Foi desenvolvido um método simples, sensível e rápido de extração em fase sólida utilizando cromatografia liquida de alta eficiência (SPE-CLAE) para a determinação simultânea de quatro cumarinas, psoralen, isopsoralen, imperatorina e isoimperatorina, utilizando ostole como padrão interno. Utilizando este método, foi analisada a farmacocinética destas cumarinas em plasma de ratos após administração oral de uma cápsula "YIGONG" da medicina chinesa tradicional. Amostras de plasma foram pré-tratadas com extração em fase sólida utilizando cartuchos Extract-CleanTM e a separação dos extratos foi realizada com uma coluna Eurospher C18 utilizando metanol-água como fase móvel. Os limites de quantificação foram 9,7 ng mL-1 para psoralen, 7,1 ng mL-1 para isopsoralen, 6,7 ng mL-1 para imperatorina e 3,0 ng mL-1 para isoimperatorina. As recuperações médias das quatro cumarinas contidas no plasma de ratos foram bem acima de 80%. As precisões determinadas para 6 dias estiveram sempre dentro de 10%. Concluiu-se que o método estabelecido é adequado para estudos farmacocinéticos destas quatro cumarinas em plasma de ratos.