Análise genotípica de aspartil proteases secretórias em isolados vaginais de <i>Candida albicans</i>

Lima, Janaína S.; Braga, Kaoane Regina G. S.; Vieira, Camila A.; Souza, Wérika Weryanne R.; Chávez-Pavoni, Juliana Helena; Araújo, Claudinéia de; Goulart, Letícia S.

doi:10.5935/1676-2444.20180006

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Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina Laboratorial

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Sumário

LABORATORY MEDICINE, ORIGINAL ARTICLE • J. Bras. Patol. Med. Lab. 54 (1) • Jan-Feb 2018 • https://doi.org/10.5935/1676-2444.20180006 copiar

Análise genotípica de aspartil proteases secretórias em isolados vaginais de Candida albicans

Autoria SCIMAGO INSTITUTIONS RANKINGS

RESUMO

Introdução:

Candida albicans é o principal agente etiológico das vaginites fúngicas. Essas leveduras produzem aspartil proteases secretórias que são codificadas por uma família de 10 genes (SAP1-10).

Objetivo:

O objetivo deste estudo foi avaliar a presença dos genes SAP1-7 em linhagens vulvovaginais de C. albicans.

Materiais e método:

O estudo incluiu 26 isolados vaginais de C. albicans. Os genes de aspartil proteases (SAP1-7) foram detectados por reação em cadeia da polimerase (PCR).

Resultados:

O gene mais frequente em C. albicans isolado de colonização foi SAP6 (93,33%), e de infecção, SAP7 (100%). Foi observada diferença estatística (p = 0,049) na frequência do gene SAP1 entre isolados oriundos de colonização e infecção vulvovaginal.

Conclusão:

Constatou-se alta frequência dos genes SAP em linhagens vaginais de C. albicans. Os resultados sugerem uma participação de SAP1 no processo infeccioso da candidíase vulvovaginal.

Unitermos:
candidíase vulvovaginal; Candida albicans; fatores de virulência

Primer	Oligonucleotide sequence	Size (pb)
SAP 1	Forward 5'-TCA ATC AAT TTA CTC TTC CAT TTC TAA CA-3' Reverse 5'-CCA GTA GCA TTA ACA GGA GTT TTA ATG ACA-3'	161
SAP 2	Forward 5'-AAC AAC AAC CCA CTA GAC ATC ACC-3' Reverse 5'-TGA CCA TTA GTA ACT GGG AAT GCT TTA GGA-3'	178
SAP 3	Forward 5'-CCT TCT CTA AAA TTA TGG ATT GGA AC-3' Reverse 5'-TTG ATT TCA CCT TGG GGA CCA GTA ACA TTT-3'	231
SAP 4	Forward 5'-TTA TTT TTA GAT ATT GAG CCC ACA GAA A-3' Reverse 5'-GCC AGT GTC AAC AAT AAC GCT AAG TT-3'	171
SAP 5	Forward 5'-AGA ATT TCC CGT CGA TGA GAC TGG T-3' Reverse 5'-CAA ATT TTG GGA AGT GCG GGA AGA-3'	277
SAP 6	Forward 5'-CCC GTT TTG AAA TTA AAT ATG CTG ATG G-3' Reverse 5'-GTC GTA AGG AGT TCT GGT AGC TTC G-3'	187
SAP 7	Forward 5'-GAA ATG CAA AGA GTA TTA GAG TTA TTA C-3' Reverse 5'-GAA TGA TTT GGT TTA CAT CAT CTT CAA CTG-3'	196

Genes	Infection (n = 11) n (%)	Colonization (n = 15) n (%)	Total (n = 26) n (%)	p-value
SAP1	10 (90.9)	8 (53.33)	18 (69.23)	0.049
SAP2	7 (63.63)	9 (60)	16 (61.54)	0.588
SAP3	5 (45.45)	7 (46.66)	12 (45.15)	0.631
SAP4	10 (90.9)	11 (73.33)	21 (80.77)	0.273
SAP5	8 (72.72)	13 (86.66)	21 (80.77)	0.345
SAP6	8 (72.72)	14 (93.33)	22 (84.61)	0.187
SAP7	11 (100)	11 (73.33)	22 (84.61)	0.091

Pattern	Genotype	n (%)
1	SAP1-7	3 (16)
2	SAP1/SAP2/SAP4/SAP5/SAP6/SAP7	3 (16)
3	SAP1/SAP3/SAP4/SAP5/SAP6/SAP7	2 (10)
4	SAP2/SAP4/SAP5/SAP6	2 (10)
5	SAP2/SAP5/SAP6/SAP7	2 (10)
6	SAP1/SAP2/SAP3/SAP4/SAP5/SAP7	1 (5)
7	SAP1/SAP2/SAP3/SAP5/SAP6/SAP7	1 (5)
8	SAP1/SAP2/SAP3/SAP4/SAP6/SAP7	1 (5)
9	SAP3/SAP4/SAP5/SAP6/SAP7	1 (5)
10	SAP1/SAP3/SAP4/SAP6/SAP7	1 (5)
11	SAP1/SAP2/SAP4/SAP6/SAP7	1 (5)
12	SAP1/SAP2/SAP3/SAP4/SAP7	1 (5)
13	SAP1/SAP4/SAP5/SAP6/SAP7	1 (5)
14	SAP2/SAP3/SAP4/SAP5/SAP6	1 (5)
15	SAP4/SAP5/SAP6/SAP7	1 (5)
16	SAP1/SAP5/SAP6/SAP7	1 (5)
17	SAP1/SAP4/SAP5/SAP7	1 (5)
18	SAP1/SAP4/SAP7	1 (5)
19	SAP5/SAP6	1 (5)

Studies	Population	Frequency of SAP genes
Our study	Women from Rondonópolis with symptomatic VVC	SAP7 (100%) and SAP1-4 (90.9%)
Our study	Women from Rondonópolis asymptomatic for VVC	SAP6 (93.33%) and SAP5(86.66)
Monroy-Pérez et al.⁽³¹31 Monroy-Pérez E, Paniagua-Contreras G, Vaca-Paniagua F, Negrete- Abascal E, Vaca S. SAP expression in Candida albicans strains isolated from Mexican patients with vaginal candidosis. Int J Clin Med. 2013; 4: 25-3.⁾	Women from Mexico with VVC	SAP4-6 (100%)
Bassyouni et al.⁽²⁶26 Bassyouni RH, Wegdan AA, Abdelmoneim A, et al. Phospholipase and aspartyl proteinase activities of Candida species causing vulvovaginal candidiasis in patients with type 2 diabetes mellitus. J Microbiol Biotechnol. 2015; 25(10): 1734-41.⁾	Diabetic and non-diabetic women from Egypt	SAP1, SAP2 (100%) and SAP5 (75%)
Kalkanci et al.⁽³²32 Kalkanci A, Bozdayi G, Birib A, Kustimur S. Distribution of secreted aspartyl proteinases using a polymerase chain reaction assay with SAP specific primers in Candida albicans isolates. Folia Microbiol. 2005; 50(5): 409-13.⁾	Women from Turkey with VVC	SAP1-3 (92.5%), SAP6 (12.5%) and SAP4-5 (7.5%)

Study	Population	Expression of SAP genes
Nas et al.⁽⁴¹41 Nas T, Kalkanci A, Ozkan S. Expression of ALS1 and SAP4 genes in Candida albicans strains isolated from women with vaginitis. Folia Microbiol. 2008; 53(2): 179-83.⁾ Lian and Liu⁽⁴³43 Lian CH, Liu WD. Differential expression of Candida albicans secreted aspartyl proteinase in human vulvovaginal candidiasis. Mycoses. 2007; 50: 383-90.⁾ Lin et al.⁽⁴⁴44 Lin N, Feng J, Tu Y, Feng A. Expression of Candida albicans secreted aspartyl proteinase in acute vaginal candidiasis. J Huazhong Univ Sci Technol Med Sci. 2007; 27(3): 333-5.⁾	Women from Turkey with VVC Symptomatic, asymptomatic women, and women with RVVC from China Women from China with acute VVC	Expression of SAP4: pregnant (40%), post-menopausal (50%) women, and women in childbearing age (33%) SAP1 and SAP3 were present only in VVC and RVVC isolates SAP2 and SAP5 were most commonly expressed in the vaginal mucosa

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[1] CORRESPONDING AUTHOR. Letícia Silveira Goulart, Avenida dos Estudantes, 5005; Cidade Universitária; CEP: 78735-901; Rondonópolis-MT, Brasil; e-mail: lgoulart77@yahoo.com.br.