Acessibilidade / Reportar erro

Preparação, estabilidade e conservaçao do fator tecidual ativador de plasminogênio (rt-PA) para uso oftalmológico

Preparation, stability and storage of tissue plasminogen activator for ophthalmological purpose

RESUMO

Introdução:

O fator tissular ativador do plasminogênio, um componente do sistema fibrinolítico, ativa o plasminogênio em plasmina, que degrada a rede de fibrina. O t-PA recombinante (rt-PA) tem sido utilizado em oftalmologia para diminuir as complicações fibrino-proliferativas pós-operatórias. A preparação comercial excede a dose preconizada para uso oftalmológico e o custo por injeção poderia ser reduzido se o produto fosse dividido em doses.

Objetivo:

Avaliar se o rt-PA, para uso cardiológico, pode ser diluido e utilizado em oftalmologia, se a atividade é mantida após estocagem e, eventualmente determinar quais os melhores métodos de estocagem e de utilização.

Materiais e métodos:

Este trabalho estudou a atividade inicial do rt-PA em placa de fibrina, a atividade residual, após 6 meses de conservação em freezer à -20ºC e à -70ºC; e ainda a esterilidade do material.

Resultados:

A atividade residual após 6 meses de conservação em freezer à -70ºC foi 40,7% da atividade inicial e em congelador de geladeira à -20ºC foi 34,9%. Se descongelado e deixado à temperatura ambiente 24 horas antes de ser testado a atividade residual cai para 27,9%.

Conclusão:

O rt-PA manteve-se estéril após 6 meses, independente da forma de estocagem. A melhor forma de conservação foi o freezer à -70ºC. A utilização do rt-PA deve ser portanto imediata após o descongelamento.

Palavras-chave:
Fator tecidual ativador de plasminogênio (t-PA); Fibrilólise; Fibrina; Inflamação

SUMMARY

Introduction:

The tissue plasminogen activator (t-PA), a fibrinolitic system component, activates the plasminogen into plasmin, which degrades the fibrin net. The recombinant tissue plasminogen activator has been used in ophthalmology to control the post-operative fibrin formation complications. The comercial t-PA available has a higher dose than necessary in ophthalmology. If it can be shared in doses the coasts will reduced.

Purpose:

To check if the comercial rt-PA, for cardiologic use, can be, diluted and used in ophthalmology, and if the activity remains after storage, and eventualy determine the best storage and utilization methods.

Material and methods:

The rt-PA initial lytic activity was studied on fibrin net substract, and residual activity after long term storage at -20ºC and -70ºC. The material sterility was tested in culture plates.

Results:

The rt-PA activity after 6 months storage at -70ºC was 40,7% of non storage rt-PA activity, and at -20ºC it was 34,9%. Samples kept at -20ºC for 6 months and then left at roam temperature 24 hours before testing, showed an activity of 27,9%. No contamination was found in any sample.

Conclusion:

The best way tested of storage rt-PA is at -70ºC. And in arder to keep the total potential activity, it should be used immediately after defrost.

Key works:
Tissue plasminogen activator; fibrinolysis; fibrin; inflamation

Texto completo disponível apenas em PDF.

  • Departamento de Oftalmologia da Universidade Federal de São Paulo - Escola Paulista de Medicina

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

  • 1
    AGNELLI, G.; BUCHANAN, M.; FERNANDEZ, F.; BONEU, B.; VAN RYN, J.; HIRSH, J., COLLEN, D. - A comparison of the thrombolytic and hemorrhagic effects of the tissue-type plasminogen activator and streptokinase in rabbits. Circulation, 72: 178-182, 1985.
  • 2
    BOLDT, H. C.; ABRAMS, G. W.; MURRAY, T. G.; HAN, D. P.; MIELER, W.F.- The lowest effective dose of tissue plasminogen activator for fibrinolysis of postvitrectomy fibrin. Retina, 12: S75-S79, 1992.
  • 3
    CRABBE, S. J. & CLONINGER, C. C. - Tissue plasminogen activator: A new trombolytic agent. Clin Pharm. 6: 373-386, 1987.
  • 4
    DAVIDSON, J. F.& WALKER. I. D. - Biological role of fibrinolysis.J. Clin. Pathol., 33: 1-47, 1980.
  • 5
    IRVINE, W. D.; JOHNSON, M. W.; HERNANDEZ, E.; OLSEN, K. - Retinal Toxicity of Human Tissue Plasminogen Activator in Vitrectomized Rabbit Eyes. Arch Ophthalmol, 109: 718-722, 1991.
  • 6
    JAFFE, G. J.; GREEN, G. D. J., ABRAMS, G. W. - Stability of recombinant tissue plasminogen activator. Am. J. Ophthalmol, 108: 90-91, 1989.
  • 7
    PENNICA, D.; HOLMES. W. E.; KOHR, W. J.; HARKINS, R. N.; VEHAR, G. A.; WARD, C. A.; BENNETT, W. F.; YELVERTON, E.; SEEBURG, P.; HEYNEKER, H. L.; GOEDDEL, D. V. - Cloning and expression of human tissue-type plasminogen activator cDNA in E. coli. Nature, 301: 214-221, 1983.
  • 8
    RIJKEN, D. C. & COLLEN, D.: Puritication and characterization of the plasminogen activator secreted by human melanoma cells in culture. J. Biol. Chem., 256: 7035-7041, 1981.

Datas de Publicação

  • Publicação nesta coleção
    Feb 1997
Conselho Brasileiro de Oftalmologia Rua Casa do Ator, 1117 - cj.21, 04546-004 São Paulo SP Brazil, Tel: 55 11 - 3266-4000, Fax: 55 11- 3171-0953 - São Paulo - SP - Brazil
E-mail: abo@cbo.com.br