Determinação do teor de princípios ativos em matérias-primas vegetais

Determination of active principles in vegetable raw materials

ARTIGO

Determinação do teor de princípios ativos em matérias-primas vegetais

Determination of active principles in vegetable raw materials

Maria Teresa F. BaraI,II,^*; Paula A.M. Ribeiro^I; Maria do Carmo B. Arantes^I; Luci Ley S.S. Amorim^I; José Realino de Paula^I,II

^ILaboratório de Farmacognosia, Faculdade de Farmácia, Universidade Federal de Goiás, Caixa Postal 131, 74605-220, Goiânia, GO, Brasil

^IILaboratório de Controle de Qualidade de Medicamentos, Faculdade de Farmácia, Universidade Federal de Goiás, Caixa Postal 131, 74605-220, Goiânia, GO, Brasil

RESUMO

Castanha-da-índia (Aesculus hippocastanum L.), hipérico (Hypericum perforatum L.), guaraná (Paullinia cupana H.B.K.) e ginkgo (Ginkgo biloba L.) fazem parte de formulações de medicamentos fitoterápicos muito comercializados no Brasil. Neste trabalho foi avaliada a qualidade de amostras de pós e extratos destas plantas. Para a determinação do teor de princípios ativos foram aplicados métodos farmacopéicos ou citados na literatura científica e os resultados demonstraram serem adequados para a análise destes produtos farmacêuticos. Verificou-se que 60% das amostras analisadas de guaraná e ginkgo estavam em desacordo com as especificações farmacopéicas ou as declaradas pelos laudos dos fabricantes, em relação ao teor de princípios ativos. Além disso, 100% e 20%, respectivamente, das amostras de hipérico e de castanha-da-índia apresentaram teores abaixo das especificações. Os dados obtidos mostraram ser de grande importância e necessidade a implementação de técnicas quantitativas no controle de qualidade físico-químico de matérias-primas vegetais.

Unitermos: Controle de qualidade, planta medicinal, fitoterápico, Aesculus hippocastanum, Ginkgo biloba, Hypericum perforatum, Paullinia cupana.

ABSTRACT

Pharmaceutical preparations containing Aesculus hippocastanum L., Hypericum perforatum L., Paullinia cupana H.B.K. and Ginkgo biloba L. have large market. In this work the quality of the powder or extracts of these plants were evaluated. Pharmacopoeia methods or those cited on cientific literature for quantification of active substances were employed and the data showed them to be adequate for these analyses. The analytical results demonstrated that 60% of the samples of P. cupana and G. biloba, and 100% and 20%, respectively of samples of H. perforatum and A. hippocastanum were not in agreement with the specifications. This analysis showed to be valuable for herbal medicines quality control.

Keywords: Quality control, medicinal plants, phytomedicine, Aesculus hippocastanum, Ginkgo biloba, Hypericum perforatum, Paullinia cupana.

INTRODUÇÃO

A garantia do uso seguro e eficaz de fitoterápicos envolve análises físico-químicas e microbiológicas de matérias-primas e do produto acabado, como etapa preliminar para alcançar um padrão de qualidade necessário a um medicamento. Embora diversos estudos tenham demonstrado a necessidade de garantir segurança aos produtos de origem vegetal (Bauer; Tittel, 1996; Brandão et al., 2002; Choi et al., 2002; Bast et al., 2002; Melo et al., 2004), a aplicação e a validação de métodos analíticos para matérias-primas a base de plantas ainda são escassos na literatura (Sticher, 1993; Van Beek; Wintermans, 2001; Wang; Yao; Zeng, 2003; Bara; Cirilo; Oliveira, 2004; Mousinho; Oliveira, 1986).

Plantas como castanha-da-índia, hipérico, guaraná e ginkgo constituem a matéria-prima presente em diversas especialidades farmacêuticas, bem como em formulações magistrais produzidas nas farmácias com manipulação. Embora sejam plantas empregadas tradicionalmente na fitoterapia, seu uso requer critérios, uma vez que apresentam contra-indicações e podem levar a reações adversas severas (Schulz; Hansel; Tyler, 2002; Newall; Anderson; Phillipson, 2002; Desai; Grossberg, 2003; Cordeiro; Chung; Sacramento, 2005).

A Anvisa, por meio da Resolução RDC 89/2004 (Brasil, 2004), publicou uma lista de fitoterápicos de registro simplificado e buscou estabelecer a padronização de marcadores químicos para diversas plantas e limite diário para seu uso. Entende-se esta preocupação como etapa fundamental para assegurar o uso e garantir eficácia ao fitoterápico. Buscando atuar neste contexto, a necessidade de determinar o teor de princípios ativos em matérias-primas vegetais motivou a realização deste trabalho. Procedimentos de controle de qualidade de plantas medicinais devem ser realizados e envolvem, numa primeira etapa, análises macroscópicas e microscópicas que visam a identificação e análise do grau de pureza das mesmas (Choi et al, 2002). Acredita-se, entretanto, que por meio de análises quantitativas como etapa obrigatória na avaliação dos produtos vegetais pode-se alcançar a qualidade farmacêutica dos fitoterápicos.

MATERIAL E MÉTODOS

Produtos analisados

Este estudo foi realizado no Laboratório de Controle de Qualidade da Faculdade de Farmácia da UFG.

Foram enviadas para análises 10 amostras do pó de castanha-da-índia (Aesculus hippocastanum L.); 15 amostras de guaraná em pó (Paullinia cupana H.B.K.); 5 extratos secos de hipérico (Hypericum perforatum L.); 25 extratos secos padronizados de Ginkgo biloba L. - Egb761 - adquiridos pelos solicitantes das análises de diversos fornecedores e compondo diferentes lotes. Neste estudo, totalizou-se 55 amostras analisadas de matérias-primas.

As amostras encontram-se descritas neste trabalho por números e os diferentes fornecedores por letras distintas. Análises de um mesmo lote de produção podem ter sido realizadas mais de uma vez, para atender a demanda dos solicitantes.

Condições experimentais

As análises de castanha-da-índia e guaraná foram realizadas de acordo com Farmacopéia Brasileira IV edição (2004). Hipérico foi analisado de acordo com European Pharmacopoea (Suppl. 2001). Utilizou-se espectrofotômetro UV/vis Varian, modelo Cary 50 Bio para o desenvolvimento das técnicas analíticas. As análises de ginkgo foram realizadas de acordo com Bara; Cirilo; Oliveira (2004). Utilizou-se cromatógrafo líquido Varian, modelo ProStar, acoplado com detector UV, modelo ProStar (Varian), software Varian Star Workstation versão 5.0 para registrar os cromatogramas e medir as áreas dos picos. A separação dos ginkgoflavonóides foi executada usando uma coluna Microsorb-MV 100 C₁₈ (250 mm x 4,6 mm x 5 mm). As análises foram realizadas em duplicata.

RESULTADOS

Os resultados das análises das 55 amostras de matérias-primas selecionadas para este trabalho são apresentados nas tabelas 1 a 4. Os resultados globais obtidos no estudo estão representados na Figura 1.

DISCUSSÃO

A análise do teor dos principais componentes biologicamente ativos em matérias-primas de origem vegetal e de fitoterápicos é uma etapa essencial para a segurança e eficácia de sua utilização na elaboração de produtos farmacêuticos. A quantificação de substâncias ativas em fitoterápicos ainda é realizada de forma incipiente e a presença de um fitocomplexo ativo nas plantas e seus extratos dificulta a análise (Williamson, 2001). Além disso, a disponibilidade de um número reduzido de substâncias químicas de referência para comparação com matérias-primas vegetais contribui para esta situação.

Na análise das matérias-primas selecionadas para este trabalho pode-se verificar que 56,36% das amostras estavam em desacordo com as especificações farmacopéicas ou declaradas no laudo dos fornecedores. Dentre as amostras, pode-se verificar que 100% dos extratos secos de hipérico apresentaram valores abaixo das especificações dos fornecedores, o que permite questionar se a padronização destes extratos não deveria ser feita com concentrações menores de hipericina. Além disso, pode-se sugerir que, particularmente, dentre os extratos de hipérico e ginkgo analisados e que estavam em desacordo com as especificações, deveria-se investigar a umidade dos mesmos, o que poderia está sendo responsável pelo teor abaixo das especificações. Considerou-se o valor para teor de umidade declarado no laudo do fornecedor das matérias-primas para a realização das análises. Deve-se ressaltar que o emprego de extratos secos nas formulações farmacêuticas apresenta vantagens em relação ao uso da planta em pó, tais como uma maior concentração de princípios ativos, a possibilidade de padronização do conteúdo de princípios ativos e menor contaminação microbiana. O uso de extratos padronizados centrados em grupos específicos de princípios ativos visando garantir a homogeneidade química do produto lote a lote, pode contribuir para melhoria da qualidade das matérias-primas vegetais e conseqüentemente dos medicamentos assim elaborado (Bauer, 1998; Calixto, 2000; Capasso et al., 2000). Entretanto, apresenta como desvantagem de uso o fato de serem muito higroscópicos e possuírem maior valor comercial (Crippa, 1978; Petrovick; Ortega; Bassani, 1997).

Dentre as análises realizadas, uma amostra de ginkgo levou a um resultado bastante preocupante, apresentando teor de flavonóides de 0,62%, confirmado em ensaio com 4 repetições. Este resultado permitiu questionar ser a amostra pó de ginkgo, embora o laudo do fornecedor constasse ser extrato padronizado a 24%. Deve-se ressaltar que o pó de ginkgo não tem equivalência farmacêutica com o extrato EGb761, e portanto não pode ser substituído aleatoriamente, além de possuir elevado conteúdo de ácido gincólico (Simões; Farias, 2002).

Em relação ao guaraná em pó, adotou-se como especificação para o teor de metilxantinas calculadas como cafeína, os parâmetros da Farmacopéia Brasileira IV edição, 5º fascículo (2004), cujo valor é de no mínimo 5%. Pode-se observar que todos os laudos dos fornecedores utilizavam as especificações para cafeína baseados na IIIª edição da Farmacopéia Brasileira (1977), que emprega o método gravimétrico e o limite para este princípio ativo é menor (3,5 %), fato que pode justificar em parte o índice de reprovação encontrado. Neste trabalho, optou-se por investigar apenas o teor de cafeína no guaraná em pó, não sendo executada a determinação de polifenóis conforme preconizado pela Farmacopéia Brasileira IV edição (2004).

Castanha-da-índia foi a matéria-prima que apresentou maior aceitação nas análises realizadas para quantificação de saponinas triterpênicas calculadas como escina, ou seja, apenas 20% das mesmas estavam com teor abaixo do especificação farmacopéica.

Os resultados obtidos neste estudo reafirmam a necessidade de validar fornecedores de matérias-primas vegetais e também demonstram que empresas farmacêuticas que adquiram estes produtos devam ter maior critério para o uso das mesmas, armazenando-as e manipulando-as de forma adequada e realizando o controle de qualidade das mesmas. O uso de matérias-primas com teor abaixo das especificações acarretam na produção de lotes de medicamentos sem uniformidade química, podendo levar ao uso de sub-dosagem de fitoativos na formulação farmacêutica, o que por sua vez contribuiria para a não eficiência do fitoterápico. Portanto, é importante enfatizar a necessidade de realização de análises para determinação do teor de princípios ativos em matérias-primas vegetais, associadas a análises de identidade e pureza de plantas. Desta forma pode-se buscar uma padronização de fitoterápicos produzidos e conseqüentemente, contribuir para assegurar eficácia ao seu uso.

Recebido em 14/06/05.

Aceito em 07/05/06

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  08 Fev 2008
• Data do Fascículo
  Jun 2006

Histórico

• Recebido
  14 Jun 2005
• Aceito
  07 Maio 2006