Resumo em Português:

A doença hemolítica perinatal (DHPN) ainda é um problema clínico. Nenhum teste isolado prediz, com segurança, a gravidade do quadro hemolítico. O objetivo do presente estudo foi determinar as subclasses de anticorpos IgG1 e IgG3 por citometria de fluxo no soro de 42 gestantes isoimunizadas e correlacionar os dados obtidos com a gravidade da DHPN. A distribuição dos fetos ou neonatos segundo a gravidade do quadro hemolítico evidenciou 13 casos com doença leve, 16 casos com doença moderada e 13 com doença grave. As subclasses foram detectadas em 33/42 (79%) amostras. A subclasse IgG1, isoladamente, foi evidenciada em 14/33 (42,4%) casos. Na relação entre gravidade da doença e subclasses de IgG, observou-se que IgG1 isolada foi encontrada em todos os grupos, e os valores da mediana de intensidade de fluorescência (MIF) foram significativamente mais altos nas formas mais graves da DHPN (p<0,01). Contrariamente, os valores da MIF para IgG3 se apresentaram mais homogêneos em todas as categorias (p=0,11). A presença de IgG3 parece, portanto, estar mais associada à hemólise leve. A associação das subclasses IgG1 e IgG3 está relacionada à situação clínica mais grave, o que se deve, possivelmente, à presença de IgG1 associada. Apesar dos altos valores para IgG1 e a associação de IgG1 com IgG3 indicarem maior gravidade da DHPN, sugere-se que outras variáveis sejam analisadas conjuntamente, uma vez que os relatos existentes na literatura, até o momento, não dão suporte para seu uso como instrumento exclusivo de avaliação de gravidade e prognóstico da doença.

Resumo em Inglês:

The hemolytic disease of the newborn (HDN) continues to be a clinical problem in spite of prophylaxis. To date, none of the available tests, developed to predict the severity of HDN, has provided complete reliability. The objective of the present study was to determine the IgG1 and IgG3 subclasses in 42 isoimmunized pregnant women, and to correlate them with clinical severity of hemolytic disease. The IgG subclasses were determined employing flow cytometry. According to the clinical severity of HDN, fetuses and newborn babies were classified as 13 mild, 16 moderate and 13 severe cases. The IgG subclasses were detected in 33 of the 42 pregnant women. Of these, IgG1 was predominant in 72.7% of the cases; either isolated (42.4%) or in association with IgG3 (30.3%). IgG1 was present in all the three clinical severity categories, however, its values were significantly higher in cases with greater clinical severity of HDN (p<0.01). On the other hand, the distribution of IgG3 values within each group was not statistically significant (p=0.11). IgG3 seems to be more associated with the mild hemolytic form of the disease, whereas the association of IgG1 and IgG3 suggested a clinically more severe form of HDN. It is possible, however, that the severity in these cases is related to the presence of IgG1. These results suggest that IgG1 and IgG3 isotypes should be included in multi-parametric protocols for the evaluation of clinical severity of HDN, as International literature does not give support to the use of IgG subclass determination alone as a reliable indicator to predict severity or prognosis of the disease.

Resumo em Português:

Os flavonóides representam um dos grupos fenólicos mais importantes e diversificados entre os produtos de origem natural. Dentre os compostos fenólicos temos os derivados flavânicos (flavan-3-óis e flavan-3,4-dióis) que podem se polimerizar originando taninos. O representante mais importante do grupo dos flavan-3-óis é a catequina. Estes compostos exibem inúmeros efeitos biológicos incluindo ação antiviral, antioxidante e antitrombótica. No presente trabalho foi avaliado o efeito das catequinas (catequina e epicatequina) sobre a função plaquetária. Foram estudados vinte indivíduos adultos, clinicamente saudáveis. A agregação plaquetária foi avaliada em plasma rico em plaquetas (PRP) e plaquetas lavadas utilizando-se agonistas colágeno (2,0 µg/ml) e trombina (0,25U/ml), respectivamente. Como controle utilizou-se o veículo da droga (DMSO 0.2%). O pré-tratamento das plaquetas com epicatequina (200 µg/ml) causou inibição significativa da agregação para o colágeno (9.0 ± 7.8%) e para a trombina (10.0 ± 2.2) em relação aos respectivos controles (70.0 ± 7.8) e (68.0 ± 5.0), ( p<0.001; Student t-test). Por outro lado, a catequina não promoveu inibição da resposta de agregação. Conclui-se que a epicatequina apresenta potencial antiagregante.

Resumo em Inglês:

The use of hemo-derivatives is nowadays a fundamentally important therapeutic modality in the exercise of medicine. Among the various hemo-components employed, we have the platelet concentrate (PC), indicated in cases of hemorrhagic disturbances. We previously showed that platelet function in blood donors is reduced in their screening phase and after the separation process of PCs. Currently, we are providing evidence for the existence of biochemical and functional changes in PC preparations stored for three days at temperatures of 20 ± 2 ºC. Platelet concentrates from 40 healthy donors, collected in CPD anticoagulant and PL-146 polyvinylchloride containers, were examined in order to determine the pH value, pCO2 ,pO2 and lactate concentrations. In addition, the aggregation of platelets with thrombin and collagen were examined to evaluate platelet function. A pH increase from 7.07 ± 0.04 to 7.36 ± 0.07 (p < 0.01) was observed. The pCO2 concentration decreased progressively from 69.2 ± 7.7 mmHg to 28.8 ± 6.2 mmHg (p < 0.001) during the storage period. In contrast, pO2 value increase from 103.4 ± 30.6 to 152.3 ± 24.6 mmHg (p < 0.001) was evidenced during the 48 hours of storage. The lactate concentration increased from 17.97 ± 5.2 to 57.21 ± 5.7 mg/dl (p < 0.001). Platelet aggregation using 0.25 U/ml-thrombin and 2.0 µg/ml-collagen showed significant hypofunction from 61.8 ± 2.7% to 24.8 ± 9.8% and 62.7±5.0 to 33.4± 6.2 (p < 0.001), respectively. We concluded that the evaluated biochemical parameters and the platelet function changed significantly when the platelets were kept under routine storage conditions.

Resumo em Português:

As alterações imunitárias que ocorrem durante a gravidez são ainda pouco compreendidas. Para determinar a influência da gravidez na atividade fagocitária do sistema mononuclear fagocitário (SMF) foram utilizadas vinte ratas adultas. Os animais foram divididos em dois grupos (n-10): Grupo 1 - controle, Grupo 2 - ratas prenhas. A função do sistema mononuclear fagocitário foi determinada pela captação de enxofre coloidal marcado com 99mTc pelos órgãos do SMF, além de avaliar a permanência do radiofármaco em coágulo sangüíneo. O peso e a radiação de cada amostra foram medidas. Realizou-se também análise histológica desses órgãos. Os resultados foram comparados pelo teste t de Student. Em todos os animais, a captação do radiofármaco foi maior no fígado, seguido pelo baço e pulmão. O coágulo sangüíneo apresentou uma quantidade mínima de radiação. As ratas grávidas registraram menor captação do colóide no fígado e maior captação no pulmão em relação ao grupo controle. Não foram evidenciadas alterações na histoarquitetura desses órgãos. Em rata grávida, a atividade fagocitária do SMF diminuiu no fígado, porém aumentou no pulmão.

Resumo em Inglês:

Alterations of the immune function during the pregnancy are not well understood. To assess the influence of pregnancy on the phagocytic function of the reticuloendothelial system twenty adult female rats were divided into two groups: Group 1 (n=10) - control, Group 2 (n=10) - pregnant rats. The assessment of the phagocytic function of the reticuloendothelial system was by the uptake of sulphur colloid labeled with Tc99m by the reticuloendothelial system organs as well as to assess the permanence of the radio isotope in blood clots. The weights and radioactive levels of the samples were measured. Histologic analyses of these organs were performed as well. The results were compared using the Student t-test, with significance at p<0.05. The scintigraphic values were higher in the liver followed by spleen and lung. The blood clot presented with only a low amount of radiation. The pregnant rats registered lower radiation levels in the liver and higher in the lung when compared with the control group. The histo-architecture of the studied organs did not show any alterations. Pregnancy reduces the phagocytic function of the liver but increases the role of the reticuloendothelial system function of the lung.

Resumo em Português:

O objetivo do presente estudo foi avaliar a prevalência da deficiência da proteína S em pacientes com trombose venosa profunda e a interferência do anticoagulante oral durante a investigação. Foram avaliados aleatoriamente 87 pacientes, sendo 47 do sexo feminino e 40 do sexo masculino, com idades entre 17 e 56 anos e média de 36,3 anos, que apresentaram trombose venosa profunda (TVP) de membros inferiores. O diagnóstico da TVP foi feito com dúplex e confirmado pela flebografia nos casos de dúvidas. A mensuração da proteína S foi realizada pelo método coagulométrico, avaliando atividade biológica. Os exames foram colhidos um mês após a remoção da anticoagulação oral em todos os pacientes. Em trinta deles foram colhidos também durante a anticoagulação. Em 6,9% dos pacientes foi confirmada, em duas mesurações, a deficiência da proteína S. Na avaliação durante a anticoagulação, os trinta pacientes apresentaram redução dos níveis dessa proteína. Concluímos que a deficiência da proteína S em nosso estudo foi semelhante ao observado na literatura, sendo que a sua investigação mais confiável deve ser realizada após a suspensão do anticoagulante oral.

Resumo em Inglês:

The primary objective of this study was to evaluate the prevalence of Protein S deficiency in patients suffering from deep venous thrombosis. As a secondary objective the interference of oral anticoagulation during treatment was studied. Forty-seven female and 40 male patients with ages ranging from 17 to 56 and a mean age of 36.6 years, who presented with deep venous thrombosis of the lower limbs, were studied. Diagnosis of deep venous thrombosis was made using a duplex doppler scan and in cases of doubt the results were confirmed by phlebology. Measurement of the protein S concentrations was performed by the coagulometric method, that is, by evaluating the biological activity. The blood samples were collected one month after the suspension of oral anticoagulation treatment in all patients. In thirty patients blood samples were also taken during anticoagulation treatment. A total of 6.9% of the patients were confirmed, with two consecutive measurements, as having protein S deficiency. The evaluations of the 30 patients during treatment all demonstrated a reduction in the concentrations of this protein. We concluded that the prevalence of protein S deficiency in our study was similar to the prevalence observed in other publications. We also saw that the most reliable time to investigate protein S levels is after the suspension of oral anticoagulant treatment.

Resumo em Português:

A hemoglobina fetal - Hb F, formada por duas cadeias gama e duas cadeias alfa, é característica do período fetal do desenvolvimento, tendo sua síntese diminuída no período pós-natal. Em algumas alterações hereditárias, a Hb F permanece aumentada, como nas delta-beta talassemia, beta talassemia e persistência hereditária de Hb F (PHHF). A síntese da globina gama também pode ser estimulada por fatores externos como leucemias, transplantes de medula óssea, induções químicas, dentre outros. Através da observação de Hb F aumentada em doadores de sangue por procedimentos eletroforéticos objetivou-se avaliar a quantidade de Hb F em amostras de sangue de candidatos à doação, visando estabelecer seus limites de normalidade na população de São José do Rio Preto e região, por meio de desnaturação alcalina e cromatografia líquida de alta pressão (HPLC), comparar as metodologias aplicadas e, nos indivíduos com Hb F aumentada, realizar estudos moleculares para identificar as mutações que alteram a expressão dos genes gama. Foram analisadas 208 amostras de sangue, sendo 119 de candidatos à doação e 89 de indivíduos sem sintomas de anemia ou achados hematológicos e com Hb F aumentada como grupo comparativo. Das 119 amostras de candidatos à doação, 110 foram utilizadas para traçar o perfil de normalidade de Hb F, comparando-se as metodologias de desnaturação alcalina e HPLC, onde se obteve a média de 1,48% e de 0,6%, respectivamente. A análise estatística por regressão linear mostrou diferença significativa na comparação entre as duas metodologias aplicadas, sendo a HPLC mais precisa para a quantificação de Hb F. Foram observados nos testes de rastreamento de hemoglobinas anormais nestas 110 amostras de sangue: 16,4% de alfa talassemia, 0,9% com Hb F aumentada, 0,9% com beta talassemia e 0,9% com hemoglobina variante de cadeia delta. Os outros nove doadores de sangue apresentaram Hb F acima de 10% em eletroforese e observou-se média de 32,28% para desnaturação alcalina e de 26,4% para HPLC. As análises moleculares por PCR-ASO foram realizadas na tentativa de se identificar um defeito genético que pudesse explicar o aumento de Hb F, pelo rastreamento de 16 mutações que originam talassemias do tipo beta. Encontraram-se 5,3% de heterozigotos para mutação CD6-A e 1,75% para as mutações CD 39, IVS1:6, -87 e IVS2:654, todas em heterozigose. Os resultados encontrados neste estudo evidenciam a necessidade de melhor caracterização dos perfis de hemoglobina obtidos pelos métodos clássicos e a importância de sua caracterização molecular.

Resumo em Inglês:

The fetal hemoglobin, Hb F, formed by two alpha and two gamma globin chains, is characteristic of the fetal development period and has diminished synthesis in the post-natal period. In some hereditary alterations Hb F remains elevated, as in delta-beta thalassemia, beta thalassemia and hereditary persistence of Hb F (HPFH). The synthesis of gamma globin can also be stimulated by external factors including leukemia, blood marrow transplantation and chemical induction, amongst others. Through the observation of elevated levels of Hb F in blood samples using electrophoretic procedures, we aimed at evaluating the amount of Hb F in blood donor samples in order to establish limits of normality in the population from São José do Rio Preto and region. Also using alkaline denaturation and high-pressure liquid chromatography (HPLC), we compared the applied methodologies and, in individuals with increased Hb F, we used molecular studies to identify mutations that modify the gamma globin gene expression. Blood samples from 119 donation candidates and, as a control group, 89 from individuals without symptoms of anemia or hematological findings and with increased Hb F, were analyzed. Of these 119 samples from blood donation candidates, 110 were used to trace the profile of normal Hb F, comparing the applied measurement methodologies, giving an average of 1.48% for alkaline denaturation and 0.6%, for HPLC. Statistical analysis using linear regression showed a significant difference between the two applied methodologies. HPLC was the best method to measure Hb F. In the 110 blood samples that were evaluated in the screening tests for abnormal hemoglobins 16.4% presented with alpha thalassemia, 0.9% with increased Hb F, 0.9% with beta thalassemia and 0.9% with a hemoglobin variant of the delta globin chain. The other nine blood donors presented with Hb F levels above 10% in electrophoresis with an average of 32.28% observed in alkaline denaturation and 26.4% in HPLC. Molecular analysis by PCR-ASO was carried out, screening the 16 mutations that give rise to beta-type thalassemia, in an attempt to identify a genetic defect that could explain the increase of Hb F. We found 5.3% of heterozygotes with the CD 6-A mutation and 1.75% with the CD 39, IVS1:6, -87 and IVS2:654 mutations. The results in this study suggested a necessity of better characterization of the hemoglobin profiles obtained by the classic methods and the importance of its molecular characterization.

Resumo em Português:

Portadores da Síndrome de Down estão sob estresse oxidativo endógeno e crônico que pode ser resultado do excesso de atividade da SOD-1. Este trabalho descreve alguns indicadores e adaptações das defesas frente aos danos oxidativos. Observamos que, nas pessoas com Síndrome de Down, a presença de estresse oxidativo (aumento de 48% na atividade da SOD-1) induziu várias adaptações no metabolismo eritrocitário, sendo que a redução da meta-hemoglobina, via aumento da atividade da meta-hemoglobina redutase (29%), garantiria a eficiência do transporte de oxigênio, enquanto o aumento da GSH (61%) propiciaria a integridade funcional do eritrócito. A diminuição dos valores de concentração de hemoglobina e hematócrito, possivelmente, resulta do aumento de atividade da enzima Glicose-6-fosfato desidrogenase e redução da meia-vida eritrocítica. Os efeitos destas adaptações sob a oxigenação do sangue merecem maiores investigações.

Resumo em Inglês:

Down's Syndrome carriers are under endogenous and chronic oxidative stress that can result from an excessive SOD-1enzyme activity. This work describes some indicators and adaptations of the defense system faced with oxidative damage. We observed that, in Down's Syndrome individuals, the presence of oxidative stress (with an increase of 48% in the SOD-1 activity) induced several adaptations of the erythrocyte metabolism, with a reduction of methemoglobin, through an increase of methemoglobin reductase activity (29%) which guaranteed the efficiency of oxygen transportation. The increase of GSH (61%) would propitiate the maintenance of the integrity of the membrane, essential to the functional integrity of erythrocytes. The decrease in the hemoglobin and hematocrit concentrations, possibly, results from the increase in the activity of the glucose-6-phosphate dehydrogenase enzyme, and a reduction in the half-life of erythrocytes. The effects of these adaptations on blood oxygenation require further investigations.

Resumo em Português:

Anemia Fanconi (AF) é uma síndrome autossômica recessiva, caracterizada por pancitopenia progressiva com hipoplasia de MO, em associação com várias anormalidades constitucionais, tendo como único recurso terapêutico com possibilidade potencial de cura o transplante de medula óssea, e sendo tais pacientes propensos ao desenvolvimento de malignidades hematológicas e carcinoma de células escamosas (CEC) em diversos locais: reto, vagina, cérvice, esôfago, cavidade bucal, faringe ou pele, mas especialmente em cabeça e pescoço. Relatamos aqui três casos de pacientes portadores de AF, que após TMO desenvolveram CEC em língua. Além disso, mencionamos fatores de risco relatados para tal evento, como diagnóstico de AF, condicionamento pré-transplante (quimioterápicos e irradiação), terapia com drogas imunossupressoras para tratamento de doença enxerto contra hospedeiro (DECH) aguda ou crônica, sexo e idade avançada. Além do que, discorremos sobre a existência de três mecanismos postulados que predispõem indivíduos com AF ao desenvolvimento de neoplasia: (1) defeito na reparação do DNA; (2) defeito na detoxificação de radicais de oxigênio; e (3) imunodeficiência.

Resumo em Inglês:

Fanconi's Anemia, first described in 1927, is a rare autonomic recessive disease characterized by progressive pancytopenia, congenital malformations, spontaneous or chemically induced chromosome breakage and increased incidence of leukemia and other cancers. The onset of bone marrow hypoplasia and its hematological manifestations is usually in the 3 - 7 year age range. The disease has traditionally been managed clinically through administration of blood products, treatment of infections and prolonged administration of androgens, growth factors and more recently with gene therapy. The value of bone marrow transplantation in correcting the hematological manifestations of Fanconi's anemia has been established. Alkilanting agents and radiation have been utilized as a conditioning regimen in bone marrow transplantation for Fanconi's anemia, but these patients are particularly hypersensitive to these agents and its toxicity is the main cause of mortality and morbidity. Bone marrow transplantation is at the moment the only therapeutic modality able to bring hematological cure. Fanconi's anemia patients are particularly susceptible to the development of hematological malignancies and squamous cell carcinoma in the epithelium of the rectum, vagina, cervix, esophagus, oral cavity, pharynx or skin in general but more frequently on the head and neck; probably not only because the basic cellular defect but also because of the conditioning regimen. We report on three cases of Fanconi's anemia patients developing squamous cell carcinoma of the tongue after bone marrow transplantation. Furthermore, there is mention of the risk factors linked in an event, such as the diagnosis of Fanconi's anemia, pre-transplant conditioning regimen that usually includes alkylating agents and irradiation; immunosuppressive prophylactic therapy for acute and chronic graft-versus-host-disease, gender and age. Additionally, we discussed the existence of three postulated mechanisms that make individuals with Fanconi's anemia susceptible to the development of neoplasias: (1) deficiency in the DNA repair system, (2) deficiency in oxygen radical detoxification; and (3) immunodeficiency.

Resumo em Português:

Artrite reumatóide é uma doença difusa do tecido conjuntivo que se caracteriza pelo acometimento articular e sistêmico. Disfunções hematológicas como anemia ocorrem em até 65% dos pacientes, sendo a anemia das doenças crônicas a forma mais comum. A anemia hemolítica auto-imune pode estar associada à difusa do tecido conjuntivo, sendo classicamente associada ao lúpus eritematoso sistêmico e fazendo parte dos seus critérios de classificação. A presença de anemia hemolítica auto-imune em artrite reumatóide é relatada raramente na literatura e os mecanismos etiopatogênicos para o seu desenvolvimento ainda não estão esclarecidos. Descrevemos um caso de artrite reumatóide no adulto e outro de artrite reumatóide juvenil que desenvolveram anemia hemolítica auto-imune e discutimos os prováveis mecanismos etiopatogênicos envolvidos.

Resumo em Inglês:

Rheumatoid arthritis is a connective tissue disease characterized by articular and systemic involvement. Hematological abnormalities such as anemia may occur in up to 65% of the patients, with chronic disease anemia being the commonest form. Autoimmune hemolytic anemia can be associated with different connective tissue diseases, particularly systemic lupus erythematosus and it is part of its classification criteria. On the other hand, the presence of autoimmune hemolytic anemia in rheumatoid arthritis has rarely been described in the literature and the pathogenic mechanisms for its development remain unclear. We describe here a case of rheumatoid arthritis and another of juvenile rheumatoid arthritis that developed to autoimmune hemolytic anemia and present the probable etiopathogenic mechanisms.

Resumo em Português:

Esta revisão tem como objetivo apresentar os anticoagulantes e inibidores da agregação plaquetária que foram encontrados em animais hematófagos. Esses animais precisam inibir as reações hemostáticas no local onde se alimentam no hospedeiro para realizar a refeição sangüínea e também para manter o sangue fluido nos seus próprios tratos digestivos. Devido a essa necessidade, eles desenvolveram ao longo da evolução uma grande diversidade de substâncias que são injetadas no hospedeiro através da saliva e que permitiram o sucesso de seu parasitismo. Tais recursos farmacológicos podem ser utilizados como ferramentas em pesquisa da fisiologia vascular e hemostática, e têm potencial uso terapêutico em doenças cardiovasculares.

Resumo em Inglês:

In this review, we present anticoagulants and inhibitors of platelet aggregation isolated from hematophagous animals. These animals have to inhibit, at the site of injury, the host hemostasis in order to blood-feed and maintain the blood fluid inside their digestive tract. During evolution, hematophagous animals developed a diversity of anti-homeostatic substances that are injected into the host through their saliva and that are crucial to successful parasitism. These anti-homeostatic substances could be used as tools in vascular physiology investigation and they also have potential therapeutic applications.

Resumo em Inglês:

In malaria endemic regions of Africa, resistance to infection by Plasmodium has been observed in under 6-month-old children, when there are higher fetal hemoglobin (Hb F) levels. Research performed in the São José do Rio Preto region, central-east Brazil, reported increased levels of Hb F in blood donors. The purpose of this work was to evaluate the A2 hemoglobin (Hb A2) and Hb F concentrations in blood donors deriving from the Brazilian malaria endemic region. Forty-five blood donor samples from Macapá, from patients with varying genders, ages and ethnic origins, were collected by venous puncture after informed consent was obtained. The samples were analyzed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) - System Variant (Bio-Rad). The HPLC demonstrated sensitivity and rapidity in the identification and measurement of the hemoglobins and gave precise results. Moreover, it provided measurement of hemoglobin variants, even when they were present in small amounts, providing a diagnosis of hemoglobinopathies. Hb F levels above the normal were observed in 33.3% of the analyzed samples. The presence of increased Hb F can suggest resistance to infection by Plasmodium falciparum, as there have been reports that infected red blood cells interfere in the development of the parasite.

Resumo em Inglês:

A study carried out in Salvador, Bahia, Northeastern Brazil, has shown a miscarriage rate significantly higher among AS women than that observed among AA controls. Considering this finding, we investigated the miscarriage rate among women cared for by the hemoglobinopathy program in the city of Araras, São Paulo, Southeastern Brazil. The spontaneous miscarriage rate among 165 AS women (17%) was significantly higher than that observed among 500 AA women (10%) (p = 0.02). Taking into account only women with ages above 20 years, the miscarriage rate among 112 heterozygous AS (22%) greatly differed from that observed among 347 AA women (12.6%) (p = 0.01). These results confirm the greater tendency of spontaneous miscarriages among AS women, which might be related to a previously described maternal effect in relation to AS heterozygous women.