Teste de tetrazólio para <i>Pinus taeda</i>: preparo, coloração e classes de viabilidade das sementes

O objetivo deste trabalho foi avaliar métodos de preparo e coloração usados no teste de tetrazólio para sementes de Pinus taeda, com definição de classes de viabilidade. Foram realizados os procedimentos descritos nas regras para análise de sementes no Brasil e na Association of Official Seed Analysts, além de um método alternativo para o teste de tetrazólio. Para cada procedimento, foram utilizadas diferentes combinações de cortes da semente, concentrações do sal de tetrazólio e tempo de exposição. O teste conduzido com o procedimento alternativo (corte longitudinal adjacente ao embrião e coloração somente da metade que contém o embrião) apresenta a maior praticidade. Os resultados obtidos permitiram classificar as sementes em duas classes de viabilidade (viável e não viável), e 0,2% de sal de tetrazólio por 4 horas é a combinação mais eficiente.

Termos para indexação:
germinação; Pinaceae; qualidade fisiológica

Autoria

Felipe Serrato dos Santos ^**Corresponding author: felipeserrato@hotmail.com

Universidade Federal do Paraná, Departamento de Fitotecnia e Fitossanitarismo, Rua dos Funcionários, no 1.540, Juvevê, CEP 80035-050 Curitiba, PR, Brazil. E-mail: felipeserrato@hotmail.com, maristela@ufpr.brUniversidade Federal do ParanáBrazilCuritiba, PR, Brazil Universidade Federal do Paraná, Departamento de Fitotecnia e Fitossanitarismo, Rua dos Funcionários, no 1.540, Juvevê, CEP 80035-050 Curitiba, PR, Brazil. E-mail: felipeserrato@hotmail.com, maristela@ufpr.br

http://orcid.org/0000-0003-0801-0329

Elisa Serra Negra Vieira

Embrapa Florestas, Estrada da Ribeira, Km 111, Guaraituba, Caixa Postal 319, CEP 83411-000 Colombo, PR, Brazil. E-mail: elisa.vieira@embrapa.brEmbrapa FlorestasBrazilColombo, PR, Brazil Embrapa Florestas, Estrada da Ribeira, Km 111, Guaraituba, Caixa Postal 319, CEP 83411-000 Colombo, PR, Brazil. E-mail: elisa.vieira@embrapa.br

http://orcid.org/0000-0002-0799-7654

Maristela Panobianco

http://orcid.org/0000-0002-9990-2172

*Corresponding author: felipeserrato@hotmail.com

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Figuras | Tabelas

Figuras (2)
Tabelas (1)

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Figure 1.
Types of cuts performed on Pinus taeda seeds: A and B, transversal cut at the distance of one third from the endosperm distal end; C, longitudinal cut through the endosperm to expose the embryo; D, longitudinal cut adjacent to the embryo, keeping the two halves of the seed together; and E, longitudinal cut adjacent to the embryo, separating half of the seed containing the embryo.

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Figure 2.
Classes of viable Pinus taeda seeds, showing: A, intense red color in the endosperm and embryo; B, carmine red color along the endosperm and embryo; C, carmine red color with a less intense tonality; D, light-red color with transparent spots on the endosperm, not affecting the embryo; E, light-red endosperm and embryo with flaccid tissue; and F, carmine red embryo with small light-red spots on the embryonic axis. Classes of nonviable seeds, showing: G, endosperm and embryo with whitish color; H, seeds that did not color after the process of exposure to tetrazolium salt; I, most of the embryonic axis uncolored and with small colored spots; J, red spots on the endosperm and hypocotyl region; K, uncolored cotyledons; and L, uncolored radicle tip.

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Table 1.
Viability of Pinus taeda seeds when subjected to the germination test and to the tetrazolium test with different combinations of methodologies⁽¹⁾.

Figure 1. Types of cuts performed on Pinus taeda seeds: A and B, transversal cut at the distance of one third from the endosperm distal end; C, longitudinal cut through the endosperm to expose the embryo; D, longitudinal cut adjacent to the embryo, keeping the two halves of the seed together; and E, longitudinal cut adjacent to the embryo, separating half of the seed containing the embryo.

Figure 2. Classes of viable Pinus taeda seeds, showing: A, intense red color in the endosperm and embryo; B, carmine red color along the endosperm and embryo; C, carmine red color with a less intense tonality; D, light-red color with transparent spots on the endosperm, not affecting the embryo; E, light-red endosperm and embryo with flaccid tissue; and F, carmine red embryo with small light-red spots on the embryonic axis. Classes of nonviable seeds, showing: G, endosperm and embryo with whitish color; H, seeds that did not color after the process of exposure to tetrazolium salt; I, most of the embryonic axis uncolored and with small colored spots; J, red spots on the endosperm and hypocotyl region; K, uncolored cotyledons; and L, uncolored radicle tip.

Table 1. Viability of Pinus taeda seeds when subjected to the germination test and to the tetrazolium test with different combinations of methodologies⁽¹⁾.

Assessment		Viability (%)
Germination test		77a
Tetrazolium test
	Procedure/cut/concentration/exposure period/temperature
	Alternative/longitudinal cut discarding one of the halves/0.2%/4 hours/35°C	74a
	Alternative/longitudinal cut discarding one of the halves/1.0%/4 hours/35°C	74a
	Baalbaki et al. (2009)BAALBAKI, R.; ELIAS, S.; MARCOS-FILHO, J.; MCDONALD, M.B. (Ed.). Seed vigor testing handbook. Ithaca: Association of Official Seed Analysts, 2009. 341p. (AOSA. Contribution, 32). /longitudinal cut keeping the two halves together/1.0%/4 hours/35°C	80a
	Alternative/longitudinal cut discarding one of the halves/0.5%/6 hours/35°C	73a
	Alternative/longitudinal cut discarding one of the halves/1.0%/6 hours/35°C	73a
	Brasil (2009)BRASIL. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Regras para análise de sementes. Brasília, 2009. 395p./transversal and longitudinal cuts/1.0%/18 hours/30°C	72a
	Alternative/longitudinal cut discarding one of the halves/1.0%/2 hours/35°C	69b
	Alternative/longitudinal cut discarding one of the halves/0.5%/4 hours/35°C	68b
	Alternative/longitudinal cut discarding one of the halves/0.2%/6 hours/35°C	67b
	Alternative/longitudinal cut discarding one of the halves/0.2%/2 hours/35°C	63c
	Alternative/longitudinal cut discarding one of the halves/0.5%/2 hours/35°C	57c
Coefficient of variation (%)		6.10

⁽¹⁾
Means followed by equal letters do not differ by the Scott-Knott test, at 1% probability.

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[1] *Corresponding author: felipeserrato@hotmail.com