%), in addition to the interactions with contraceptives, alcohol and milk. The importance of avoiding antibiotics dispensation without medical prescription must be emphasized, as well as the benefits of educating the population to promote the rational use of medicines.
  • Antibacterial activity of propolis-based toothpastes for endodontic treatment Original Papers

    Victorino, Fausto Rodrigo; Bramante, Clovis Monteiro; Watanabe, Evandro; Ito, Izabel Yoko; Franco, Selma Luci; Hidalgo, Mirian Marubayashi

    Resumo em Português:

    O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antibacteriana de formas farmacêuticas a base de própolis para uso no tratamento endodôntico como medicação intracanal. As formulações de própolis, em forma de pastas, foram preparadas a partir de um extrato pré-estabelecido em estudos anteriores e identificadas como A70D e D70D. Como controle, foi utilizado pasta de hidróxido de cálcio. As bactérias utilizadas foram: Streptococcus mutans (ATCC 25175), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Kocuria rhizophila (ATCC 9341), Escherichia coli (ATCC 10538), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), Enterococcus hirae (ATCC 10541), Streptococcus mutans (ATCC 25175) e 5 cepas de campo isoladas da saliva: Staphylococcus spp. (23.1 - coagulase positiva), Staphylococcus spp. (23.5 - coagulase negativa), Staphylococcus spp. (26.1 - coagulase positiva), Staphylococcus spp. (26.5 - coagulase negativa) e Staphylococcus epidermidis (6epi). Foi utilizado o método poço difusão em camada dupla de ágar, em meio de cultura Tryptic Soy Agar. As placas foram mantidas à temperatura ambiente por 2 h para permitir a difusão das pastas no meio de cultura, e então incubadas a 35 ºC por 24 h em aerobiose e em microaerofilia (S. mutans). Após este período, foi medido o diâmetro total do halo de inibição. Os resultados foram submetidos ao teste de análise de variância ANOVA seguido do teste de Tukey com p<0,05. As pastas a base de própolis apresentaram atividade antibacteriana contra 83,3% das bactérias analisadas. Para 66,7% das bactérias, as pastas de própolis apresentaram maior atividade antibacteriana que o hidróxido de cálcio, e este foi mais efetivo apenas para Streptococcus mutans (ATCC 25175), Staphylococcus aureus (ATCC 25923) e Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853). De acordo com a metodologia utilizada, pode-se concluir que as pastas experimentais A70D e D70D apresentam boa atividade contra bactérias aeróbias, sendo superior ao hidróxido de cálcio.

    Resumo em Inglês:

    This study evaluated the antibacterial activity of propolis-based toothpastes used as intracanal medication in endodontic treatment. The propolis-based toothpastes were prepared using an extract established in previous studies (identified as A70D and D70D). Calcium hydroxide paste was used as a control. The bacteria employed were Streptococcus mutans (ATCC 25175), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Kocuria rhizophila (ATCC 9341), Escherichia coli (ATCC 10538), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), Enterococcus hirae (ATCC 10541), Streptococcus mutans (ATCC 25175). Five field strains isolated from saliva were used: Staphylococcus spp. (23.1 - coagulase positive), Staphylococcus spp. (23.5 - coagulase negative), Staphylococcus spp. (26.1 - coagulase positive), Staphylococcus spp. (26.5 - coagulase negative) and Staphylococcus epidermidis (6epi). The diffusion-well method on double-layer agar was used in a culture medium of Tryptic Soy Agar. The plates were kept at room temperature for two hours to allow the diffusion of pastes in the culture medium, and then incubated at 35º C for twenty-four hours in aerobiosis and in microaerophilia (S. mutans). After this period, the total diameter of the inhibition halo was measured. The results were analyzed by ANOVA analysis of variance, followed by the Tukey test at p<0.05. The propolis-based toothpastes presented antibacterial activity against 83.3% of the analyzed bacteria. For 66.7% of these bacteria, the propolis-based toothpastes exhibited greater antibacterial activity than calcium hydroxide. The present results allow us to conclude that the experimental pastes A70D and D70D showed good activity against aerobic bacteria, proving more effective than calcium hydroxide.
  • Early weaning impairs body composition in male mice Original Papers

    Borges, Maria Carolina; Rogero, Marcelo Macedo; Pires, Ivanir Santana de Oliveira; Borelli, Primavera; Tirapegui, Julio

    Resumo em Português:

    O presente estudo objetivou avaliar o efeito do desmame precoce sobre a composição corporal e sobre parâmetros indicativos do estado nutricional de camundongos. O grupo experimental consistiu de camundongos Swiss Webster, machos, desmamados precocemente (14º dia de vida) e alimentados com ração apropriada para roedores em crescimento até o 21º dia pós-natal (grupo DESM). O grupo controle consistiu de camundongos amamentados até o 21º dia pós-natal (grupo CON). Todos os animais foram sacrificados no 21º dia de vida. O grupo DESM apresentou redução da concentração e conteúdo hepático e muscular de proteínas, da concentração cerebral de proteínas, da concentração e conteúdo cerebral de DNA e da razão proteína/RNA hepática e muscular (p<0,05). Quanto à composição corporal, o grupo DESM apresentou maior conteúdo de umidade, maior percentual de umidade e lipídios e menor conteúdo e percentual de cinzas e proteína na carcaça (p<0,05). Os resultados indicam que o desmame precoce acarreta em prejuízo à composição corporal e a parâmetros indicativos do estado nutricional, o que pode estar relacionado ao retardo do processo de maturação química. Os dados do presente estudo podem contribuir para o entendimento da influência da alimentação com fórmulas infantis sobre a composição corporal e sobre o estado nutricional.

    Resumo em Inglês:

    This study aimed to evaluate the effect of early weaning on body composition and on parameters related to nutritional status in mice. The experimental group consisted of male Swiss Webster mice that were weaned early (at postnatal day fourteen) and fed an appropriate diet for growing rodents until postnatal day twenty-one (EW group). The control group consisted of male mice breastfed until postnatal day twenty-one (CON group). All animals were sacrificed on the twenty-first day of life. The EW group showed a decrease in liver and muscle protein content and concentration, brain protein concentration, brain DNA content and concentration, as well as liver and muscle protein/RNA ratio (p<0.05). Concerning body composition, the EW mice showed increased moisture content, increased moisture and lipid percentage, and a smaller percentage and content of protein and ash in the carcass (p<0.05). These results indicate that early weaning impairs body composition and parameters related to nutritional status, which may be explained by retarded chemical maturation processes. This data may contribute to the overall understanding of the influence of breastfeeding versus feeding with artificial milk on body composition and on nutritional status.
  • Effect of a Pharmaceutical Care Program on quality of life and satisfaction with pharmacy services in patients with type 2 diabetes mellitus Original Papers

    Correr, Cassyano Januário; Pontarolo, Roberto; Souza, Rodrigo Augusto de Paula e; Venson, Rafael; Melchiors, Ana Carolina; Wiens, Astrid

    Resumo em Português:

    O objetivo foi avaliar os resultados humanísticos de pacientes com diabetes tipo 2, por meio da adoção de acompanhamento farmacoterapêutico nas farmácias comunitárias. Utilizaram-se: ensaio controlado, não-randomizado, de 12 meses; n=161 pacientes, distribuídos entre Grupo Controle e de Intervenção, e 6 farmácias comunitárias, todas na região da cidade de Curitiba, Estado do Paraná. A qualidade de vida relacionada à saúde (HRQoL) e o índice de satisfação foram determinados utilizando a ferramenta de avaliação DQOL, que mede a HRQoL, e a ferramenta de avaliação da satisfação (QSSF). Intervenções em 119 resultados terapêuticos foram efetuadas (2,3/paciente [SD=1,6]. Os problemas mais comumente encontrados foram aqueles relacionados à ineficácia da farmacoterapia (68,1%). O Grupo de Intervenção mostrou melhoria significativa da HRQoL em comparação ao Grupo Controle (0,08 versus 0,00 [p=0,030 e 0,07 versus -0,04 [p=0,033], respectivamente). Após o ajuste da linha base das variáveis, a diferença na contagem de melhoramento entre os grupos no QSSF foi atribuída à alocação de pacientes no Grupo de Intervenção. O acompanhamento farmacoterapêutico em pacientes de diabetes tipo 2 em farmácias comunitárias pode melhorar a HRQoL e a satisfação dos pacientes.

    Resumo em Inglês:

    The aim is to evaluate the humanistic outcomes in type 2 diabetic patients by the adoption of pharmacotherapy follow-up in community pharmacies. Controlled, non-randomized, 12-months trial; n=161 patients distributed into control and intervention groups; 6 community pharmacies involved, all in the Curitiba city region, in the state of Paraná were used. The health-related quality of life (HRQoL) and the satisfaction index were determined using both the DQOL assessment tool, which measures HRQoL, and the satisfaction evaluation tool (QSSF). Interventions on 119 negative therapeutic outcomes were done (2.3/patient [SD=1.6]); the most commonly found problems were related to ineffectiveness of pharmacotherapy (68.1%). The Intervention-Group showed a significant improvement in HRQoL compared with the Control Group (0.08 vs -0.01, respectively; p=0.036). Satisfaction and impact domains presented the most significant improvement (0.13 vs 0.00 [p=0.030] and 0.07 vs -0.04 [p=0.033], respectively). After adjusting for baseline variables, the difference in improvement scores between groups on the QSSF was attributed to the allocation of patients in the intervention group. Pharmacotherapy follow-up of type 2 diabetic patients in community pharmacies can improve the HRQoL and satisfaction of patients.
  • Pharmaceutical assistance within the SUS: the experience of students in Rural Internship from a Pharmacy Course Original Papers

    Saturnino, Luciana Tarbes Mattana; Luz, Zélia Profeta; Perini, Edson; Modena, Celina Maria

    Resumo em Português:

    As Diretrizes Curriculares de 2002 implantaram um novo currículo para o Curso de Farmácia, trazendo como propósito a aprendizagem para o Sistema Único de Saúde (SUS). Para atender a esta demanda, algumas Faculdades têm implantado a disciplina de Internato Rural (IR) como forma de viabilizar o ensino para o SUS e a interação do aluno com a assistência farmacêutica. Este trabalho analisa a concepção de alunos do IR do Curso de Farmácia da Universidade Federal de Minas Gerais sobre a assistência farmacêutica e sobre a atividade do profissional farmacêutico no SUS. A coleta das informações foi realizada por meio da técnica do grupo focal antes e após o IR. Para a análise dos discursos foi utilizada a técnica da análise de conteúdo. Participaram do estudo oito estudantes. Observou-se que os alunos apresentavam uma visão fragmentada sobre a assistência, tanto antes como após o internato. O IR proporcionou aos estudantes uma visão da realidade e o reconhecimento das dificuldades que o profissional ainda enfrenta nos serviços. Além disso, notou-se que a disciplina de internato no curso de farmácia pode ser uma alternativa que contribui para a atuação e a formação do farmacêutico para o SUS.

    Resumo em Inglês:

    The 2002 Brazilian Curricular Lines established a new curriculum for Pharmacy Programs, including amplified information about the Unified Health System (SUS). Following this, some Colleges have implemented a Rural Internship (RI) discipline, as a way to promote: a) adequate information on the SUS, and b) students' interaction with pharmaceutical assistance. In this study we analyzed the perceptions of students enrolled in the Rural Internship program of the undergraduate Pharmacy Program at the Federal University of Minas Gerais. Eight students participated in this study and their perceptions and ideas were obtained by focus groups, both before and after the RI. This information was analyzed by content analysis. The students had a fragmented, distorted view on assistance, before as well as after taking the RI. Nevertheless, the RI provided students with a view of the professional realities and difficulties routinely faced by pharmacists in the public health system. The RI course of the Pharmacy Programs was viewed as an opportunity to improve the professional work within the SUS.
  • Extended release promethazine HCl using acrylic polymers by freeze-drying and spray-drying techniques: formulation considerations Original Papers

    Tiwari, Ruchi; Srivastava, Birendra; Tiwari, Gaurav; Rai, Awanik

    Resumo em Português:

    O presente trabalho compreendeu estudo de um novo sistema de liberação prolongada de cloridrato de prometazina (PHC) com polímeros acrílicos Eudragit RL100 e Eudragit S100 em diferentes proporções em massa (1:1 e 1:5) e em combinação (0,5+1,5), utilizando técnicas de liofilização e de secagem por aspersão As dispersões sólidas foram caracterizadas por espectrofotometria no infravermelho por transformada de Fourier (FT-IR), calorimetria diferencial de varredura (DSC), difratometria de raios X (PXRD), Ressonância Magnética Nuclear (RMN), microscopia eletrônica de varredura (SEM) e, também, por estudos de solubilidade e de dissolução in vitro em HCl 0,1 N (pH 1,2), água bidestilada e tampão fosfato (pH 7,4). Realizaram-se, também, testes de adsorção da solução do fármaco nos polímeros sólidos. Desenvolveu-se sistema de dispersão sólida exclusiva dentro das cápsulas, que foi avaliado por meio de estudos de dissolução in vitro. Relacionou-se o desaparecimento progressivo de picos do fármaco em perfis termotrópicos de dispersões secas por spray à quantidade aumentada de polímero, enquanto os estudos de SEM sugeriram dispersão homogênea do fármaco no polímero. O Eudragit RL100 apresentou maior capacidade de adsorção do que o Eudragit S100 e, dessa forma, a combinação de (0,5+1,5) para S100 e para RL100 mostrou taxa de dissolução maior, com liberação de 94,17% de fármaco em 12 horas. Entre as várias formulações, as cápsulas preparadas pela combinação de polímeros acrílicos utilizando secagem por aspersão (0,5+1,5) apresentou liberação prolongada do fármaco em 12 horas, com 96,78% de liberação, seguindo cinética de ordem zero (r² = 0,9986)

    Resumo em Inglês:

    The present study investigated a novel extended release system of promethazine hydrochloride (PHC) with acrylic polymers Eudragit RL100 and Eudragit S100 in different weight ratios (1:1 and 1: 5), and in combination (0.5+1.5), using freeze-drying and spray-drying techniques. Solid dispersions were characterized by Fourier-transformed infrared spectroscopy (FT-IR), differential scanning calorimetry (DSC), Powder X-ray diffractometry (PXRD), Nuclear magnetic resonance (NMR), Scanning electron microscopy (SEM), as well as solubility and in vitro dissolution studies in 0.1 N HCl (pH 1.2), double-distilled water and phosphate buffer (pH 7.4). Adsorption tests from drug solution to solid polymers were also performed. A selected solid dispersion system was developed into capsule dosage form and evaluated for in vitro dissolution studies. The progressive disappearance of drug peaks in thermotropic profiles of spray-dried dispersions were related to increasing amount of polymers, while SEM studies suggested homogenous dispersion of drug in polymer. Eudragit RL100 had a greater adsorptive capacity than Eudragit S100, and thus its combination in (0.5+1.5) for S100 and RL 100 exhibited a higher dissolution rate with 97.14% drug release for twelve hours. Among different formulations, capsules prepared by combination of acrylic polymers using spray-drying (1:0.5 + 1.5) displayed extended release of drug for twelve hours with 96.87% release followed by zero order kinetics (r²= 0.9986).
  • Variables associated with the post-treatment healing of lesions in patients with American cutaneous leishmaniasis in Paraná State, Brazil Original Papers

    Casavechia, Maria Teresinha Gomes; Silveira, Thaís Gomes Verzignassi; Teodoro, Ueslei; Janeiro, Vanderly; Udo, Margareth; Campana Lonardoni, Maria Valdrinez

    Resumo em Português:

    O objetivo deste estudo foi investigar a associação de algumas variáveis para a cicatrização de lesões em pacientes com leishmaniose tegumentar americana (LTA). Os pacientes com diagnóstico clínico e laboratorial foram acompanhados depois do tratamento por avaliação clínica e reação de imunofluorescência indireta (IFI), de setembro de 2000 a dezembro de 2003. Dos 163 pacientes 85,3% apresentaram cicatrização das lesões no último retorno para a avaliação clínica e 82,7% destes tiveram a IFI negativa indicando uma associação entre a cicatrização das lesões e a negativação da IFI (p=0,000). Nos pacientes acompanhados até 120 dias depois do tratamento houve associação significativa entre os resultados negativos da IFI e a cicatrização das lesões (p=0,0000). A análise pela regressão logística mostrou que quando a IFI do primeiro retorno após o tratamento foi negativa, o paciente tinha 2,175 mais chance de cicatrização (p=0,0001). Os resultados mostram associação entre a negativação da IFI e a cicatrização das lesões quando o primeiro retorno foi até 120 dias e que as chances de cicatrização são significativamente maiores nos pacientes que apresentaram IFI negativa no primeiro retorno depois do tratamento.

    Resumo em Inglês:

    The purpose of this study was to investigate the relationship of several variables to the healing of lesions in patients with American cutaneous leishmaniasis (ACL). The patients with clinical and/or laboratorial diagnoses of the disease were followed up for varying periods after treatment by clinical evaluation and indirect immunofluorescence assay (IFA), from September 2000 to December 2003. The lesions of 85.3% of the 163 patients had healed by their last return for clinical evaluation, and of these, 82.7% had negative IFA results, indicating an association between the healing of lesions and IFA negativity (p=0.000). In patients evaluated up to 120 days after treatment, there was a significant association between negative IFA results and the healing of lesions (p=0.0000). Logistic regression analysis showed that negative IFA results on patients' first return after treatment predicted a 2.175 fold greater chance of lesion healing (p=0.0001). These results indicate an association between IFA negativity at the first return up to a period of 120 days, and the healing of lesions, and that the chances of healing are significantly higher in patients with negative IFA results at their first return after treatment.
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