Resumo em Português:

A podridão floral dos citros (PFC), causada por Colletotrichum acutatum, infecta flores e produz lesões necróticas nas pétalas que induzem a abscisão de frutos jovens. O fungo sobrevive em tecidos vegetativos nos períodos entre floradas e a produção de conídios em tecidos colonizados é estimulada pela aplicação de extrato de flores. Isolados de C. acutatum de outros hospedeiros são geneticamente distintos e também podem causar sintomas de podridão floral, porém sua sobrevivência em tecidos vegetativos e sua habilidade de esporulação em resposta à aplicação de extrato de flores é desconhecida. Nesse trabalho, isolados de C. acutatum causadores de antracnose em mirtilo, samambaia-preta, morango e limão galego foram avaliados quanto à sua habilidade de sobrevivência e produção de conídios em resposta a aplicação de extrato de flores. Propágulos viáveis foram obtidos de folhas de citros inoculadas com isolados de todos os hospedeiros e a recuperação de alguns isolados foi igual ou maior do que a de isolados de PFC. O número de propágulos obtidos aumentou significativamente para todos os isolados após o tratamento com extrato de flores. A aplicação de sucrose em folhas inoculadas com um isolado de PFC também aumentou o número de propágulos obtidos, indicando que a resposta ao extrato de flores deve ser devido a nutrientes. Os resultados deste estudo indicam que isolados de C. acutatum de outros hospedeiros podem colonizar e se reproduzir em folhas de citros e sua inabilidade para causar epidemias pode ser atribuída a menor patogenicidade a flores de citros.

Resumo em Inglês:

Postbloom fruit drop (PFD) is caused by a unique strain of Colletotrichum acutatum that infects citrus flowers, producing necrotic lesions on petals and the abscission of fruitlets. This strain survives on vegetative tissues during non-flowering periods, and conidial production on colonized tissue is stimulated by flower extracts. Genetically distinct strains from other hosts can cause PFD symptoms, but their survival on vegetative tissues and ability to sporulate in response to flower extracts is unknown. Isolates from anthracnose-affected blueberry, leatherleaf fern, strawberry, Key lime and PFD-affected sweet orange were evaluated for their ability to survive on leaves after inoculation and to produce conidia in response to flower extracts. Viable propagules were recovered from leaves inoculated with all non-PFD isolates and recovery of some was equal to or greater than that of the PFD isolate. The number of propagules recovered increased for all isolates after treatment with flower extracts and was comparable across isolates. Application of sucrose to leaves inoculated with the PFD isolate increased the number of propagules recovered from leaves, suggesting that the response to flower extracts was nutritional. Non-PFD isolates of C. acutatum can colonize and reproduce on leaves, and their inability to cause epidemics is probably due to their reduced pathogenicity to flowers.

Resumo em Português:

Neste trabalho, o objetivo foi avaliar o uso de solutos osmóticos em testes de sanidade de sementes de girassol pelo método de incubação em papel de filtro com restrição hídrica do substrato, induzida pela adição de cloreto de sódio e manitol, em relação à germinação de sementes, comprimento de radícula e a detecção da micoflora associada às sementes ou plântulas. Foram testados os níveis de restrição hídrica de -0,8 MPa (Megapascal), -1.0 MPa, -1,2 MPa e -1,4 MPa. O crescimento micelial in vitro dos fungos Alternaria alternata e Alternaria zinniae foi também avaliado em meio de BDA osmoticamente modificado com os mesmos solutos e níveis de restrição, variando de -0,35 MPa (BDA padrão) a -1,4 MPa. A restrição hídrica do substrato de papel induzida pelos solutos testados, nos níveis avaliados, reduziu a germinação das sementes e o comprimento de radícula e não interferiu na detecção dos fungos. A restrição hídrica do meio BDA, induzida por manitol nos diferentes potenciais osmóticos testados, estimulou o crescimento micelial tanto de A. alternata quanto de A. zinniae, enquanto que o meio modificado com NaCl estimulou apenas o crescimento micelial de A. alternata, afetando adversamente o crescimento micelial de A. zinniae.

Resumo em Inglês:

The aim of this work was to investigate the feasibility of using a water restriction technique with osmotic solutes to control sunflower (Helianthus annuus L.) seed germination in blotter tests. The effects of water potential (-0.8 MPa - Megapascal, -1.0 MPa, -1.2 MPa and -1.4 MPa) of substrates osmotically modified with sodium chloride or mannitol were evaluated for seed germination, radicle length and mycoflora present in the samples. The effects of levels of osmotic potentials ranging from -0.35 MPa to -1.4 MPa were also investigated on mycelial growth of the fungi Alternaria alternata and Alternaria zinniae on PDA medium. All osmotic potentials were able to inhibit or to retard seed germination to the extent that seed examination in stereomicroscope became easier without affecting seed mycoflora associated with the seeds. Mycelial growth of A. alternata was stimulated by all osmotic solutes tested, while mycelial growth of A. zinniae was stimulated by mannitol and reduced by all NaCl osmotic potential levels used.

Resumo em Português:

Os vírus são capazes de induzir desordens metabólicas e estruturais nas células vegetais, as quais podem variar com a espécie viral e a suscetibilidade da planta. Neste enfoque, videiras (Vitis vinifera) com e sem sintomas de infecção viral, das cvs. Cabernet Franc e Cabernet Sauvignon, em dois vinhedos comerciais, foram avaliadas comparativamente quanto ao potencial fotossintético (fotossíntese de saturação luminosa, radiação de saturação, ponto de compensação de luz, taxa de respiração no escuro, rendimento quântico aparente, clorofilas total, a e b), quanto ao metabolismo de carbono foliar (açúcares solúveis totais e amido) e quanto a qualidade enológica da uva produzida (sólidos solúveis totais - ºBrix, densidade, pH e acidez total titulável no mosto - ATT; intensidade total da cor e índice de polifenóis totais na casca). Nas plantas sintomáticas foram detectados o Grapevine leafroll-associated virus 2 (GLRaV-2) e o Rupestris stem pitting-associated virus (RSPaV) pelo teste ELISA para seis vírus, os quais provocaram reduções significativas na clorofila e no potencial fotossintético, em ambas as cultivares. As folhas de plantas infectadas também apresentaram acúmulos significativos de carboidratos, caracterizando um bloqueio no transporte de carbono desses órgãos. Quanto à qualidade enológica da uva, no momento da colheita as plantas infectadas apresentaram uvas com nível de maturação significativamente menor, considerando todos os parâmetros tecnológicos do mosto (ºBrix, densidade, pH, ATT e polifenóis). De modo geral, destaca-se que estes vírus podem comprometer diretamente a capacidade produtiva e a qualidade da produção destas cultivares.

Resumo em Inglês:

Viruses may induce metabolic and structural disarray in plant cells to varying degrees depending on viral species and plant susceptibility. With this focus, grapevine plants (Vitis vinifera) cvs. Cabernet Franc and Cabernet Sauvignon, symptomless and showing symptoms of virus-infection, in two commercial vineyards were comparatively analyzed. The parameters were: 1. photosynthetic potential (light-saturated rate of photosynthesis, saturating light intensities, light compensation point, dark respiration rate, apparent quantum yield, chlorophyll a and b); 2. foliar carbon metabolism (total soluble sugars and starch), and 3. enologic quality of the produced grapes (total soluble solids - ºBrix, density, pH and titerable total acidity in the must; total color intensity and total polyphenols in berry skins) were recorded. In symptomatic plants Grapevine leafroll-associated virus 2 (GLRaV-2) and Rupestris stem pitting-associated virus (RSPaV) have been detected by ELISA carried out for six viruses. The virus infections induced significant reductions in chlorophyll content and in photosynthetic potential of both cultivars. Leaves of infected plants also showed significant accumulation of carbohydrates, suggesting a blockage of carbon transport out of these tissues. Concerning the enologic quality and based on technological parameters of the must (ºBrix, density, titerable total acidity and polyphenols), grapes of infected plants showed at harvest a significantly lower level of maturation. These viruses directly affect the productive capacity as well as the quality of the grapes produced by these cultivars.

Resumo em Português:

A morte de flores em pomares de pereiras europeias (Pyrus communis L.) foi observada em Vacaria, RS. Dois isolados bacterianos, oriundos de flores sintomáticas, reproduziram tais sintomas em flores de ramos destacados e foram identificados como Pseudomonas sp. Devido à ausência de registro da etiologia dessa doença no Brasil, ao registro de P. syringae pv. syrigae e Erwinia amylovora associadas a sintomas similares em outros países e à possível presença deste tipo de bactérias em gemas, um método para detecção dessas três bactérias foi desenvolvido. O método envolveu maceração das gemas com nitrogênio líquido, adição de PBS e PVP 2%, transferência do suco para cartão FTA (Whatman); tratamento de círculos do cartão, com etanol 70%, reagente FTA e tampão TE, eluição do DNA seguida de PCR com oligonucleotídeos iniciadores específicos para cada uma das bactérias. O método foi, então, utilizado para monitorar tais bactérias em gemas colhidas bimensalmente durante 2008. E. amylovora não foi detectada. A frequência média de P. syringae pv. syringae e Pseudomonas sp. foi de 0,7 e 16,3%, respectivamente; a última atingindo pico de 30% em outubro. A espécie do agente causal não foi elucidada, mas foi demonstrada a associação com o gênero Pseudomonas, o que já fornece subsídios para o desenvolvimento de métodos de controle da doença.

Resumo em Inglês:

The death of flowers in European pear (Pyrus communis L.) orchards was observed in Vacaria, State of Rio Grande do Sul, Brazil. Two bacterial isolates, obtained from symptomatic flowers, reproduced these symptoms on flowers of detached branches and were identified as Pseudomonas sp. Considering the lack of reports of this disease in Brazil, the record of P. syringae pv. syrigae and Erwinia amylovora associated with similar symptoms in other countries and the possible presence of these bacteria in buds, a method to detect the three bacteria was developed. The method comprised: bud maceration with liquid nitrogen, addition of PBS and 2% PVP, transfer of juice to FTA cards (Whatman), treatment of card circles with 70% ethanol, TE buffer and FTA reagent, elution of DNA followed by PCR with specific primers for each bacterium. The method was further used to monitor these bacteria in buds collected bimonthly during 2008. E. amylovora was not detected. The average frequency of P. syringae pv. syringae and Pseudomonas sp. was 0.7 and 16.3%, respectively, the latter showing a frequency peak of 30% in October. The species of the causal agent was not made clear, but the association with the genus Pseudomonas was demonstrated, which already provides a basis for the development of methods for disease control.

Resumo em Português:

Este trabalho investigou a habilidade de Acidovorax citrulli, agente causal da mancha-aquosa em cucurbitáceas, colonizar plantas de meloeiro. Em condições de casa de vegetação, folhas e sementes foram inoculadas com um mutante espontâneo de A. citrulli (grupo I) resistente a rifampicina (Ac1Rif) e a intervalos de três dias, amostras de hipocótilo, folhas cotiledonares, raízes, folhas ou ramos foram processadas. Após a inoculação no 1º par de folhas, A. citrulli foi detectada até o 10º par de folhas (1,3 x 10³ UFC g-1 de folha) e no ramo consecutivo (3,3 x 10³ UFC g-1 de ramo) aos 30 dias. A partir da inoculação das sementes A. citrulli colonizou efetivamente o hipocótilo, raízes, folhas cotiledonares, folhas e ramos, sendo a bactéria detectada até o 4º par de folhas (1,62 x 10² UFC g-1 de folha) e no ramo consecutivo (9,1 x 10¹ UFC g-1 e ramo) aos 24 dias após a inoculação. Pode-se concluir que A. citrulli colonizou diferentes partes do meloeiro ao longo do tempo, dependendo da localização do inóculo inicial, folhas ou sementes. Isto confirma o que tem sido observado nas condições de campo, ou seja, que folhas expandidas e ramos são fontes de inóculo para flores e frutos de melão, dando, portanto, suporte científico para o desenvolvimento de estratégias mais efetivas de manejo da mancha-aquosa do meloeiro.

Resumo em Inglês:

The aim of this work was to investigate the ability of Acidovorax citrulli, the causal agent of bacterial fruit blotch (BFB) of cucurbits, to colonize melon tissues. Under greenhouse conditions leaves and seeds were inoculated with a spontaneous mutant of A. citrulli (group I) resistant to rifampicin (Ac1Rif), and samples of hypocotyls, cotyledonary leaves, roots, leaves and stems were processed at three-day intervals. When the 1st pair of melon leaves had been inoculated, A. citrulli was only detected until the 10th pair of leaves (1.3 x 10³ CFU g-1 of leaf) and the consecutive stem (3.3 x 10³ CFU g-1 of stem) on the 30th day. However, after seed inoculation A. citrulli colonized the hypocotyl, roots, cotyledonary leaves, leaves and stems and was only detected until the 4th pair of leaves (1.62 x 10² CFU g-1 of leaf) and the consecutive stem (9.1 x 10¹ CFU g-1 of stem) on the 24th day post-inoculation. In conclusion, A. citrulli colonized different parts of the melon plant over time, depending on its initial location, leaves or seed. This confirms what has been observed in the field, that expanded leaves and stems are the main inoculum sources for melon blossoms and fruit, therefore providing scientific bases for developing more effective strategies for BFB management.

Resumo em Português:

A ocorrência do Pepper mild mottle virus (PMMoV) em plantas de Capsicum tornou-se frequente no Brasil. Apesar da importância desse vírus, informações genômicas de isolados sul-americanos são ainda escassos. Neste trabalho, foi elucidada a sequência do genoma completo de um isolado brasileiro de PMMoV (BR-DF01) e esta foi comparada a outras sequências de PMMoV. A sequência de nucleotídeos do genoma completo do isolado BR-DF01 apresentou a maior identidade (99,54%) com o isolado japonês JP-J, que é capaz de contornar a resistência do gene L3 de plantas de Capsicum, como foi também observado para BR-DF01. A sequência de amino ácidos da capa protéica (CP) desses dois isolados foi idêntica, sugerindo que a CP é o fator-chave para a quebra de resistência baseada no gene L. Análises filogenéticas indicaram que BR-DF01 e isolados de PMMoV pertencentes ao agrupamento I, incluindo o isolado JP-J, podem compartilhar de um ancestral em comum.

Resumo em Inglês:

Occurrence of Pepper mild mottle virus (PMMoV) on Capsicum plants has become common in Brazil. Despite the importance of this virus, genome information is still lacking for South American isolates. In this report, the first complete genome sequence of a Brazilian isolate of PMMoV (BR-DF01) was elucidated and compared with other PMMoV sequences. The nucleotide sequence of the complete genome of BR-DF01 isolate shared the highest nucleotide identity (99.54%) with the Japanese isolate JP-J, which does not overcome L3 resistance gene of Capsicum plants, as also observed for BR-DF01. The coat protein (CP) amino acid sequence of these two isolates was identical, which suggested that CP is the key factor for L-based resistance breaking. Phylogenetic analysis implied that BR-DF01 and PMMoV isolates belonging to Cluster I, including JP-J isolate, may share a common ancestral origin.

Resumo em Português:

A viticultura é importante para a economia da Argentina, especialmente na província de Mendoza, que abrange mais de 75% da área cultivada do país. Neste trabalho, nós avaliamos a incidência de Grapevine leafroll associated virus (GLRaV) -1, -2 e -3 em clones de Vitis vinifera das cultivares Cabernet Sauvignon, Cabernet Franc e Sauvignon Blanc, cultivadas em diferentes zonas de Mendoza. Os clones selecionados foram previamente relatados como provavelmente infectados por GLRaV-2. Todas as amostras selecionadas foram analisadas por DAS-ELISA para GLRaV-1, -2 e -3. GLRaV-2 foi o único vírus identificado em todos os clones analisados. As incidëncias das infecçoes globais foram 0,6%, 18,8% e 1,2% para GLRaV-1, 2 e 3, respectivamente. No Cabernet Sauvignon clone 337 a incidëncia da infecção foi muito elevado (68,3%).

Resumo em Inglês:

Viticulture is important in Argentina's economy, especially in the province of Mendoza, which is responsible for more than 75% of the crop cultivated area. In this work, we evaluated the incidence of Grapevine leafroll-associated viruses (GLRaV) -1, -2, and -3 in Vitis vinifera clones of cultivars Cabernet Sauvignon, Cabernet Franc, and Sauvignon Blanc, planted in different zones of Mendoza. The selected clones were previously reported as putatively infected by GLRaV-2. All selected samples were analyzed by DAS-ELISA for GLRaV-1,-2 and -3. GLRaV-2 was the only virus identified in all the analyzed clones. The overall infection rates were 0.6%, 18.8% and 1.2 % for GLRaV-1, 2 and 3 respectively. For the clone Cabernet Sauvignon 337, the infection rate was very high (68.3%).

Resumo em Português:

Fitoplasmas causam severas perdas na produção em diversos cultivos de importância econômica, no mundo. No Brasil, há relatos de doenças associadas a fitoplasmas em espécies vegetais distribuídas em 29 famílias botânicas. O superbrotamento do chuchuzeiro, também conhecido como "irizado" é considerado uma das principais enfermidades de natureza fitoplasmática no Brasil e o melão-de-São-Caetano é um hospedeiro alternativo natural do fitoplasma associado à doença. Vinca é uma planta ornamental, hospedeira natural de fitoplasmas. O presente trabalho objetivou detectar fitoplasma em tecido foliar dessecado, a partir de plantas de chuchuzeiro, melão-de-São-Caetano e vinca, naturalmente infectadas. Através de amplificação, por PCR, do 16S rDNA detectou-se a presença de fitoplasma em amostras dessecadas de chuchuzeiro e de melão-de-São-Caetano com superbrotamento, bem como de vinca apresentando clorose e folhas de tamanho reduzido. Para a obtenção do DNA dos tecidos dessecados foram utilizados 0,25g e 0,5 g de amostras de melão-de-São-Caetano e vinca. Os resultados obtidos demonstram o potencial da utilização de tecido vegetal dessecado na detecção de fitoplasmas associados a outras espécies botânicas, pois amostras de tecido seco apresentam facilidade de preservação e de transporte, além de fornecerem boa quantidade de DNA.

Resumo em Inglês:

Phytoplasmas can cause yield losses in numerous crops worldwide. In Brazil, phytoplasmal diseases have been reported in plant species, distributed among 29 botanical families. Chayote witches'-broom (ChWB) is reported as one of the diseases of economic importance, associated with phytoplasma in the country, and bitter melon is a natural alternative host of the phytoplasma associated with the disease. Periwinkle is an ornamental plant that can naturally host phytoplasmas. An attempt to detect phytoplasma in desiccated leaf tissues collected from naturally diseased chayote, bitter melon and periwinkle plants was made. On the basis of phytoplasma-specific DNA amplification in PCR, phytoplasma was detected in desiccated chayote and bitter melon samples affected by witches'-broom, as well as in desiccated periwinkle exhibiting chlorosis and small leaves. DNA extraction was achieved using 0.25 g and 0.5 g of bitter melon and periwinkle dessicated tissue. These results encourage trials in utilizing dried plant tissues for the detection of phytoplasmas in other plant species, since dried samples are easy to preserve and transport, and yield good amounts of DNA.

Resumo em Português:

Comparou-se a eficiência dos meios semi-seletivos MSCFF e CNS modificado para a detecção de Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens (Cff) através dos métodos de repicagem por estria e por espalhamento, em sementes de feijoeiro. Duas amostras foram subdivididas em quatro de 500 g cada, imersas em 600 mL de água destilada esterilizada, por 18 h a 5ºC, e as suspensões obtidas foram repicadas para ambos os meios. Após incubação das placas a 28ºC por 72 e 144 horas, procedeu-se à avaliação qualitativa de crescimento de Cff, comparando-se com um isolado padrão. Colônias com características típicas de Cff foram observadas nos dois meios de cultura. Algumas colônias foram purificadas e submetidas à reação de polimerase em cadeia (Bio-PCR), com iniciadores específicos para Cff, e a teste de hipersensibilidade em folhas de fumo. Nas duas avaliações realizadas observou-se crescimento característico de Cff no meio MSCFF, para as amostras de sementes, nos dois métodos de repicagem utilizados. No meio CNS modificado, a bactéria só foi detectada nas amostras de sementes 144 horas após a incubação, independente do método utilizado. Os resultados evidenciaram uma maior rapidez no crescimento de Cff no meio semi-seletivo MSCFF. Os isolados bacterianos foram identificados como Cff através de PCR e reação positiva de hipersensibilidade em fumo.

Resumo em Inglês:

This study aimed to compare the effectiveness of the semi-selective MSCFF and modified CNS culture media in detecting Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens (Cff) in bean seeds, using the streak and spread plate techniques. Four 500 g subsamples, obtained from two samples of bean seeds, were immersed in 600 mL of sterile distilled water for 18 h at 5ºC. Suspensions were picked and transferred to plates with both culture media. Plates were then incubated at 28ºC, and bacterial growth on both media was evaluated 72 and 144 hours later, compared to the growth of a Cff reference strain. Both media revealed the presence of Cff colonies. Typical colonies were isolated for PCR analyses and pathogenicity tests on tobacco leaves. A characteristic Cff growth on MSCFF medium was observed for the seed samples, for the two plate techniques used, in both evaluations. On the modified CNS culture medium, the bacterial growth was only detected in seed samples after 144 hours of incubation, regardless of the plate technique used. The results showed Cff grew faster on the MSCFF semi-selective culture medium. Bacterial isolates tested were identified as Cff by both PCR analyses and a positive tobacco hypersensitivity reaction.