Immunodiagnosis of hydatid disease: evaluation of antigens from hydatid cyst fluid and the vesicularfluid of Taenia crassiceps metacestode

Coltorti, Emilio; Cammarieri, Graciela

doi:10.1590/S0036-46651993000200007

Abstracts

The specificity and sensitivity of the enzyme immunoassay (EIA), presently used in South America areas where hydatidosis caused by Echinococcus granulosus is endemic, was compared to two alternative EIA. One of these uses an hydatid antigen of different prepraration and the other vesicular fluid of Taenia crassiceps cisticerci (VFCC). The effect of previous neutralization in the serum sample of antibodies anti-normal ovine or murine sera and anti-phosphorylcholine on the diagnostic efficiency of these EIA was studied. The frequency of distribution of the titers obtained with normal sera, hydatid sera positive to DD5 test and hydatid sera negative to DD5 test in three EIA systems was analyzed. Results showed a significant decrease of sensitivity of the EIA using VFCC when compared to these EIA using hydatid antigens. This makes inconvenient the use of VFCC for the immunodiagnosis of hydatid disease. No significant differences between the two EIA using hydatid antigens were observed. SDS-PAGE analysis showed remarkable differences between the VFCC and the hydatid antigens composition and some differences among these latters probably due to manufacturing procedures.

Se comparó la especificidad y sensibilidad del ensayo inmunoenzimático (EIE) actualmente en uso en las áreas de Sudamérica donde la hidatidosis causada por Echinococcus granulosus es endémica, con dos versiones de EIE, una de las cuales emplea un antígeno hidatídico de diferente preparación y la otra líquido vesicular de cisticerco de Taenia crassiceps (LVCC). Se estudió también para ambos antígenos el efecto de la neutralización previa de los anticuerpos anticomponentes séricos ovinos o murinos, y antifosforilcolina sobre la eficiencia diagnóstica de los EIE. Se analizó la frecuencia de distribución de los títulos obtenidos en los tres sistemas de EIE frente a sueros normales, hidatídicos a la prueba de doble difusión arco 5 (DD5) e hidatídicos DD5 negativos. Los resultados mostraron una significativa disminución de sensibilidad del LVCC frente a los antígenos hidatídicos lo cual hace inconveniente su uso para inmunodiagnóstico de hidatidosis. No se observaron diferencias significativas entre los dos antígenos hidatídicos. El análisis por SDS-PAGE mostró una marcada diferencia de composición entre el LVCC y los antígenos hidatídicos, y algunas diferencias entre estos últimos posiblemente debidas a los procesos de preparación.

Hidatidosis; Echinococcus granulosus; Taenia crassiceps; Inmunodiagnóstico

SOROLOGIA

Inmunodiagnóstico de hidatidosis: evaluación de líquido hidático y de líquido vesicular de cisticerco de Taenia crassiceps

Immunodiagnosis of hydatid disease: evaluation of antigens from hydatid cyst fluid and the vesicularfluid of Taenia crassiceps metacestode

Emilio Coltorti^I; Graciela Cammarieri^II

^IInstituto Panamericano de Protección de Alimentos y Zoonosis, Programa de Salud Pública Veterinaria, OPS/OMS, Casilla 3092, Correo Central, 1000 - Buenos Aires, Argentina

^IIHospital Central, Secretaría de Salud Pública, Municipalidad de San Isidro, 1642 - San Isidro, Buenos Aires, Argentina

RESUMEN

Se comparó la especificidad y sensibilidad del ensayo inmunoenzimático (EIE) actualmente en uso en las áreas de Sudamérica donde la hidatidosis causada por Echinococcus granulosus es endémica, con dos versiones de EIE, una de las cuales emplea un antígeno hidatídico de diferente preparación y la otra líquido vesicular de cisticerco de Taenia crassiceps (LVCC). Se estudió también para ambos antígenos el efecto de la neutralización previa de los anticuerpos anticomponentes séricos ovinos o murinos, y antifosforilcolina sobre la eficiencia diagnóstica de los EIE.

Se analizó la frecuencia de distribución de los títulos obtenidos en los tres sistemas de EIE frente a sueros normales, hidatídicos a la prueba de doble difusión arco 5 (DD5) e hidatídicos DD5 negativos. Los resultados mostraron una significativa disminución de sensibilidad del LVCC frente a los antígenos hidatídicos lo cual hace inconveniente su uso para inmunodiagnóstico de hidatidosis.

No se observaron diferencias significativas entre los dos antígenos hidatídicos. El análisis por SDS-PAGE mostró una marcada diferencia de composición entre el LVCC y los antígenos hidatídicos, y algunas diferencias entre estos últimos posiblemente debidas a los procesos de preparación.

Unitermos: Hidatidosis; Echinococcus granulosus; Taenia crassiceps; Inmunodiagnóstico.

SUMMARY

The specificity and sensitivity of the enzyme immunoassay (EIA), presently used in South America areas where hydatidosis caused by Echinococcus granulosus is endemic, was compared to two alternative EIA. One of these uses an hydatid antigen of different prepraration and the other vesicular fluid of Taenia crassiceps cisticerci (VFCC). The effect of previous neutralization in the serum sample of antibodies anti-normal ovine or murine sera and anti-phosphorylcholine on the diagnostic efficiency of these EIA was studied.

The frequency of distribution of the titers obtained with normal sera, hydatid sera positive to DD5 test and hydatid sera negative to DD5 test in three EIA systems was analyzed.

Results showed a significant decrease of sensitivity of the EIA using VFCC when compared to these EIA using hydatid antigens. This makes inconvenient the use of VFCC for the immunodiagnosis of hydatid disease. No significant differences between the two EIA using hydatid antigens were observed. SDS-PAGE analysis showed remarkable differences between the VFCC and the hydatid antigens composition and some differences among these latters probably due to manufacturing procedures.

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AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecen al Sr. Roberto García por su esmerada colaboración técnica y al Dr. Carlos Larralde (Instituto de Investigaciones Biomédicas, Universidad Nacional Autónoma de México), por habernos cedido gentilmente la cepa de T.crassiceps.

Recebido para publicação em 29/07/1992

Aceito para publicação em 07/01/1993

1. BRADFORD, M.M. - A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of dye binding. Analyt. Biochem., 72: 248-254, 1976.
2. CENTRO PANAMERICANO DE ZOONOSIS, OPS/OMS - Diagnóstico inmunológico de la hidatidosis humana mediante la prueba de doble difusión arco 5. Ramos Mejía, Buenos Aires, Centro Panamericano de Zoonosis, 1979. (Nota Técnica Nş 22).
3. COLTORTI, E.A. & VARELA-DIAZ, V.M. - Detection of antibodies against Echinococcus granulosus arc 5 antigens by double diffusion test. Trans. roy. Soc. trop. Med. Hyg., 72: 226-229, 1978.
4. COLTORTI, E.A.; FERNANDEZ, E.; GUARNERA, E.; LAGO, J. & IRIARTE, J. - Field evaluation of an enzyme immunoassay for detection of assymptomatic patients in an hydatic control program. Amer. J. trop. Med. Hyg., 38: 603-607, 1988.
5. COLTORTI, E.A.; GUARNERA, E.; LARRIEU. E.; SANTILLAN, G. & AQUINO, A. - Seroepidemiology of human hydatidosis: use of dried blood sample on filter paper. Trans. roy Soc. trop. Med. Hyg., 82: 607-610, 1988.
6. COLTORTI, E.A.; FERNANDEZ, E.; MARGUET, E.R.; SCOZZINA, J.D. & GUARNERA, E. - Detección de portadores asintomáticos de quistes hidatídicos: aumento de la especificidad del ensayo inmunoenzimático. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 32: 275-284, 1990.
7. COLTORTI, E.A.; DELARZES, S.; CAMMARTERI, G. & FERNANDEZ, E. - Inmunodiagnóstico de hidatidosis humana: evaluación de tres tipos de ensayos inmunodiagnósticos. Parasit. al Día, 15: 69-73, 1991.
8. LARRALDE, C.; MONTOYA, R.M.; SCIUTTO, E.; DIAZ, M.L.; GOVEZENSKY, T. & COLTORTI, E.A. - Deciphering Western blots of tapeworm antigens (T.solium, E. granulosus and T.crassiceps) reacting with sera from neurocysticercosis and hydatid disease patients. Amer. J. trop. Med. Hyg., 40: 282-290, 1989.
9. LARRIEU, E.J.; VARELA-DIAZ, V.M.; MEDINA, M.; COLTORTI, E.A. & CAVIGLIA, H. - Hidatidosis humana: aporte del inmunodiagnóstico a la detección, notificación y registro de casos en la provincia de Río Negro, Argentina. Bol. chil. Parasit., 38: 3-9, 1983.
10. SHEPHERD, J.C. & McMANUS, D.P. - Specific and cross-reactive antigens of Echinococcus granulosus hydatic cyst fluid. Molec. Biochem. Parasit., 25: 143-154, 1987.
11. TSANG, V.C.W.; PERALTA, J.M. & SIMONS, R. - Enzyme-linked immunoelectrotransfer blot techniques (EITB) for studying the specifities of antigens and antibodies separated by gel electiophoresis. Meth. Enzymol., 92: 377-391, 1983.
12. ZINGALES, B. - Analysis of proteins by sodium dodecil sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. In: MOREL, C., ed. Genes and antigens of parasites. Rio de Janeiro, Fundaçăo Oswaldo Cruz, 1984. p. 357-363.

Publication Dates

Publication in this collection
27 July 2006
Date of issue
Apr 1993

History

Received
29 July 1992
Accepted
07 Jan 1993

This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.

[1] 1. BRADFORD, M.M. - A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of dye binding. Analyt. Biochem., 72: 248-254, 1976.

[2] 2. CENTRO PANAMERICANO DE ZOONOSIS, OPS/OMS - Diagnóstico inmunológico de la hidatidosis humana mediante la prueba de doble difusión arco 5. Ramos Mejía, Buenos Aires, Centro Panamericano de Zoonosis, 1979. (Nota Técnica Nş 22).

[3] 3. COLTORTI, E.A. & VARELA-DIAZ, V.M. - Detection of antibodies against Echinococcus granulosus arc 5 antigens by double diffusion test. Trans. roy. Soc. trop. Med. Hyg., 72: 226-229, 1978.

[4] 4. COLTORTI, E.A.; FERNANDEZ, E.; GUARNERA, E.; LAGO, J. & IRIARTE, J. - Field evaluation of an enzyme immunoassay for detection of assymptomatic patients in an hydatic control program. Amer. J. trop. Med. Hyg., 38: 603-607, 1988.

[5] 5. COLTORTI, E.A.; GUARNERA, E.; LARRIEU. E.; SANTILLAN, G. & AQUINO, A. - Seroepidemiology of human hydatidosis: use of dried blood sample on filter paper. Trans. roy Soc. trop. Med. Hyg., 82: 607-610, 1988.

[6] 6. COLTORTI, E.A.; FERNANDEZ, E.; MARGUET, E.R.; SCOZZINA, J.D. & GUARNERA, E. - Detección de portadores asintomáticos de quistes hidatídicos: aumento de la especificidad del ensayo inmunoenzimático. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 32: 275-284, 1990.

[7] 7. COLTORTI, E.A.; DELARZES, S.; CAMMARTERI, G. & FERNANDEZ, E. - Inmunodiagnóstico de hidatidosis humana: evaluación de tres tipos de ensayos inmunodiagnósticos. Parasit. al Día, 15: 69-73, 1991.

[8] 8. LARRALDE, C.; MONTOYA, R.M.; SCIUTTO, E.; DIAZ, M.L.; GOVEZENSKY, T. & COLTORTI, E.A. - Deciphering Western blots of tapeworm antigens (T.solium, E. granulosus and T.crassiceps) reacting with sera from neurocysticercosis and hydatid disease patients. Amer. J. trop. Med. Hyg., 40: 282-290, 1989.

[9] 9. LARRIEU, E.J.; VARELA-DIAZ, V.M.; MEDINA, M.; COLTORTI, E.A. & CAVIGLIA, H. - Hidatidosis humana: aporte del inmunodiagnóstico a la detección, notificación y registro de casos en la provincia de Río Negro, Argentina. Bol. chil. Parasit., 38: 3-9, 1983.

[10] 10. SHEPHERD, J.C. & McMANUS, D.P. - Specific and cross-reactive antigens of Echinococcus granulosus hydatic cyst fluid. Molec. Biochem. Parasit., 25: 143-154, 1987.

[11] 11. TSANG, V.C.W.; PERALTA, J.M. & SIMONS, R. - Enzyme-linked immunoelectrotransfer blot techniques (EITB) for studying the specifities of antigens and antibodies separated by gel electiophoresis. Meth. Enzymol., 92: 377-391, 1983.

[12] 12. ZINGALES, B. - Analysis of proteins by sodium dodecil sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. In: MOREL, C., ed. Genes and antigens of parasites. Rio de Janeiro, Fundaçăo Oswaldo Cruz, 1984. p. 357-363.

Brasil

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