Híbridos envolvendo as espécies Pseudoplatystoma corruscans vs. Pseudoplatystoma reticulatum são amplamente comercializados por apresentarem maior docilidade e precocidade quando comparados aos parentais. Neste trabalho objetivou-se identificar, por meio de técnicas moleculares, a existência de surubins híbridos em rios do estado do Mato Grosso do Sul. Pseudoplatystoma corruscans, Pseudoplatystoma reticulatum e 'Surubim' híbrido foram identificados utilizando as técnicas de PCR multiplex e PCR-RFLP dos genes nucleares RAG2, GLOBINA, EF1α, 18S rRNA e mitocondrial 16S rRNA. Os resultados demonstraram a presença de híbridos F1 em rios e a ocorrência da introgressão genética, evidenciada pelos híbridos Pós-F1. Além disso, foram observadas discrepâncias entre a identificação morfológica e genética, demonstrando a eficácia da utilização de diversos marcadores moleculares para identificação correta destes híbridos. Torna-se evidente a necessidade da implantação de projetos de manejo e conservação, a fim de manter a integridade genética de populações de espécies nativas em rios do estado do Mato Grosso do Sul, que encontram-se ameaçadas pela hibridação.
Articles • Neotrop. ichthyol. 12
(03)
• Jul-Sep 2014 • https://doi.org/10.1590/1982-0224-20130169 linkcopiar
Genetic identification of interspecific hybrid of Neotropical catfish species (Pseudoplatystoma corruscans vs. Pseudoplatystoma reticulatum) in rivers of Mato Grosso do Sul State, Brazil
Autoria
person Jussara Oliveira Vaini
schoolFaculdade de Ciências Exatas e Tecnologia - Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD). Rodovia Dourados - Itahum, Km 12 - Cidade Universitária. CEP: 79.804-970. Dourados, MS, Brazil. jussaravaini@hotmail.comUniversidade Federal da Grande Dourados (UFGD)BrazilDourados, MS, BrazilFaculdade de Ciências Exatas e Tecnologia - Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD). Rodovia Dourados - Itahum, Km 12 - Cidade Universitária. CEP: 79.804-970. Dourados, MS, Brazil. jussaravaini@hotmail.com
person Alexéia Barufatti Grisolia
schoolFaculdade de Ciências Biológicas e Ambientais - Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD). Rodovia Dourados - Itahum, Km 12 - Cidade Universitária. CEP: 79.804-970. Dourados, MS, Brazil. alexeiagrisolia@ufgd.edu.brUniversidade Federal da Grande Dourados (UFGD)BrazilDourados, MS, BrazilFaculdade de Ciências Biológicas e Ambientais - Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD). Rodovia Dourados - Itahum, Km 12 - Cidade Universitária. CEP: 79.804-970. Dourados, MS, Brazil. alexeiagrisolia@ufgd.edu.br
person Fernanda Dotti do Prado
schoolFaculdade de Ciências, Departamento de Ciências Biológicas - Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP). Av. Luiz Edmundo Carrijo Coube 14-01, Bairro Vargem Limpa. CEP: 17033-360. Bauru, SP, Brazil. ferprado@ibb.unesp.br, fpforesti@fc.unesp.brUniversidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (UNESP)BrazilBauru, SP, BrazilFaculdade de Ciências, Departamento de Ciências Biológicas - Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP). Av. Luiz Edmundo Carrijo Coube 14-01, Bairro Vargem Limpa. CEP: 17033-360. Bauru, SP, Brazil. ferprado@ibb.unesp.br, fpforesti@fc.unesp.br
person Fábio Porto-Foresti
schoolFaculdade de Ciências, Departamento de Ciências Biológicas - Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP). Av. Luiz Edmundo Carrijo Coube 14-01, Bairro Vargem Limpa. CEP: 17033-360. Bauru, SP, Brazil. ferprado@ibb.unesp.br, fpforesti@fc.unesp.brUniversidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (UNESP)BrazilBauru, SP, BrazilFaculdade de Ciências, Departamento de Ciências Biológicas - Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP). Av. Luiz Edmundo Carrijo Coube 14-01, Bairro Vargem Limpa. CEP: 17033-360. Bauru, SP, Brazil. ferprado@ibb.unesp.br, fpforesti@fc.unesp.br
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Figuras | Tabelas
imageFig. 1 Map of collection sites of the biological material. Upper Paraná River basin: Dourados River (1 to 16), Brilhante River (17), and Ivinhema River (18 to 20). Paraguay River basin: Miranda River (21), Aquidauana River (22), Negro River (23), and Paraguay River (24). open_in_new

table_chartTable 1
Description of universal and species-specific primers; Annealing temperature (Ta) in degree Celsius (°C); Size of fragments in base pairs (bp) used in amplification reactions. *Specific for P. corruscans; ** Specific for P. reticulatum.
| Primer | Sequence (5’-3’) | Ta (ºC) | Size (bp) | Reference | |
|---|---|---|---|---|---|
| Universal | RAG2 SiluF | CCTGAGTGCTACCTTATTCATGGA | 50ºC | 550 | (Prado et al. 2011) |
| RAG2 SiluR | CTTGGGAGGAAGAGACCATC | ||||
| Species-Specific | RAG2 PcR* | AACTCCAGGTCAATGAGATAAATG | 58ºC | 330 | |
| RAG2 PrR** | CAGTTCCAGGTCTCTGTGGTT | 290 | |||
| Universal | GLOB SiluF | TCAATATGGTTCACTGGACAGA | 55ºC | 569 | (Hashimoto et al. 2012b) |
| GLOB SiluR | CCAAGAAGCTGAAAGTAGACAGT | ||||
| Species-Specific | GLOB PcR* | CAGCCACCTTGGGGTTTCCT | 59ºC | 304 | |
| GLOB PrF** | GGTACGTCTAATCTCAGTAATTGAAA | 137 | |||
| Universal | EF1α; F | ATTGGAACTGTACCTGTGG | 50ºC | 800 | (Hashimoto et al. 2012b) |
| EF1α; R | CAGCCTTCTGTGCAGACTT | ||||
| Species-Specific | EF1α; PcR* | CAACAATGGCAGCATCTCCT | 50ºC | 520 | |
| EF1α; PrR** | ATAAAGGACAAGGACAAGATCG | 630 | |||
| Universal | 16SF | ACGCCTGTTTATCAAAAACAT | 50ºC | 650 | (Prado et al. 2011) |
| 16SR | CGGTCTGAACTCAGATCACGT | ||||
| Species-Specific | 16S PcF* | TGACCATAAAGATCCGGCTAT | 58ºC | 200 | |
| 16S PrR** | TCTTGGTTTTGGGGTTGTTA | 400 | |||
| Universal | 18S NS1F | GTAGTCATATGCTTGTCTC | 50ºC | 350 | (Hashimoto et al. 2012b) |
| 18S SiluR | CCATCGAAAAGTTGATAGGG |
table_chartTable 2
Description of restriction enzymes and size of the fragments in base pairs (bp) generated by restriction enzyme digestion. Pc: Pseudoplatystoma corruscans, Pr: Pseudoplatystoma reticulatum.
| Gene | Restriction enzyme | Fragment size in bp | Reference | |
|---|---|---|---|---|
| Pc | Pr | |||
| RAG2 | Sau96I | 300, 250 | 550 | Prado et al. 2011 |
| >GLOB | HpyAV | 186, 381 | 569 | Hashimoto et al. 2012b |
| >EF1α; | BpmI | 240, 560 | 240, 270, 290 | Hashimoto et al. 2012b |
| >18S | SmaI | 163, 187 | 350 | Hashimoto et al. 2012b |
| 16S | SmI | 650 | 330, 350 | Prado et al. 2011 |
table_chartTable 3
Comparison between the phenotypic and genotypic identification of individuals at each collection site. Genotype in parenthesis, and phenotype outside parenthesis. N= number of samples; Pc= Pseudoplatystoma corruscans; Pr= Pseudoplatystoma reticulatum; HF1= F1 interspecific hybrid Surubim; Post-F1= Post-F1interspecific hybrid Surubim; "Cachapinta"= female of P. reticulatum and male of P. corruscans; "Pintachara"= female of P. corruscans and male of P. reticulatum.
| Coletem Site | Phenotype (Genotype) | F1 hybrids | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Pc | Pr | H-F1 | Post-F1 | Cachapinta | Pintachara | ||
| Paraguay Basin | Negro River(N= 17) | 8(2) | 9(7) | 0(7) | 0 | 7 | |
| Aquidauana River (N= 7) | 5(2) | 2(4) | 0(0) | 0(1) | 0 | 0 | |
| Miranda River (N=7) | 6(5) | 1(2) | 0(0) | 0(0) | 0 | 0 | |
| Paraguay River (N= 2) | 1(1) | 1(1) | 0(0) | 0(0) | 0 | 0 | |
| Parana Basin | Ivinhema River (N=49) | 27(18) | 11(1) | 11(22) | 0(8) | 22 | 0 |
| Brilhante River (N= 11) | 7(3) | 4(0) | 0(5) | 0(3) | 4 | 1 | |
| Dourados River (N=90) | 69(45) | 16(1) | 5(34) | 0(10) | 31 | 3 | |
| TOTAL | N= 183 | 123 (76) | 44(16) | 16(68) | 0 (23) | 57 | 11 |
table_chartTable 4
Examples of phenotypic and genotypic characterization resulting from the analyses. Pc= Pseudoplatystoma corruscans; Pr= Pseudoplatystoma reticulatum.
| Phenotype | Molecular Markers | Genotype | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 16S | RAG2 | GLOB | EF1 | 18S | |||||||
| Pr | Pc | Pr | Pc | Pr | Pc | Pr | Pc | Pr | Pc | ||
| P.corruscans | x | x | x | x | x | x | x | x | x | "Pintachara" | |
| P.corruscans | x | x | x | x | x | x | x | x | x | "Cachapinta" | |
| P.corruscans | x | x | x | x | x | P. reticulatum | |||||
| P.corruscans | x | x | x | x | x | P. corruscans | |||||
| P.reticulatum | x | x | x | x | x | x | x | x | x | "Pintachara" | |
| P.reticulatum | x | x | x | x | x | x | x | x | x | "Cachapinta" | |
| P.reticulatum | x | x | x | x | x | x | x | Post-F1 | |||
| P.reticulatum | x | x | x | x | x | P. reticulatum | |||||
| Hybrid | x | x | x | x | x | x | x | x | x | "Pintachara" | |
| Hybrid | x | x | x | x | x | x | x | x | x | "Cachapinta" | |
| Hybrid | x | x | x | x | x | x | Post-F1 | ||||
| Hybrid | x | x | x | x | x | P. reticulatum | |||||
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Sociedade Brasileira de Ictiologia
Neotropical Ichthyology, Departamento de Biologia Animal e Vegetal, CCB, Universidade Estadual de Londrina, Rodovia Celso Garcia Cid, Km 380, Cidade Universitária, 86055-900, Londrina, Paraná, Brazil, Phone +55(43)3371-5151 -
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