As soluções crioprotetoras são utilizadas para proteger os espermatozoides das alterações causadas por baixas temperaturas durante o processo de criopreservação. Avaliamos a qualidade do sêmen de Colossoma macropomum após o congelamento, utilizando dimetilsulfóxido (DMSO) como crioprotetor, combinado com duas soluções diluidoras (T1 - Solução 1: Glicose 90,0 g/L, Citrato de Sódio 6,0 g/L, EDTA 1,5 g/L, Bicarbonato de Sódio 1,5 g/L, Cloreto de Potássio 0,8 g/L, Sulfato de Gentamicina 0,2 g/L, e T2 - Solução 2: Glicose 90,0 g/L, ACP(r)-104 10,0 g/L). A taxa de motilidade (%) e o tempo de motilidade (s) não diferiram entre T1 e T2, porém foram mais baixos do que no sêmen fresco. O número de espermatozoides normais foi significativamente diferente nos tratamentos T1 (15,1%) e T2 (21,9%), e ambos mostraram uma redução na porcentagem de espermatozoides normais, comparado ao sêmen fresco (57,4%). Os valores encontrados para as taxas de fertilização e eclosão, funcionalidade mitocondrial e DNA do esperma, não diferiram entre os tratamentos (T1 e T2). Para a integridade da membrana, houve uma porcentagem mais elevada de espermatozóides com a membrana intacta em T1 (53,4%) do que T2 (43,7%). As soluções diluentes combinadas com DMSO a 10% preservaram o DNA espermático intacto em quase todas as células do sêmen de C. macropomum, mas houve perda na funcionalidade dos mesmos.
Articles • Neotrop. ichthyol. 13
(03)
• Jul-Sep 2015 • https://doi.org/10.1590/1982-0224-20140142 linkcopiar
Functional integrity of Colossoma macropomum (Cuvier, 1816) sperm cryopreserved with enriched extender solutions
Autoria
person Raycon Roberto Freitas Garcia
schoolDepartamento de Zootecnia, Grupo de Pesquisa Aquam, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, 91540-000 Porto Alegre, RS, Brazil. (RRFG) raycongarcia@live.com (corresponding author), (ACNV) anacarina.vasconcelos@hotmail.com, (ERO) oberst@vortex.ufrgs.br, (ASVJ) varelajras@gmail.com, (DPSJ) danilo.streit@ufrgs.brUniversidade Federal do Rio Grande do SulBrazilPorto Alegre, RS, BrazilDepartamento de Zootecnia, Grupo de Pesquisa Aquam, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, 91540-000 Porto Alegre, RS, Brazil. (RRFG) raycongarcia@live.com (corresponding author), (ACNV) anacarina.vasconcelos@hotmail.com, (ERO) oberst@vortex.ufrgs.br, (ASVJ) varelajras@gmail.com, (DPSJ) danilo.streit@ufrgs.br
person Ana Carina Nogueira Vasconcelos
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person Jayme Aparecido Povh
schoolFaculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FAMEZ), Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, 79074-460 Campo Grande, MS, Brazil. jayme.peixegen@gmail.comUniversidade Federal de Mato Grosso do SulBrazilCampo Grande, MS, BrazilFaculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FAMEZ), Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, 79074-460 Campo Grande, MS, Brazil. jayme.peixegen@gmail.com
person Eneder Rosana Oberst
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person Antonio Sérgio Varela Jr.
schoolInstituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal do Rio Grande, 96203-000 Rio Grande, RS, Brazil. antoniovarela@furg.brUniversidade Federal do Rio GrandeBrazilRio Grande, RS, BrazilInstituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal do Rio Grande, 96203-000 Rio Grande, RS, Brazil. antoniovarela@furg.br
person Carine Dahl Corcini
person Danilo Pedro Streit Jr.
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Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal do Rio Grande, 96203-000 Rio Grande, RS, Brazil. antoniovarela@furg.brUniversidade Federal do Rio GrandeBrazilRio Grande, RS, BrazilInstituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal do Rio Grande, 96203-000 Rio Grande, RS, Brazil. antoniovarela@furg.br
Figuras | Tabelas
imageFig. 1. (a) Mean and standard deviation of Progressive Motility (Mot) and Normal Sperm (N Sperm) and (b) Motility Time (TMot) of Colossoma macropomum, fresh and frozen, with two extenders (T1 - Solution 1 and T2 - Solution 2). Evaluated using the Kruskal-Wallis non-parametric test. open_in_new

imageFig. 2. Mean and standard deviation of the Fertilization Rate (Fert) and Hatching Rate (Hat) of Colossoma macropomum semen frozen with two extenders (T1 - Solution 1 and T2 - Solution 2). Evaluated using the Kruskal-Wallis nonparametric test. open_in_new

imageFig. 3. The average percentage of damage found in frozen semen of Colossoma macropomum in different treatments. (a) Primary damage: Macrocephaly (Macro); Microcephaly (Micro); Head Degeneration (HD); Degenerated Midpiece (DMP); Curly Tail (CT); Broken Tail (BT); Folded Tail (FT). (b) Secondary damage: Degenerated Tail (DeT); Free Normal Head (FNH); Distal Droplet (DD); Proximal Droplet (PD). open_in_new

imageFig. 4. Mean and standard deviation of percentage of Membrane Integrity (Memb Int), Mitochondria Functionality (Mit Fun) and DNA Integrity (DNA Int) observed in Colossoma macropomum sperm after cryopreservation. Evaluated using the Kruskal-Wallis non-parametric test. open_in_new

table_chartTable 1.
List of sperm damage evaluated in Colossoma macropomun. *Adapted from Miliorini et al. (2011).
| Damage * | |
|---|---|
| Primary | Secondary |
| Macrocephaly | Free Normal Head |
| Microcephaly | Degenerated Tail |
| Degenerated Head | Proximal Droplet |
| Degenerated Midpiece | Distal Droplet |
| Broken Tail | |
| Curly Tail | |
| Folded Tail | |
table_chartTable 2.
Composition of extenders used in experiment with Colossoma macropomun.
| Components | Solution | |
|---|---|---|
| 1 | 2 | |
| Glucose (g/L) | 90.0 | 90.0 |
| Sodium Citrate (g/L) | 6.0 | . |
| EDTA (g/L) | 1.5 | . |
| Sodium Bicarbonate (g/L) | 1.5 | . |
| Potassium Chloride (g/L) | 0.8 | . |
| Gentamycin Sulphate (g/L) | 0.2 | . |
| ACP® - 104 (g/L) | . | 10.0 |
| DMSO (mL/L) | 100 | 100 |
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