A técnica de Termofluor constitui uma importante ferramenta na identificação de moléculas protótipos a fármacos. No presente trabalho, foi desenvolvido um método alternativo para a técnica de Termofluor, chamado ThermoFMN, que explora o grupo prostético flavina mononucleotídeo (FMN) como sonda fluorescente. A validação do método foi feita através do monitoramento da fluorescência do FMN para diferentes alvos macromoleculares na presença de uma biblioteca aleatória de ligantes. Além disso, fármacos com eficácia comprovada tiveram seus perfis de inibição seletiva avaliado. Além de demonstrar que o rendimento quântico do FMN fornece intensidade adequada para detecção, nossos resultados revelam que o método de ThermoFMN utiliza-se de baixas concentrações de proteína e é compatível com uma vasta quantidade de tampões e aditivos químicos. A metodologia apresentada nesse trabalho propõe uma estratégia alternativa na busca por ligantes para proteínas dependentes de FMN, como uma importante ferramenta no desenvolvimento de novas terapias contra doenças negligenciadas.
