Polimorfismos no gene <i>NAT2</i> (N-acetiltransferase 2) em pacientes com lúpus eritematoso sistêmico

Santos, Elaine Cristina Lima dos; Pinto, Amanda Chaves; Klumb, Evandro Mendes; Macedo, Jacyara Maria Brito

doi:10.1016/j.rbre.2016.09.015

Elaine Cristina Lima dos Santos

Universidade do Estado do Rio de Janeiro (UERJ), Departamento de Bioquímica, Rio de Janeiro, RJ, Brasil

Amanda Chaves Pinto

Universidade do Estado do Rio de Janeiro (UERJ), Departamento de Bioquímica, Rio de Janeiro, RJ, Brasil

Evandro Mendes Klumb

Universidade do Estado do Rio de Janeiro (UERJ), Disciplina de Reumatologia, Rio de Janeiro, RJ, Brasil

Jacyara Maria Brito Macedo ^**Autor para correspondência. E-mails: jacyara@uerj.br, jacyarauerj@gmail.com (J.M. Macedo).

Universidade do Estado do Rio de Janeiro (UERJ), Departamento de Bioquímica, Rio de Janeiro, RJ, Brasil

*Autor para correspondência. E-mails: jacyara@uerj.br, jacyarauerj@gmail.com (J.M. Macedo).

Conflitos de interesse

Os autores declaram não haver conflitos de interesse.

Figuras (1)
Tabelas (5)

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Figura 1
Análise molecular de quatro substituições no gene NAT2. (A) Fotografia de um gel de agarose 2% com brometo de etídeo para análise da substituição 481C > T. Linha 1 -controle negativo da reação de digestão (amplicon íntegro); Linha 2 - amostra representativa do genótipo NAT2 481CC (dois alelos com sítio de restrição da KpnI); Linha 3 - amostra representativa do genótipo NAT2 481CT (apenas um dos alelos com sítio de restrição da KpnI); Linha 4 - amostra representativa do genótipo NAT2 481TT (dois alelos sem sítio de restrição da KpnI); Linha 5 - padrão de peso molecular (GeneRuler™ 100 bp DNA Ladder, ready to use - Fermentas). (B) Fotografia de um gel de poliacrilamida 6% corado com brometo de etídeo para análise da substituição 590G > A. Linha 1 - controle negativo da reação (amplicon íntegro); Linha 2 - amostra representativa do genótipo NAT2 590GG (dois alelos com sítio adicional de restrição da TaqI); Linha 3 - amostra representativa do genótipo NAT2 590GA (apenas um dos alelos com sítio adicional de restrição da TaqI); Linha 4 - amostra representativa do genótipo NAT2 590AA (dois alelos sem sítio adicional de restrição da TaqI); Linha 5 - padrão de peso molecular (GeneRuler™ 100 bp DNA Ladder, ready to use -Fermentas). (C) Fotografia de um gel de agarose 1% corado com brometo de etídeo para análise da substituição 857G > A. Linha 1 - controle negativo da reação de digestão (amplicon íntegro); linhas 2 e 5 - amostras representativas do genótipo NAT2 857GG (dois alelos com o sítio adicional de restrição da BamHI); Linhas 3 e 4 - amostras representativas do genótipo NAT2 857GA (apenas um dos alelos com o sítio adicional de restrição da BamHI); Linha 6 - padrão de peso molecular (GeneRuler™ 100 bp DNA Ladder, ready to use - Fermentas). (D) Fotografia de gel de poliacrilamida 5% corado com brometo de etídeo para análise da substituição 191G > A-. Linha 1 - amostra representativa do genótipo NAT2 191GA (apenas um dos alelos com sítio de restrição da MspI); Linhas 2 e 3 - amostras representativas do genótipo NAT2 191GG (dois alelos com sítio adicional de restrição da MspI); Linhas 4 - controle negativo da reação de digestão (amplicon íntegro); Linha 5 - padrão de peso molecular (GeneRuler™ 1 kp DNA Ladder, ready to use - Fermentas).

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Tabela 1
Características clínicas das pacientes portadoras de lúpus eritematoso sistêmico avaliadas no estudo

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Tabela 2
Distribuições genotípicas e alélicas relativas a cada uma das quatro substituições do gene NAT2 e o fenótipo acetilador nos grupos de casos (pacientes lúpicas) e controles

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Tabela 3
Distribuições de haplótipos do gene NAT2 nos grupos de casos (pacientes lúpicas) e controles

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Tabela 4
Análise de interação entre os genótipos relativos às substituições no gene NAT2 ou o fenótipo de NAT2, a origem étnica nos grupos de casos (pacientes lúpicas) e controles

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Tabela 5
Frequências dos alelos menos frequentes de NAT2 (481 T, 590A, 857A, 191A) observadas em diversas populações

Substituição/Fenótipo acetilator	Genótipo/alelo/fenótipo	Casos (n = 91)	Controles^a a Teste de equilíbrio de Hardy-Weinberg: NAT2 481C > T (p = 1,00); NAT2 590G > A (p = 0,50); NAT2 857G > A (p = 1,00); NAT2 191G > A (p = 0,19) (SNPStats). (n = 97)	Casos vs. controles
		n (%) ou (f)	n (%) ou (f)	OR (IC 95%)
NAT2 481C > T	CC	40 (44)	34 (35)	1,00
	CT	39 (43)	46 (48)	0,72 (0,39–1,35)
	TT	12 (13)	16 (17)	0,64 (0,27–1,53)
	CT + TT	51 (56)	62 (65)	0,70 (0,39–1,26)
	C	119 (0,65)	114 (0,59)	1,00
	T	63 (0,35)	78 (0,41)	0,77 (0,51–1,18)

NAT2 590 G > A	GG	53 (59)	66 (68)	1,00
	GA	32 (36)	27 (28)	1,48 (0,79–2,76)
	AA	5 (6)	4 (4)	1,56 (0,40–6,09)
	GA + AA	37 (41)	31 (32)	1,49 (0,82–2,71)
	G	138 (0,77)	159 (0,82)	1,00
	A	42 (0,23)	35 (0,18)	1,38 (0,84–2,29)

NAT2 857 G > A	GG	70 (84)	88 (93)	1,00
	GA	13 (16)	7 (7)	2,34 (0,88–6,17)
	AA	0	0	N/A
	GA + AA	13 (16)	7 (7)	2,34 (0,88–6,17)
	G	153 (0,92)	183 (0,96)	1,00
	A	13 (0,08)	7 (0,04)	2,22 (0,86–5,71)

NAT2 191 G > A	GG	87 (96)	81 (91)	1,00
	GA	4 (4)	7 (8)	0,53 (0,15–1,89)
	AA	0	1 (1)	N/A
	GA + AA	4 (4)	8 (9)	0,47 (0,14–1,61)
	G	178 (0,98)	169 (0,95)	1,00
	A	4 (0,02)	9 (0,05)	0,42 (0,13–1,40)

Fenótipo acetilador	Rápido	45 (53)	48 (53)	1,00
Fenótipo acetilador	Lento	40 (47)	43 (47)	1,00 (0,56–1,82)

Haplótipo de NAT2				Casos (f)	Controles (f)	Casos vs. controles
481C > T	590G > A	857G > A	191G > A			OR (IC 95%)
T	G	G	G	0,3231	0,3990	1,00
C	G	G	G	0,3595	0,3405	1,25 (0,76-2,06)
C	A	G	G	0,2170	0,1653	1,67 (0,94-2,95)
C	G	A	G	0,0476	0,0360	1,89 (0,61-5,88)
C	G	G	A	0,0139	0,0435	0,63 (0,18-2,12)
T	G	A	G	0,0231	0	N/A

Substituição/fenótipo acetilador	Cor da pele/etnia	Genótipo/fenótipo	Casos n (%)	Controles n (%)	Casos vs. Controles OR (IC 95%)
NAT2 481C > T	Branca	C/C	12 (36)	6 (27)	1,00
		C/T	19 (58)	11(50)	0,86 (0,25-2,95)
		T/T	2 (6)	5 (23)	0,20 (0,03-1,35)
	Não branca	C/C	28 (48)	28 (38)	1,00
		C/T	20 (35)	35 (47)	0,57 (0,27-1,22)
		T/T	10 (17)	11 (15)	0,91 (0,33-2,48)

NAT2 590G > A	Branca	G/G	18 (55)	17 (77)	1,00
		G/A	14 (42)	4 (18)	3,31 (0,91-12,06)
		A/A	1 (3)	1 (5)	0,94 (0,05-16,34)
	Não branca	G/G	35 (61)	49 (65)	1,00
		G/A	18 (32)	23 (31)	1,10 (0,52-2,33)
		A/A	4 (7)	3 (4)	1,87 (0,39-8,87)

NAT2 857G > A	Branca	G/G	27 (90)	19 (86)	1,00
		G/A	3 (10)	3 (14)	0,70 (0,13-3,87)
		A/A	0	0	N/A
	Não branca	G/G	43 (81)	69 (95)	1,00
		G/A	10 (19)	4 (5)	4,01 (1,18-13,59) ^a a Teste de Fisher: p = 0,0230.
		A/A	0	0	N/A

NAT2 191G > A	Branca	G/G	32 (97)	20 (95)	1,00
		G/A	1 (3)	1 (5)	0,62 (0,04-10,57)
		A/A	0	0	N/A
	Não branca	G/G	55 (95)	61 (90)	1,00
		G/A	3 (5)	6 (9)	0,55 (0,13-2,32)
		A/A	0	1 (1)	N/A

Fenótipo acetilador	Branca	Rápido	17 (55)	11 (52)	1,00
		Lento	14 (45)	11 (48)	1,21 (0,41–3,63)
	Não branca	Rápido	28 (52)	37 (54)	1,00
		Lento	26 (48)	32 (46)	0, 93 (0,46–1,90)

População	Substituição de NAT2
	857G > A	481C > T	590G > A	191G > A
África^a a Sabbagh et al., 2011. Dados de controles específicos para cada um dos modelos de doença incluído no grupo de casos.	0,04	0,30	0,25	0,09
Europa^a a Sabbagh et al., 2011. Dados de controles específicos para cada um dos modelos de doença incluído no grupo de casos.	0,03	0,44	0,27	0,01
Ásia^a a Sabbagh et al., 2011. Dados de controles específicos para cada um dos modelos de doença incluído no grupo de casos.	0,12	0,18	0,27	0
América^a a Sabbagh et al., 2011. Dados de controles específicos para cada um dos modelos de doença incluído no grupo de casos.	0,20	0,25	0,11	0,02
Oceania^a a Sabbagh et al., 2011. Dados de controles específicos para cada um dos modelos de doença incluído no grupo de casos.	0,04	0,04	0,32	0
Este estudo^b b Pacientes do grupo controle.	0,08	0,35	0,23	0,02

[1] *Autor para correspondência. E-mails: jacyara@uerj.br, jacyarauerj@gmail.com (J.M. Macedo).

Dados clínicos
Idade ao início dos sintomas (MD ± DP)	27,8 ± 10,9
Tempo decorrido entre o início dos sintomas e o diagnóstico de LES (MD ± DP) (meses)	20,0 ± 28,3
Critérios do Colégio Americano de Reumatologia (ACR) (%)
Eritema malar	78,0
Lesões discoides	15,4
Fotossensibilidade	72,5
Úlcera oral	53,8
Artrite	84,6
Pleurite	33,0
Pericardite	28,6
Alterações hematológicas^a a Foi agrupada como alteração hematológica a redução de plaquetas, linfócitos e leucócitos.	39,6
Anemia hemolítica	44,6
Psicose	14,3
Convulsão	5,5
Alterações renais (proteinúria)	78,0
FAN positivo	60,4

Brasil

Brasil

Polimorfismos no gene NAT2 (N-acetiltransferase 2) em pacientes com lúpus eritematoso sistêmico

RESUMO

Objetivo:

Métodos:

Resultados e conclusões: