Resumo em Inglês:

Nematodes are considered one of the most difficult organisms to identify due to their microscopic size, morphological similarity, limited number of distinguishable taxonomic characters and overlapping morphometric measurements. However, there are few trained nematode taxonomists remaining, primarily due to retirement without replacement and/or young scientists' lack of interest in classical taxonomy. Due to the continuing decline in classical taxonomic expertise of many taxa including Nematoda, there is an increasing reliance on developing molecular-based diagnostic protocols to identify pests and pathogens. To improve the resolution and reliability of nematode phylogenetic and diagnostic studies, they should ideally combine morphological with molecular data. However, few of the published studies have compared phylogenetic trees derived from morphological/morphometric characters with those derived from molecular data. Furthermore, nematode sequences deposited in public databases should have an identification based on morphological and morphometrical characters ascertained by a trained taxonomist. Nevertheless, molecular diagnostics do offer new opportunities in Nematology, such as improving the capacity to deal with large numbers of samples or with species mixtures which have previously been impractical. In conclusion, a balanced molecular and morphological taxonomic approach is required as proposed by the integrative taxonomy concept. Classical taxonomy and molecular diagnostics should be considered as complementary.

Resumo em Português:

Esta pesquisa avaliou a possibilidade de controle da mancha bacteriana do maracujazeiro amarelo através da avaliação do indutor de resistência abiótico acibenzolar-S-metil (ASM) e dos agentes bióticos, proteína harpina e glicoproteínas extraídas de duas espécies de Xanthomonas. Os indutores foram aplicados por aspersão nas folhas 72 h antes da inoculação com Xanthomonas axonopodis pv. passiflorae. Os indutores foram também aplicados em sementes por imersão e a inoculação foi realizada quando as plântulas apresentaram quatro folhas verdadeiras. Os resultados mostraram que o ASM conferiu proteção de até 70% na concentração de 12,5 µg i.a. mL-1, enquanto que a proteína harpina proporcionou um aumento dos sintomas da bacteriose. As glicoproteínas de Xanthomonas spp. conferiram proteção de até 72% nas plantas contra a bactéria. Nas plântulas provenientes de sementes tratadas com ASM ou proteína harpina houve proteção de até 90% e 47%, respectivamente, contra a mancha bacteriana. ASM ou glicoproteínas de Xanthomonas spp., quando aplicadas por aspersão em folhas, e ASM ou proteína harpina, quando aplicados em sementes, são potenciais indutores de resistência em maracujazeiro amarelo a X. axonopodis pv. passiflorae.

Resumo em Inglês:

Control of bacterial leaf spot of yellow passion fruit using the abiotic resistance inducer, acibenzolar-S-methyl (ASM), and the biotic agents, harpin protein and glycoproteins extracted from two Xanthomonas species, was evaluated. The inducers were applied by spraying the leaves 72 h before the inoculation with Xanthomonas axonopodis pv. passiflorae. The inducers were also applied by seed immersion and the inoculation was performed when the seedlings had four true leaves. The results showed that ASM conferred a protection up to 70% at the concentration of 12.5 µg a.i. mL-1, while harpin led to an increase in bacterial symptoms. The glycoproteins from Xanthomonas spp. conferred up to 72% protection in plants against the bacterium. ASM or harpin provided up to 90% and 47% protection, respectively, in yellow passion fruit seedlings raised from treated seeds. Thus, leaf treatment with ASM or the glycoproteins from Xanthomonas spp. and seed treatment with ASM or harpin are potent inducers of resistance in passion fruit plants against X. axonopodis pv. passiflorae.

Resumo em Português:

As plantas estão expostas a agentes externos bióticos e abióticos que podem produzir dano nas celulas. Os agentes bióticos incluem moléculas produzidas por patógenos e os agentes abióticos incluem radiação ultravioleta, metais pesados e os agentes xenobióticos como os herbicidas. Devido à importancia do estresse abiotico e o limitado conhecimiento sob as respostas de defensa das plantas ao estresse, este estudo foi feito usando a citometría de fluxo para avaliar os eventos endocelulares de duas espécies de tomate: Lycopersicon hirsutum e Lycopersicon esculentum depois da exposição a 10 mM CuCl2 e 1% do paraquat. Durante os primeiros 30 min da exposição ao CuCl2 os valores da intensidade média da fluorescência em ambas as espécies diminuiu mais do 50% quando comparado com os controles não tratados. No caso do tratamento com o paraquat, depois dos primeiros 30 minutos a produção das espécies reativas do oxigênio, (avaliada pela presença do ânion superóxido) na espécie L. hirsutum e L. esculentum foi de 32,9% e 25,4%, respectivamente. A hiperpolarização das mitocôndrias das duas espécies do tomate foi observada durante as 2 primeiras horas. A ausência de dano no início ao nível da membrana e os efeitos adversos na mitocôndria causados pelos tratamentos sugerem que poda haver mecanismos adicionais que levam à morte celular, e que estes mecanismos podem estar associados à apoptose.

Resumo em Inglês:

Plants are often exposed to external biotic or abiotic agents that can damage cells. Biotic agents include molecules produced by pathogens, and abiotic agents include ultraviolet radiation, heavy metals and xenobiotic agents such as herbicides. Because of the importance of abiotic stresses and the limited knowledge of the defense responses of plants to stresses, a study was conducted using flow cytometry to evaluate endocellular events in protoplasts of two tomato species, Lycopersicon hirsutum and Lycopersicon esculentum, following exposure to 10 mM CuCl2 and 1% paraquat. During the first 30 min of exposure to 10 mM CuCl2, mean fluorescence intensity values in both species decreased by more than 50% compared to the untreated control. During the first 30 min of paraquat treatment, the production of reactive oxygen species, evaluated as the incidence of protoplasts in which the superoxide anion was present, was 32.9 % and 25.4%, respectively, for L. hirsutum and L. esculentum. Hyperpolarization of the mitochondria for both tomatoes species was observed during the first 2 h. The absence of early membrane damage and the markedly detrimental effects of the treatments on the mitochondria suggest that additional mechanisms which lead to cell death may be involved in these processes, and that these mechanisms may be associated with apoptosis.

Resumo em Português:

Quarenta e quatro populações de Meloidogyne spp. provenientes de amostras de raízes de quivi, coletadas em pomares e viveiros do Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, foram caracterizadas bioquimicamente utilizando-se a isoenzima esterase (Est). Meloidogyne arenaria Est A2 (Rm: 1,20, 1,28) foi a espécie mais frequente e ocorreu em 66,65% das amostras. M. ethiopica com fenótipo Est E3 (Rm: 0,92, 1,10, 1,30) foi detectada em 16,66% das amostras, ocorrendo sempre em associação com outras espécies do gênero. Também foram identificadas M. javanica Est J3 (Rm: 1,00, 1,21, 1,35), M. hapla Est H1(Rm: 1,17), M. incognita Est I1 (Rm: 1,03) e Est I2 (Rm: 1,03, 1,10) em 29,9%, 16,66%, 3,33% e 9,79% das amostras, respectivamente. Uma única população atípica de Meloidogyne sp. (3,33%) com o fenótipo Est L3 (Rm: 1,00, 1,10, 1,30) foi detectada, porém nesse caso, não foi possível identificar a espécie com segurança, mesmo quando se recorreu a analise da configuração perineal das fêmeas.

Resumo em Inglês:

Forty-four populations of Meloidogyne spp. obtained from a root-knot nematode survey on kiwi (Actinidia deliciosa) orchards and nurseries in Rio Grande do Sul State were characterized biochemically using esterase isoenzyme (Est). Meloiodgyne arenaria Est A2 (Rm: 1.20, 1.28) was the most frequent species detected in this survey, occurring in 66.65% of the samples. Meloiodgyne ethiopica, with the phenotype E3 (Rm: 0.92, 1.10, 1.30) was detected in 16.66% of the samples in association with other Meloidogyne species. Other species found were M. javanica Est J3 (Rm: 1.00, 1.21, 1.35), M. hapla Est H1 (Rm: 1.17), M. incognita I1 (Rm: 1.03) and I2 (Rm: 1.03, 1.10) identified in 29.9%, 16.66%, 3.33% and 9.79% of the samples, respectively. Only one atypical population presenting the phenotype L3 (Rm: 1.00, 1.10, 1.30) occurred in one orchard (3.33%) but its identification was not possible even through the examination of the perineal patterns of females.

Resumo em Português:

Este trabalho teve por objetivo caracterizar os possíveis mecanismos de antagonismo responsáveis pelo biocontrole da murchade-esclerócio e os fatores envolvidos na promoção de crescimento de tomateiro por rizobactérias selecionadas. As rizobactérias foram caracterizadas por meio da utilização de fontes de carbono, perfil de ácidos graxos e sequenciamento do 16S rDNA amplificado, enquanto os mecanismos de biocontrole e promoção do crescimento analisados através de indicadores bioquímicos e bioensaios. As rizobactérias agruparam-se com os gêneros Agrobacterium e Kluyvera. Os resultados indicam que a competição por ferro e antibiose são os possíveis mecanismos responsáveis pela capacidade de biocontrole da murcha-de-esclerócio exercida por essas rizobactérias, assim como a produção de auxinas e a fixação biológica de nitrogênio podem explicar a promoção do crescimento das plantas. Também foram demonstradas limitações do controle biológico, em função da capacidade de competição depender do isolado de Sclerotium rolfsii e, da antibiose, da composição nutricional do meio de crescimento.

Resumo em Inglês:

This study was conducted to elucidate the possible mechanisms responsible for the biocontrol of southern blight and the elements involved in tomato growth promotion by selected rhizobacteria. The rhizobacteria were characterized by carbon source utilization, fatty acid profiles, and 16S rDNA sequencing, while biocontrol mechanisms were investigated using biochemical indicators and bioassays. The rhizobacteria clustered within Agrobacterium and Kluyvera. The results indicated that iron competition and antibiosis are mechanisms that explain the biocontrol capability of southern blight by rhizobacteria. In the same way, auxin production and biological nitrogen fixation can explain growth promotion. Limitations of biological control were demonstrated because the competition capability is strain-specific for Sclerotium rolfsii, and antibiosis depends on the nutritional composition of growth media.

Resumo em Português:

A mela, causada pelo fungo Thanatephorus cucumeris (anamorfo Rhizoctonia solani grupo de anastomose 1 IA) é uma das principais doenças do feijão-caupi (Vigna unguiculata) na região norte. Não há estudos sobre o efeito de parâmetros epidemiológicos no desenvolvimento da doença em condições controladas. Os objetivos deste trabalho foram definir efeito do tipo e da concentração de inóculo de R. solani, do(s) estádio(s) do feijão-caupi suscetível(is) e do período de molhamento foliar na severidade da doença em casa-de-vegetação. No primeiro experimento testou-se o efeito do tipo de inóculo [fragmentos de micélio (fgm) ou microescleródios]; no segundo experimento testou-se as concentrações de 0,10³,10(4),10(5) e 10(6) fgm.mL-1; no terceiro experimento as plantas foram submetidas aos períodos de 0, 6, 12, 24 e 48 horas de câmara úmida após a inoculação e no quarto experimento inoculou-se plantas nos estádios de folhas primárias, folhas trifoliadas, de floração e de enchimento de vagens. Observou-se que, para desenvolvimento de alta severidade da mela do feijão-caupi as plantas devem ser inoculadas no estádio de flores abertas na concentração de 10(6) fgm.mL-1 e submetidas a seis horas de molhamento foliar. Estes parâmetros podem ser utilizados para definição de uma metodologia de inoculação de R. solani em feijão-caupi em condições controladas.

Resumo em Inglês:

Web blight caused by the fungus Thanatephorus cucumeris (Rhizoctonia solani anastomosis group 1 IA ) is one of the most important diseases of cowpea (Vigna unguiculata) in the north of Brazil. There is no information about the effect of epidemiological parameters on development of the disease under controlled conditions. The aims of this work were to identify the type and inoculum concentration of R. solani, the susceptible phenological states and the leaf wetness periods for disease development in greenhouse conditions. In the first study we tested the use of mycelia fragments (mf) and sclerotia as source of inoculum; in the second experiment, the effect of different inoculum concentrations (0, 10³, 10(4),10(5) and 10(6) mf.mL-1); in the third experiment, the effect of leaf wetness period was tested by maintaining cowpea plants at 0, 6, 12, 24 and 48 hours of leaf wetness after the inoculation, and in the last experiment the effect of phenological states was tested by inoculating cowpea plants at the stages of cotyledonal leaf, trifoliate leaves, flowering and pod filling. The highest severity values of disease were observed with the plants inoculated in the flowering phenological state with 10(6) mf.mL-1 and six hours of leaf wetness. These parameters can be utilized to establish an inoculation methodology for R. solani on cowpea plants under controlled conditions.

Resumo em Espanhol:

En varias zonas de Costa Rica se observaron árboles de guácimo (Guazuma ulmifolia, Sterculiaceae) con síntomas de escoba de bruja (GWB), hoja pequeña, acortamiento de entrenudos, dando al árbol un aspecto general de enanismo. La infección por fitoplasmas en los árboles de guácimo se evaluó mediante microscopia electrónica de transmisión (TEM), análisis moleculares del 16S rDNA mediante PCR anidado, RFLP´s, secuenciación y filogenia. En la TEM, los fitoplasmas se observaron sólo en las células del floema de los árboles sintomáticos. La infección se confirmó por PCR anidada, los productos amplificados de aproximadamente 1,2 kb se obtuvieron para todas las muestras sintomáticas evaluadas. El análisis de RFLP generó patrones idénticos entre las muestras con GWB y mostró relación de este fitoplasma con el de la "escoba de bruja del hibisco" (16SrXV). La secuencia de ADNr 16S (1460 nt) de los productos obtenidos por PCR semi-anidado (P1A/16S-SR) de dos muestras de GWB mostraron 98,8% de similitud con "Candidatus Phytoplasma brasiliense" (GenBank, registro AF147708). El patrón RFLP virtual reveló 95% de similitud con el grupo 16Sr XV-A (AF147708), lo que sugiere que el fitoplasma GWB puede representar un nuevo subgrupo dentro del 16Sr XV. Este es el primer informe de un fitoplasma infectando a la especie neotropical G. ulmifolia y de la ocurrencia natural de un fitoplasma estrechamente relacionado con "Ca. Phytoplasma brasiliense" en Costa Rica

Resumo em Inglês:

Guacimo trees (Guazuma ulmifolia, Sterculiaceae) showing witches' broom symptoms (GWB), small leaves, short internodes, stunting and no flower and fruit production were observed on side roads and fences in different areas of Costa Rica. The occurrence of phytoplasma infection in GWB trees was evaluated by transmission electron microscopy (TEM), and by molecular analyses based on 16S rDNA: nested-PCR/RFLP, sequencing and phylogenetics. Phytoplasmas were observed only in the sieve cells of symptomatic trees by TEM. The infection was confirmed by nested-PCR; amplicons of about 1.2 kb were obtained from all DNA samples from symptomatic trees. The RFLP analysis generated patterns identical among GWB samples and showed a relationship of this phytoplasma to hibiscus witches' broom group (16SrXV). The 16S rDNA sequence (1460 nt), obtained from the P1A/16S-SR semi-nested-PCR products of two phytoplasma strains, shared 98.8% similarity with 'Candidatus Phytoplasma brasiliense' (GenBank accession: AF147708). The virtual RFLP pattern indicated a similarity coefficient of 0.95 with 16Sr group XV-A (AF147708), suggesting that the GWB phytoplasma may represent a new subgroup within this group. This is the first report of a phytoplasma infecting the neotropical tree species G. ulmifolia and the natural occurrence of a phytoplasma strain closely related to 'Ca. Phytoplasma brasiliense' in Costa Rica.

Resumo em Português:

Senna macranthera é uma árvore tropical nativa do Sudeste e Nordeste brasileiro. Em julho de 2006, sintomas de manchas cloróticas nas folhas jovens e de mosaico leve nas folhas mais velhas foram observados em plantas de S. macranthera em Viçosa, Estado de Minas Gerais, Brasil. A observação de preparações "leaf-dip" em microscópio eletrônico de transmissão revelou a presença de partículas alongado-flexuosas. O RNA viral foi extraído de vírions purificados e utilizado como molde para RT-PCR e clonagem de fragmentos do genoma viral. Dois fragmentos (0,9 kb e 2,0 kb de tamanho) foram clonados. A análise da sequência do fragmento de 0,9 kb indicou que este corresponde à região codificadora da proteína NIb de um potyvírus, com 72% de identidade de nucleotídeos com o Pepper mottle virus (PepMoV) e Peru tomato mosaic virus (PTV), enquanto a análise do fragmento de 2,0 kb indicou que este corresponde à ORF que codifica a possível replicase de um vírus classificado na recém-estabelecida ordem Tymovirales, com 74% de identidade de nucleotídeos com o Garlic virus A (GarV-A). Com base na análise molecular e na gama de hospedeiros, conclui-se que os fragmentos virais clonados representam novas espécies, para as quais sugerem-se os nomes Senna virus Y (gênero Potyvirus, família Potyviridae) e Senna virus X (ordem Tymovirales, gênero não definido).

Resumo em Inglês:

Senna macranthera is a common tropical tree native to South- and Northeastern Brazil. In July 2006, symptoms of chlorotic spots in the young leaves and mild mosaic in the old leaves were observed in S. macranthera trees at Viçosa, State of Minas Gerais, Brazil. Electron microscopy examination of leaf dip preparations from the young leaves revealed the presence of flexuous rods. Viral RNA was extracted from purified virion preparations and used as a template for the RT-PCR-based cloning of viral genomic fragments. Two fragments (0.9 kb and 2.0 kb in length) were cloned. Sequence analysis of the 0.9 kb fragment indicated that it corresponded to the NIb coding region of a potyvirus, with nucleotide (nt) identity level of 72% for Pepper mottle virus (PepMoV) and Peru tomato mosaic virus (PTV), while analysis of the 2.0 kb fragment indicated that it corresponded to the putative replicase ORF, which displayed 74% nt identity with the ORF1 (replicase) of Garlic virus A (GarV-A). Based on molecular analysis and the isolates' host range, it is concluded that the viral fragments represent new viruses, for which we propose the names Senna virus Y (genus Potyvirus, family Potyviridae) and Senna virus X (unassigned genus, order Tymovirales).

Resumo em Português:

O comovírus Cowpea severe mosaic virus (CPSMV) causa a doença em feijão-caupi (Vigna unguiculata) conhecida como mosaico severo, mas, apesar de sua importância, não há estudos de diversidade genética de populações virais. Foram determinadas as sequências nucleotídicas de parte do gene da proteína do capsídeo (CP) de seis isolados brasileiros de CPSMV. Os fragmentos genômicos (521 nucleotídeos) foram amplificados por RT-PCR, clonados e suas sequências foram comparadas entre si e com as sequências de outros comovírus. As comparações de sequências indicaram um elevado grau de conservação para o gene CP, com identidade de 92-100% (nucleotídeos) e 97-100% (aminoácidos) entre os isolados. Não houve correlação entre origem geográfica e identidade de sequência ou filogenia entre os isolados.

Resumo em Inglês:

The comovirus Cowpea severe mosaic virus (CPSMV) causes a disease in cowpea (Vigna unguiculata) but, despite its importance, there are no studies on the genetic diversity of viral populations. We have determined the nucleotide sequences of part of the coat protein (CP) gene of six Brazilian isolates of CPSMV. Genomic fragments (521 nucleotides) were RT-PCR amplified, cloned, and their sequences were compared with each other and with other comoviruses. Sequence comparisons indicated a high degree of conservation for the CP gene, with 92-100% nucleotide and 97-100% amino acid sequence identity among the isolates. There was no correlation between geographical origin and sequence identity or phylogeny among the isolates.

Resumo em Português:

Pratylenchus jaehni tem sido relatado como o principal nematoide causador de perdas em cítricos no Brasil. Considerando os relatos de semelhanças e diferenças observadas entre populações da espécie, avaliou-se a reação hospedeira de porta-enxertos cítricos frente à população K5 de P. jaehni, com o objetivo de comparar com aquela observada na literatura para topótipos da espécie. Foram realizados dois experimentos, com populações iniciais de 180 e 200 espécimes por planta, respectivamente. Em cada experimento, a avaliação foi realizada em dois períodos: no experimento 1 aos 120 e 245 dias após a inoculação (DAI), e no experimento 2 aos 60 e 240 DAI. As variáveis mensuradas foram o fator de reprodução [FR = população final (Pf) /Pi] e o número de nematoides por grama de raízes (N/g). A população do nematoide foi reduzida (FR = 0,00 a 0,02) em trifoliata 'Limeira', laranja-azeda, citrange 'Carrizo', tangerina 'Cleópatra', tangerina 'Sunki', limão 'Volkameriano' e citrumelo 'Swingle'; mas ocorreu aumento populacional (FR = 1,89 a 22,28) no limão-cravo em ambas avaliações do experimento 1 e na segunda avaliação do experimento 2. A reação de cada porta-enxerto cítrico avaliado quanto à população K5 foi muito semelhante àquela, relatada na literatura, para topótipos (C1) de P. jaehni.

Resumo em Inglês:

Pratylenchus jaehni has been reported as the main nematode in Brazilian citrus orchards due to the economic losses it causes. Considering the reports of differences and similarities in populations from that species, the host reaction of citrus rootstocks to K5 population of P. jaehni was evaluated and compared with topotypes of the species. Two experiments were carried out with initial population (Pi) of 180 and 200 specimens per plant. In each experiment, the evaluation was carried out in two periods: at 120 and 245 days after inoculation (DAI) in experiment 1 and at 60 and 240 DAI in experiment 2. The variables obtained were the reproduction factor [RF = final population (Pf)/Pi)] and nematodes per gram of roots (N/g). The nematode density was reduced (RF = 0.00 to 0.02) in trifoliata 'Limeira', sour orange, citrange 'Carrizo', 'Cleopatra' tangerine, 'Sunki' tangerine, 'Volkameriano' lemon and citrumelo 'Swingle'; but the nematode density increased (RF = 1.89 to 22.28) in Rangpur lime in both periods of experiment 1 and in the second period of experiment 2. Therefore, the host reaction of citrus rootstocks to K5 was very similar to that reported to topotypes of P. jaehni in the literature.