A ligação de moléculas de azul de toluidina a grupamentos fosfatos de ácido nucléico em condições de competição com íons Mg2+ foi estudada em regiões de cromossomos politênicos de Trichosia pubescens que diferem em composição e organização (áreas ricas em RNA, pufes de RNA e DNA, heterocromatina). O objetivo foi encontrar variabilidade na concentração de Mg2+ na qual a metacromasia fosse completamente abolida (= concentração crítica de eletrólitos; CEC) e que refletisse diferenças ao nível dos complexos nucleoprotéicos em regiões cromossômicas e fases do desenvolvimento particulares. Embora valores altos de CEC tenham sido encontrados na cromatina altamente empacotada, como nas zonas heterocromáticas, os valores de CEC para outras regiões mostraram-se afetados não apenas pela disponibilidade e proximidade de fosfatos do DNA mas também pela riqueza em RNA e outros fatores. Entre estes, mudanças na geometria e no estado de empacotamento do DNA foram consideradas para explicar valores aumentados após remoção de RNA em pufes de DNA e zonas ricas em RNA. Baseando-se em valores de CEC foi sugerido que possam ocorrer alterações ao nível dos complexos nucleoprotéicos em pufes antes que estes sejam detectáveis morfologicamente como tal. Os valores de CEC nos cromossomos politênicos revelaram-se, pois, altamente variáveis com as variações em composição e organização nucleoprotéica do substrato. Contudo, uma vez que um raciocínio complexo e aparentemente contraditório tem que ser utilizado para a interpretação de parte dos resultados, a CEC não é recomendável como ferramenta para estudos extensivos e comparativos neste modelo em particular.
