Foram analisadas quatro populações de Neoplecostomus yapo por meio da técnica de eletroforese de aloenzimas em gel de amido de milho. O padrão de bandas obtido foi semelhante ao de N. paranensis, tendo sido detectado um total de 24 loci enzimáticos. Duas populações (ribeirão Atlântico e ribeirão Uraí) apresentaram formas monomórficas para todos os 24 loci, enquanto as outras duas (rio Verde e rio Fortaleza) apresentaram 8,3% de loci polimórficos. As estimativas de variabilidade genética He para as populações dos rios Verde e Fortaleza foram 0,0195 e 0,0179, respectivamente, muito inferiores à média das espécies de peixes no mundo todo (0,051). Os valores das estatísticas de Wright F IS = 0,5181, F IT = 0,5681 e F ST = 0,1039 e os valores de distância genética de Nei mostram que as quatro populações são geneticamente muito semelhantes entre si e que há excesso de homozigotos nos loci polimórficos.
