Abstracts
The distribution of the surface proteins of toxoplasma gondii radiodinated were studied using the phase separation technique and ability of binding in the phenyl-Sepharose column. Eight polypeptides with Mr 22 to 180 distributed exclusively in the detergent rich-phase, while six polypeptides with mol. wt. 15,000 to 76,000 distributed exclusively in the detergent poor-phase. Twopolypeptides with 15,000 and 70,000 distributed on both phase. All the polypeptides present in the detergent rich-phase binding in the phenyl-Sepharose column, and can be isolated in two peak according with their relative hydrophobicities.two polypeptides hydrophobic with Mr 60 and 66 recognized by human serum were isolated by the association of the two technique. Our result showed that the surface proteins of t. gondii present different degrees of hydrophobicity and that the use of hydrophobic interaction chromatography after Triton X-114 extraction may be an important isolation method of membrane proteins.
Toxoplasma gondii; Triton X-114; hydrophobicities; membrane proteins; hydrophobic chromatography
A distribuição das proteínas superficiais de Toxoplasma gondii radiodinadas, foram estudadas usando a técnica de separação de fases e a capacidade de ligação em coluna de fenil-Sepharose. Oito polipeptídeos com peso molecular entre 22 e 180.000 distribuíram-se exclusivamente na fase rica em detergente enquanto seis polipeptídeos com PM entre 15.00 e 76.000 distribuíram-se exclusivamente na fase pobre em detergente. Dois polipeptídeos com 15.00 e 70.000 distribuem-se em ambas as fases. Todos os polipeptídeos presentes na fase rica em detergente foram retidos por coluna de fenil-Sepharose e isolados em dois picos de acordo com sua hidrofobicidade relativa. Dois polipeptídeos hidrofóbicos com PM 60.000 e 66.000 reconhecidos por soro humano, foram isolados pela associação das duas técnicas. Os nossos resultados mostram que as proteínas de superfície do T. gondii possuem diferentes graus de hidrofobicidade e que o emprego da cromatografia de interação hidrofóbica após extração com Triton X-114, pode ser um importante método de isolamento de proteínas de membrana.
Toxoplasma gondii; Triton X-114; hidrofobicidade; proteínas de membrana; cromatografia hidrofóbica
Analysis of toxoplasma gondii proteins after Triton X-114 solubilization and hidropholic chromotograhy
Salvatore Giovanni De Simone1
Helena C. B. Guedes1
Izidro Bendet1
Instituto Oswaldo Cruz, Departamento de Imunologia, Rio de Janeiro, Brasil
The distribution of the surface proteins of toxoplasma gondii radiodinated were studied using the phase separation technique and ability of binding in the phenyl-Sepharose column. Eight polypeptides with Mr 22 to 180 distributed exclusively in the detergent rich-phase, while six polypeptides with mol. wt. 15,000 to 76,000 distributed exclusively in the detergent poor-phase. Twopolypeptides with 15,000 and 70,000 distributed on both phase. All the polypeptides present in the detergent rich-phase binding in the phenyl-Sepharose column, and can be isolated in two peak according with their relative hydrophobicities.two polypeptides hydrophobic with Mr 60 and 66 recognized by human serum were isolated by the association of the two technique. Our result showed that the surface proteins of t. gondii present different degrees of hydrophobicity and that the use of hydrophobic interaction chromatography after Triton X-114 extraction may be an important isolation method of membrane proteins.
A distribuição das proteínas superficiais de Toxoplasma gondii radiodinadas, foram estudadas usando a técnica de separação de fases e a capacidade de ligação em coluna de fenil-Sepharose. Oito polipeptídeos com peso molecular entre 22 e 180.000 distribuíram-se exclusivamente na fase rica em detergente enquanto seis polipeptídeos com PM entre 15.00 e 76.000 distribuíram-se exclusivamente na fase pobre em detergente. Dois polipeptídeos com 15.00 e 70.000 distribuem-se em ambas as fases. Todos os polipeptídeos presentes na fase rica em detergente foram retidos por coluna de fenil-Sepharose e isolados em dois picos de acordo com sua hidrofobicidade relativa. Dois polipeptídeos hidrofóbicos com PM 60.000 e 66.000 reconhecidos por soro humano, foram isolados pela associação das duas técnicas. Os nossos resultados mostram que as proteínas de superfície do T. gondii possuem diferentes graus de hidrofobicidade e que o emprego da cromatografia de interação hidrofóbica após extração com Triton X-114, pode ser um importante método de isolamento de proteínas de membrana.
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Publication Dates
-
Publication in this collection
24 June 2009 -
Date of issue
Dec 1988