Protein biomarkers of external root resorption: A new protein extraction protocol. Are we going in the right direction?

OBJETIVO:

o objetivo desse trabalho foi determinar o protocolo de extração proteica do fluido crevicular gengival, que pudesse ser utilizado para a realização da primeira dimensão dos géis 2-DE, bem como fazer uma revisão dos atuais candidatos a marcadores proteicos dessa patologia que podem ser utilizados na prevenção dessa doença.

MÉTODOS:

foi coletado o fluido crevicular gengival de dois grupos de 60 pacientes, com e sem a reabsorção radicular externa. As amostras foram extraídas por diversos métodos de extração proteica e utilizados géis SDS-PAGE para aferir a qualidade do método, que posteriormente foi testado durante a realização da focalização isoelétrica dos géis 2-DE, de amostras de pacientes com e sem a patologia.

RESULTADOS:

a utilização de água Milli-Q gelada ultrapura, sem nenhuma precipitação para a extração proteica do fluido crevicular gengival, foi o método com maior nitidez das bandas proteicas, além de permitir a realização da eletroforese bidimensional.

CONCLUSÕES:

o novo protocolo de extração proteica não interfere na focalização durante a realização dos géis 2-DE, além de maior nitidez na resolução das bandas proteicas dos géis SDS-PAGE. Isso permitirá o mapeamento e busca de novos marcadores da reabsorção radicular externa, tendo em vista a dificuldade de realização de testes moleculares com os atuais candidatos a marcadores proteicos.

Reabsorção da raiz; Técnicas de diagnóstico molecular; Líquido do sulco gengival; Eletroforese; Focalização isoelétrica