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Embriogênese somática indireta em explantes foliares de Coffea arabica L. CV. Obatã

Indirect somatic embryogenesis in Coffea arabica L. CV. Obatã

Objetivou-se, com este trabalho, estudar a embriogênese somática indireta em Coffea arabica L. cv. Obatã, incluindo as etapas de indução de calos, diferenciação, regeneração e formação de embriões. Segmentos foliares retirados de plantas em condições de campo foram desinfestados com álcool 70% por 1' e hipoclorito de sódio 1% durante 15' e inoculados em meio IC (indução de calos) suplementado de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L-1) e Cinetina (0, 2, 4 e 8 mg.L-1). Posteriormente, os calos foram transferidos para o meio DC (diferenciação de calos), adicionado de diferentes concentrações de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L-1) e BAP (0, 2, 4 e 8 mg.L-1); em seguida, durante a etapa de regeneração, os calos embriogênicos friáveis foram inoculados em meio R suplementado de BAP (0, 2, 4 e 6 mg.L-1) e sacarose (0, 15, 30, 45 e 60 g.L-1). Os meios de cultura utilizados tiveram pH ajustado para 5,6 ± 1 antes de serem autoclavados. Os experimentos foram mantidos em sala de crescimento a 26 ± 1ºC. Durante as etapas de indução e diferenciação de calos, os experimentos ficaram em condições de obscuridade, e na etapa de regeneração, os experimentos foram mantidos sob fotoperíodo de 16 horas e intensidade luminosa de 35 µmol.m-2.s-1. Concluiu-se que a combinação entre 4 mg.L-1 de 2,4-D e 2 mg.L-1 de cinetina favoreceu a indução de calos primários mistos. Maior freqüência de calos embriogênicos friáveis ocorreu na presença de BAP (8 mg.L-1), associado ou não ao 2,4-D, e maior número de embriões por explante foram obtidos quando utilizou-se sacarose (30 g.L-1) e BAP (3 mg.L-1).

Café; calos; embriões somáticos; cultura de tecidos


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