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Avaliação dos efeitos do óxido nítrico no desenvolvimento de embriões de camundongos in vitro e in vivo

Evaluation of nitric oxide effects on embryo development in mice in vivo and in vitro

RESUMO DE TESE

Avaliação dos efeitos do óxido nítrico no desenvolvimento de embriões de camundongos in vitro e in vivo

Evaluation of nitric oxide effects on embryo development in mice in vivo and in vitro

Autor: Roberto Pimenta Barroso

Orientador: Prof. Dr. João Lúcio dos Santos Júnior

Dissertação de Mestrado apresentada ao curso de Pós-Graduação da Faculdade de Medicina da Universidade Federal de Minas Gerais - UFMG, Área de concentração: Ginecologia e Obstetrícia, para a obtenção do título de Mestre, em 8 de julho de 2005

OBJETIVO: avaliar os efeitos do óxido nítrico (ON) no desenvolvimento de embriões in vitro e na implantação de embriões in vivo em camundongos.

MÉTODOS: embriões de camundongos foram incubados em meio contendo diferentes concentrações de dietilenotriamina/óxido nítrico (DETA/ON), um doador de óxido nítrico. A especificidade dos efeitos do ON foram avaliadas usando-se dietilenotriamina (DETA) sem óxido nítrico ou dietilenotriamina/óxido nítrico previamente incubado por 48 horas. No estudo in vivo, os camundongos foram infundidos continuamente, por via subcutânea (após terem sido acasalados), com várias concentrações de DETA/ON ou DETA, através de minibombas osmóticas (começando no primeiro dia de prenhez) e a avaliação da implantação no útero foi avaliada no dia 6.

RESULTADOS: os resultados mostraram que nenhum dos embriões desenvolveu-se além do estágio de quatro células quando expostos a 0,1 ou 1,0 mM de DETA/ON, comparado com 94,5% no grupo-controle cujos embriões desenvolveram além do estágio de mórula no dia 4. O desenvolvimento embrionário não foi afetado com baixas concentrações (0,001 e 0,01mM) de dietilenotriamina/óxido nítrico, com dietilenotriamina/óxido nítrico pré-incubado por 48 horas ou dietilenotriamina puro. No estudo in vivo, a infusão de dietilenotriamina/óxido nítrico em camundongos fêmeas causou a inibição da implantação embrionária, de maneira dose-dependente. Não foram observados sítios de implantação em animais infundidos com a dose diária de 20mmoles de dietilenotriamina/óxido nítrico, enquanto nos tratados com dietilenotriamina e controle, a taxa de implantação foi de 81,8%.

CONCLUSÃO: este estudo demonstrou que ON inibe o desenvolvimento embrionário in vitro e a implantação in vivo, em camundongos, de maneira dose-dependente.

Palavras-chave: Óxido nítrico; Desenvolvimento embrionário; Camundongos; Implantação

OBJECTIVE: To evaluate the effect of nitric oxide on embryo development in vitro and on implantation of embryos in vivo in mice.

MATERIALS AND METHODS: Mouse embryos were incubated in media containing different concentrations of diethylenetriamine/NO (DETA/NO), a nitric oxide donor. The cleavage and development was monitored daily for 4 days. Specificity of NO effects was assessed by using diethylenetriamine (DETA) without NO or 48 h preincubated DETA/NO. In in vivo studies, mated mice were continuously infused, subcutaneously, with various concentrations of DETA/NO or DETA through mini-osmotic pumps (from day 1 of pregnancy), and implantation sites in the uterus were assessed on day 6.

RESULTS: None of the embryos progressed beyond 4-cell stage when exposed to 0.1 or 1.0 mM DETA/NO compared with 94.5% of control embryos that developed beyond the morula stage by day 4. Embryo development was unaffected by lower (0.001 and 0.01 mM) concentrations of DETA/NO, 48 h preincubated DETA/NO, or DETA only. In in vivo study, infusion of DETA/NO to mice caused inhibition of embryo implantation in a dose-dependent manner. No implantation sites were observed in mice infused with a daily dose of 20 mmol DETA/NO rate, compared with an implantation rate of 81.8% in control or DETA-treated mice.

CONCLUSION: This study demonstrates that NO inhibits the embryo development in vitro and implantation in vivo in an dose-dependent manner.

Keywords: Nitric Oxide; Embryo development; Mouse; Implantation

Datas de Publicação

  • Publicação nesta coleção
    10 Abr 2006
  • Data do Fascículo
    Nov 2005
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