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Localização da bactéria Pantoea ananatis no interior de lesões da doença mancha branca do milho por meio de microscopia eletrônica de transmissão e técnicas moleculares

O agente etiológico da mancha branca do milho (MBM) tem sido alvo de discussão e controvérsia. Inicialmente a doença foi descrita como sendo a mancha foliar de Phaeosphaeria causada por Phaeosphaeria maydis. Outros autores sugeriram a existência de diferentes espécies fúngicas provocando sintomas semelhantes. Recentemente a bactéria Pantoea ananatis foi descrita como sendo o agente causal desta doença. O objetivo deste estudo foi oferecer informações adicionais sobre a correta etiologia da doença proporcionando evidências visuais da presença da bactéria no interior de lesões da MBM por meio de microscopia eletrônica de transmissão (MET) e técnicas moleculares. A MET permitiu visualizar um grande número de células bacterianas nos espaços intercelulares em lesões oriundas de plantas naturalmente e artificialmente infectadas. Estruturas fúngicas não foram visualizadas em lesões jovens. Primers bacterianos para os genes 16S rRNA e rpoB foram usados em reações de PCR para amplificar DNA extraído diretamente de lesões jovens e de lesões necróticas. O oligonucleotídeo universal para fungo, ITS4, foi incluído para identificar a possível presença de estruturas fúngicas nas lesões. Amplificação positiva foi obtida com primers bacterianos, a partir de lesões jovens, natural e artificialmente inoculadas, enquanto que nenhuma amplificação foi observada quando o oligonucleotídeo ITS4 foi usado. Amplificação do DNA com o primer ITS4 foi observada quando o DNA foi extraído de lesões em estádio avançado de necrose. Estes resultados reforçam relatos anteriores que descrevem P. ananatis como patógeno primário da doença e a hipótese de que espécies fúngicas podem colonizar lesões pré-estabelecidas pela P. ananatis.

Doença bacteriana do milho; doenças foliares do milho; Zea mays


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