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Estandarizacion y evaluacion de un enzimoinmunoensayo para diagnostico y seroepidemiologia de triquinosis humana

Standardization and evaluation of an enzyme immunoassay for diagnosis and seroepidemiology of human trichinosis

Resúmenes

Se estandarizó un enzimoinmunoensayo (EIE) en fase sólida en el que se empleó un antígeno soluble total de T. spiralis y una dilución única de suero, y se evaluó la capacidad del sistema para detectar anticuerpos totales antitriquina con fines diagnósticos y seroepidemiológicos. Las curvas dosis respuesta mostraron que trabajando con una dilución de suero de 1:100 se obtenía una buena diferenciación entre sueros de indivíduos no infectados y pacientes de triquinosis con baja concentración de anticuerpos circulantes y la respuesta fue lineal entre valores de 0.15 y 0.64 unidades de densidad óptica (DO). El estúdio de 720 sueros de población general no infectada revelo una X k = 0.07 y una S = 0.03 unidades de DO. El 98,61% de esta población presentó valores de DO < X k + 3S; el 1,25% valores de DO entre > X k + 3S y < X k + 4S; y el 0.14% restante valores entre > X k + 4S y < X k + 5S. Se empleó un valor de DO = X k + 5S como nivel diagnóstico para estudiar 4 brotes de triquinosis humana, 80 sueros de pacientes de triquinosis con diferentes títulos en inmunofluorescencia indirecta (IFI) y 20 sueros de pacientes de hidatidosis. El EIE propuesto permitió diferenciar en forma confiable y eficiente población infectada de no infectada y tuvo una buena correlación con la IFI. Todos los sueros de pacientes hidatídicos presentaron valores de DO < X k + 4S.

Triquinosis; Inmunodiagnóstico; Enzimoinmunoensayo


An enzyme immunoassay (EIA) in solid phase'in which a whole soluble Trichinella spiralis antigen and a single serum dilution were used was standardized and its capacity for detecting total anti-trichinella antibodies for diagnostic and seroepidemiological purpose was evaluated. Dose response curves showed that a working dilution of 1:100 permitted an adequate differentiation between trichinosis patients with low circulating antibodies concentration and non infected individuals; the response was linear between OD values of 0.15 and 0.64. A group of 720 sera from trichinosis free general population showed an arithmetic mean of OD values of 0.07 and a standard deviation of 0.03. OD values were < (X) + 3S in 98,1% of those sera; between > X k+ 3S and < X k + 4S in 1,25% and between > X k + 4S and < X k + 5S in the remaining 0.14%. An OD value = X k + 5S was used as a diagnostic criterion to study sera from four human trichinosis outbreaks; 80 sera from trichinosis patients with different immunofluorescence assay (IFA) titers, and 20 sera from hydatid patients. The proposed EIA differentiates sera from infected and non infected populations both efficiently and reliably. It also showed a good correlation with the IFA results. All sera from hydatid patients showed OD values < X k + 4S.


ARTIGO ORIGINAL

Emílio ColtortiI; Eduardo FernandezII; Graciela SantillánIII

ICentro Panamericano de Zoonosis, Programa de Salud Pública Veterinaria, Organización Panamericana de la Salud/Organización Mundial de la Salud, Casula de Correo 3092, Correo Central, 1000 Buenos Aires, Argentina

IILaboratório de Control de Patologia Prevalentes. Subsecretaría de Salud. Trelew, Chubut, Argentina

IIIDivisión de Inmunoparasitología, Instituto Nacional de Microbiología "Carlos G. Malbrán". Buenos Aires Argentina

RESUMEN

Se estandarizó un enzimoinmunoensayo (EIE) en fase sólida en el que se empleó un antígeno soluble total de T. spiralis y una dilución única de suero, y se evaluó la capacidad del sistema para detectar anticuerpos totales antitriquina con fines diagnósticos y seroepidemiológicos.

Las curvas dosis respuesta mostraron que trabajando con una dilución de suero de 1:100 se obtenía una buena diferenciación entre sueros de indivíduos no infectados y pacientes de triquinosis con baja concentración de anticuerpos circulantes y la respuesta fue lineal entre valores de 0.15 y 0.64 unidades de densidad óptica (DO). El estúdio de 720 sueros de población general no infectada revelo una X з = 0.07 y una S = 0.03 unidades de DO. El 98,61% de esta población presentó valores de DO < X з + 3S; el 1,25% valores de DO entre > X з + 3S y < X з + 4S; y el 0.14% restante valores entre > X з + 4S y < X з + 5S.

Se empleó un valor de DO = X з + 5S como nivel diagnóstico para estudiar 4 brotes de triquinosis humana, 80 sueros de pacientes de triquinosis con diferentes títulos en inmunofluorescencia indirecta (IFI) y 20 sueros de pacientes de hidatidosis. El EIE propuesto permitió diferenciar en forma confiable y eficiente población infectada de no infectada y tuvo una buena correlación con la IFI. Todos los sueros de pacientes hidatídicos presentaron valores de DO < X з + 4S.

Unitermos: Triquinosis, Inmunodiagnóstico, Enzimoinmunoensayo.

SUMMARY

An enzyme immunoassay (EIA) in solid phase'in which a whole soluble Trichinella spiralis antigen and a single serum dilution were used was standardized and its capacity for detecting total anti-trichinella antibodies for diagnostic and seroepidemiological purpose was evaluated. Dose response curves showed that a working dilution of 1:100 permitted an adequate differentiation between trichinosis patients with low circulating antibodies concentration and non infected individuals; the response was linear between OD values of 0.15 and 0.64. A group of 720 sera from trichinosis free general population showed an arithmetic mean of OD values of 0.07 and a standard deviation of 0.03. OD values were < (X) + 3S in 98,1% of those sera; between > X з+ 3S and < X з + 4S in 1,25% and between > X з + 4S and < X з + 5S in the remaining 0.14%.

An OD value = X з + 5S was used as a diagnostic criterion to study sera from four human trichinosis outbreaks; 80 sera from trichinosis patients with different immunofluorescence assay (IFA) titers, and 20 sera from hydatid patients. The proposed EIA differentiates sera from infected and non infected populations both efficiently and reliably. It also showed a good correlation with the IFA results. All sera from hydatid patients showed OD values < X з + 4S.

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AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecen al Sr. Roberto O. García por su esmerada colaboración técnica.

Recebido para publicação em 21/4/1987.

  • 1. AN, A. C. S.; KO, R. C; SIMON, J. W. RIDELL, M. J.; WONG, F. W. T. & TEMPLER, M. J. - Study of acute trichinosis in Ghurkas: specificity and sensitivity of enzyme-linked immunosorbent assays for IgM and IgE antibodies to Trichinella larval antigens in diagnosis. Trans. roy. Soc. trop. Med. Hyg., 72: 226-229, 1978.
  • 2. COLTORTI, E. A. - Evaluación de la inmunofluorescencia indirecta en el diagnóstico y la seroepidemiología de la triquinosis humana. Acta. Bioquim. clin. latinoamer., 15: 599-607, 1981,
  • 3. COLTORTI, E. A. - Standardization and evaluation of an enzyme immunoassay as a screening test for the seroepidemiology of human hydatidosis. Amer. J. trop. Med. Hyg., 35: 1000-1005, 1986.
  • 4. ENGVALL, A. & LJUMGSTROM, I. - Detection of human antibodies to Trichinella spiralis by enzyma-linked immunosorbent assay, Elisa. Acta path, microbiol. scand. Sect. C, 83: 231-237, 1975.
  • 5. FAUBERT, G. M.; PECHERE, J. C.; DELISLE, R.; SMITH, H. C. & BRINDLE, Y. - An outbreak of trichinellosis in Canada: "The enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and clinical findings". In: KIM, C. W.; RUITENBERG, E. J. & TEPPEMA, J. S., ed. - International Conference on Trichinellosis, 5., Noordwijk aan Zee, The Netherlands, 1960. Proceedings. Chertsey Surrey, Redbooks, 1981.
  • 6. GAMBLE, H. R.; ANDERSON, W. R.; GRAHAM, C. E. & MURRELL, K. D. - Diagnosis of swine trichinosis by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using and excretory-secretory antigen. Vet. Parasit., 13: 349-361, 1983.
  • 7. KHAMBOONRUANG, C. & THAMASONTHI, W. - Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) in patients infected with Trichinella spiralis. In: KIM, C W.; RUITENBERG, E. J. & TEPPEMA, J. S., ed. - International Conference on Trichinellosis, 5., Noordwijk aan Zee, The Netherlands, 1980. Proceedings. Chertsey, Surrey, Reedbooks, 1981.
  • 8. MURRELL, K. D.; ANDERSON, W. R.; SOHAD, G. A.; HANBURY, R. D.; KAZACOS, K. R.; GAMBLE, H. R. & BROWN, J. - Field evaluation of the enzyme-linked immunosorbent assay for swine trichinosis: efficacy of the excretory-secretory antigen. Amer. J. vet. Res., 47: 1046-1049, 1986.
  • 9. MATSUDA, H.; TANAKA, H.; BLAS, B. L.; NOSEÑAS, J. S.; TOKAWA, T. & OHSAWA, S. - Evaluation of ELISA "with AETS, 2-2' azino-di (3-ethyl-benzthiazoline sulfonic acid), as the substrate of peroxidase and its application to the diagnosis of schistosomiasis. Jap. J. exp. Med., 54: 131-133, 1984.
  • 10. RUITENBERG, E. J.; STEERENEERG, P. A. & BROSI, B. J. M. - Micro-system for the application of Elisa in the serodiagnosis of Trichinella spiralis infections Medikon Nederland, 4: 30-31, 1975.
  • 11. STROBEL, H. - Die Serodiagnostic der Trichinosis. Munch, mtd. Wschr., 58: 672-674, 1911.
  • 12. STUMPF, J.; UNDENTSCH, K. & LAUDGRAF, H. - Results of the clinical and serological diagnosis of an endemic of Trichinella spiralis. In: KIM, C. W.; RUITENBERG, E. J. & TEPPEMA, J. S., ed. - International Conference on Trichinellosis, 5., Noordwijk aan Zee, The Netherlands, 1980. Proceedings. Chertsey, Surrey, Reedbooks. 1981.
  • 13. VAN KNAPEN, F.; FRANCHIMONT, J. H.; RUITENBERG, E. J.; BALDELLI, B.; BRADLEY, J.; GIBSON, T. E.; GOTTAL, C; HENRIKSEN, S.- A.; KOHLER, G.; SKOVGAARD, M.; SOULE, C. & TAYLOR, S. M. - Comparison of the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) withe three other methods for the detection of Trichinella spiralis infections in pigs. Vet. Parasit., 7: 109-121, 1980.
  • 14. VAN KNAPEN F.; FRANCHIMONT, J. H.; VERDONK, A. R.; STUMPF, J. & UNDEUTSCH, K. - Detection of specific immunoglobulins (IgG, IgM, IgA, IgE) and total IgE levels in human Trichinosis by means of the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Amer. J. trop. Med. Hyg., 31: 973-976, 1982.
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    Standardization and evaluation of an enzyme immunoassay for diagnosis and seroepidemiology of human trichinosis
  • Fechas de Publicación

    • Publicación en esta colección
      17 Feb 2011
    • Fecha del número
      Dic 1987

    Histórico

    • Recibido
      21 Abr 1987
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