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• An. Esc. Super. Agric. Luiz de Queiroz 31 • 1974 • https://doi.org/10.1590/S0071-12761974000100042   copiar

Espécies de Aspergillus produtoras de aflatoxina, na região Araraquarense, SP

Aflatoxin producing species of Aspergilli in the region Araraquarense, SP, Brazil

Autoria SCIMAGO INSTITUTIONS RANKINGS

Resumos

No presente trabalho foram isoladas, e estudadas quanto à produção de aflatoxina, espécies do gênero Aspergillus, principalmente as linhagens de A. flavus ocorrentes na região Araraquarense. o isolamento, seguindo métodos usuais em microbiologia, foram executados em amostras de amendoim, provenientes de duas épocas do ano, ou seja, da safra das «águas» e da safra da «seca». Após o isolamento as culturas foram classificadas. Dessa classificação pôde-se obter: 102 culturas de A. flavus; 4 culturas de A. oryzae; var. effusus; 2 culturas de A. oryzae; 2 culturas de A. parasiticus e 1 cultura do Grupo A. ochraceus. Durante os trabalhos 4 culturas foram perdidas, dessa forma foram estudadas realmente 107 culturas. Todas as culturas, a seguir, foram estudadas para a verificação de sua habilidade em produzir aflatoxina. A extração da toxina foi feita no micélio e no meio de cultura, usando-se técnicas padrões. A separação dos metabólitos foi feita em placas de camada delgada de silicagel, usando-se como solvente o benzeno-acetato de etila-etnol e quantificadas sob luz ultra-violeta. Analisando-se as 107 culturas de Aspergillus, notou-se que apenas 33 delas (31%) produziram aflatoxina, sendo que destas, 4 produriram apenas no meio de cultura, enquanto que duas produziram aflatoxina apenas no micélio. Observando-se ainda o comportamento das culturas que produziram aflatoxina, verificou-se que a produção da toxina no micélio foi muito maior que no meio da cultura, algumas produzindo elevadas quantidades (até 400 ppm de B1 e 300 ppm de G1). 3) Uma percentagem razoável de amostras (65% na série A e 70% na série B) produziram aflatoxina em pelo menos uma das colônias isoladas. 4) Algumas colônias produziram elevada quantidade de aflatoxina, chegando a 400 ppm de Bi e 300 ppm de d. 5) Uma baixa proporção do total das colônias (31%) produziu aflatoxina. 6) Dentre as demais espécies de Aspergillus apenas uma colônia de A. oryzae produziu aflatoxina e mesmo assim, só no meio de cultura. 7) Não houve correlação entre a produção de aflatoxina no meio de cultura e no micélio (r = 0,027), porém houve uma correlação fortemente positiva entre a produção de aflatoxina Bx e Gx no meio de cultura (r = 0,988) e também no micélio (r = 0,826).

Species of the genus Aspergillus, mainly A. flavus strains, occuring in the Araraquarense region (State of São Paulo, Brazil), were isolated and their ability to produce aflatoxin was studied. The isolation was conducted following routine methods in microbiology. The cultures were obtained from samples of peanuts collected in the 'rainy season" and in the "dry season". After the isolation the cultures were classified as follows: 102 A. flavus; 4 A. oryzae var. effusus; 2 A. oryzae; 2 A. parasiticus and 1 A. ochraceus. During the work, 4 cultures were lost, remaining 107 cultures. The cultures were then tested in their ability to produce aflatoxin, which was extracted from the mycelium and from the culture medium. The metabolites were separated by thin layer chromatography using the solvent benzene-ethyl acetate-ethanol and quantified under long wave U. V. light. From 107 cultures of Aspergillus only 33 (31%) produced aflatoxin; seven of those produced it only in the culture medium, while two, only in the mycelium. The production of aflatoxin was much higher in the mycelium than in the culture medium; some of them produced very high quantities, up to 400 p.p.m. of B1 and 300 p.p.m. of G1. From the 33 cultures producing aflatoxin, 32 belonged to the A. flavus species and only one to the A. oryzae. Previous studies when high yields of aflatoxin G1 as related to B1 were reported in that region, were confirmed in the present work.

Espécies de Aspergillus produtoras de aflatoxina, na região Araraquarense, SP* * Agradecemos à FAPESP pelo auxílio financeiro concedido para a realização da pesquisa.

Aflatoxin producing species of Aspergilli in the region Araraquarense, SP, Brazil

Homero FonsecaI; Alcides Martinelli FilhoI; Humberto Del NeryI; Elisabeth RoncattoI

IDepartamento de Tecnologia Rural da ESALQ

IIBolsista pós-graduado da FAPESP junto ao Departº de Tecnologia Rural da ESALQ

IIIBolsista do CNPq junto ao Departº de Tecnologia Rural da ESALQ

RESUMO

No presente trabalho foram isoladas, e estudadas quanto à produção de aflatoxina, espécies do gênero Aspergillus, principalmente as linhagens de A. flavus ocorrentes na região Araraquarense.

o isolamento, seguindo métodos usuais em microbiologia, foram executados em amostras de amendoim, provenientes de duas épocas do ano, ou seja, da safra das «águas» e da safra da «seca».

Após o isolamento as culturas foram classificadas. Dessa classificação pôde-se obter: 102 culturas de A. flavus; 4 culturas de A. oryzae; var. effusus; 2 culturas de A. oryzae; 2 culturas de A. parasiticus e 1 cultura do Grupo A. ochraceus. Durante os trabalhos 4 culturas foram perdidas, dessa forma foram estudadas realmente 107 culturas.

Todas as culturas, a seguir, foram estudadas para a verificação de sua habilidade em produzir aflatoxina. A extração da toxina foi feita no micélio e no meio de cultura, usando-se técnicas padrões.

A separação dos metabólitos foi feita em placas de camada delgada de silicagel, usando-se como solvente o benzeno-acetato de etila-etnol e quantificadas sob luz ultra-violeta.

Analisando-se as 107 culturas de Aspergillus, notou-se que apenas 33 delas (31%) produziram aflatoxina, sendo que destas, 4 produriram apenas no meio de cultura, enquanto que duas produziram aflatoxina apenas no micélio.

Observando-se ainda o comportamento das culturas que produziram aflatoxina, verificou-se que a produção da toxina no micélio foi muito maior que no meio da cultura, algumas produzindo elevadas quantidades (até 400 ppm de B1 e 300 ppm de G1).

3) Uma percentagem razoável de amostras (65% na série A e 70% na série B) produziram aflatoxina em pelo menos uma das colônias isoladas.

4) Algumas colônias produziram elevada quantidade de aflatoxina, chegando a 400 ppm de Bi e 300 ppm de d.

5) Uma baixa proporção do total das colônias (31%) produziu aflatoxina.

6) Dentre as demais espécies de Aspergillus apenas uma colônia de A. oryzae produziu aflatoxina e mesmo assim, só no meio de cultura.

7) Não houve correlação entre a produção de aflatoxina no meio de cultura e no micélio (r = 0,027), porém houve uma correlação fortemente positiva entre a produção de aflatoxina Bx e Gx no meio de cultura (r = 0,988) e também no micélio (r = 0,826).

SUMMARY

Species of the genus Aspergillus, mainly A. flavus strains, occuring in the Araraquarense region (State of São Paulo, Brazil), were isolated and their ability to produce aflatoxin was studied.

The isolation was conducted following routine methods in microbiology.

The cultures were obtained from samples of peanuts collected in the 'rainy season" and in the "dry season".

After the isolation the cultures were classified as follows: 102 A. flavus; 4 A. oryzae var. effusus; 2 A. oryzae; 2 A. parasiticus and 1 A. ochraceus.

During the work, 4 cultures were lost, remaining 107 cultures.

The cultures were then tested in their ability to produce aflatoxin, which was extracted from the mycelium and from the culture medium.

The metabolites were separated by thin layer chromatography using the solvent benzene-ethyl acetate-ethanol and quantified under long wave U. V. light.

From 107 cultures of Aspergillus only 33 (31%) produced aflatoxin; seven of those produced it only in the culture medium, while two, only in the mycelium.

The production of aflatoxin was much higher in the mycelium than in the culture medium; some of them produced very high quantities, up to 400 p.p.m. of B1 and 300 p.p.m. of G1.

From the 33 cultures producing aflatoxin, 32 belonged to the A. flavus species and only one to the A. oryzae.

Previous studies when high yields of aflatoxin G1 as related to B1 were reported in that region, were confirmed in the present work.

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Full text available only in PDF format.

LITERATURA CITADA

Entregue para publicação em 27/12/1974.

  • ALLCROFT, R., R. B. A. CARNAGHAN, K. SARGEANT & J. O'KELLY, 1961 - A toxic factor in Brazilian groundnut meal. Vet. Rec. 74(31): 863-4.
  • ALLCROFT, R., H. ROGERS, G. LEWIS, J. NABNEY & P. E. BEST, 1966 - Metabolism of aflatoxin in sheep: excretion of the «milk toxin». Nature, 209:154-5.
  • AMLA, L., C. S. KAMALA, G. S. GOPALAKRISNA, A. P. JAYARAJ, V. SREENIVASA-MURTHY & H. A. B. PARPIA, 1971 - Cirrhosis in children from peanut meal contaminated by aflatoxin. Am. J. Clinical Nutr. 24(June): 609-14.
  • AUSTWICK, P. K. C. & G. AYERST, 1963 - Toxic products in groudnuts. Chem. Ind. (London), 2: 55-61.
  • BAILEY, W. S. & A. H. GROTH Jr., 1959 - The relationship of hepatitis «X» of dogs and moldy corn poisoning of swine. J. Am. Vet. Med. Assoc., 134: 514-6.
  • BARNES, J. M., 1967 - Toxic fungi with special reference to aflatoxin. Trop. Sci., 9: 64-74.
  • BLOUNT, W. P., 1961 - Turkey «X» disease. Turkeys, 9(2) : 52-67.
  • BORKER, E. F. INSALATA, C P. LEVI & J. S. WITZEMAN, 1966 - Mycotoxins in feeds and foods. Advan. Appl. Microbiol., 8: 315-351.
  • BURNSIDE, J. E., W. L. SIPPEL, J. FORGACS, W. T. CARLL, M. B. ATWOOD & E. R. DOLL, 1957 - A disease of swine and cattle caused by eating moldy corn. Am. J. Vet. Res., 18: 817-24.
  • COOMES, T. J. & A. J. FEUELL, 1965 - Recommended procedures for the detection and estimation of aflatoxin B1 in groundnuts and groundnut materials. Tropical Products Institute, Report G 13, Londres.
  • DAVIS, N. D. U. L. DIENER & D. W- ELDRIDGE, 1966 - Production of aflatoxin B1 and G1 by Aspergillus flavus in a semisynthetic medium. Appl. Microbiol. 15:1517-18.
  • DUTTON, M. F. & J. G. HEATHCOTE, 1966 - Two new aflatoxins. Biochem. J., 101(2):21-2.
  • DUTTON, M. F. & J. G. HEATHCOTE, 1969 - Some interesting relationship between the new aflatoxins and their associated metabolites. J. South Afr. Chem. Inst., XXII: 5107-5118.
  • FONSECA, H., 1968 - Contribuição ao estudo da ocorrência de aflatoxina em (tortas, farelos e farinhas de amendoim (Arachis hypogea L.) no Estado de São Paulo. Tese de Doutoramento, ESALQ-USP, Piracicaba, SP. 64 pp.
  • FONSECA, A., 1969 - Contribuição ao estudo da aflatoxina no amendoim (Arachis hypogaea L.) da colheita à industrialização. Tese de Livre-docência. ESALQ-USP, Piracicaba, SP., 98 pp.
  • FORGACS, J. & W. T. CARLL, 1962 - Mycotoxicosis. Advan. Vet. Sci., 7:273-382.
  • GOLBLATT, L. A., 1965 - Aflatoxin, Assoc. Food Drug. Off. Quant. Bull. V. S., 29: 58-69.
  • GOMES, F. P. 1970 - Curso de Estatística Experimental. 4.Ş Ed. Livraria Nobel, São Paulo, S. P.
  • HAN KUO, L. & Y. GIM SAY, 1966 - The occurence of aflatoxin in Malaysian imported oil cakes and groudnut kernels. The Malaysian Agr. J., 45: 232-44.
  • HARTLEY, R. D., B. F. NESBITT & O'KELLY, 1963. Toxic metabolits of Aspergillus flavus Nature, 198: 1056-58.
  • HESSELTINE, C. W., O. L. SHOTWELL, J. J. ELLIS, & R. D. STUBBLEFIELD, 1966 - Aflatoxin formation by Aspergillus flavus Bacteriol. Rev. 30(4): 795-805.
  • HODGES, F. A., J. R. ZUST, H. R. SMITH, A. A. NELSON, B. H. ARMBRECHT & A. D. CAMPBELL, 1964 - Mycotoxins: Aflatoxin isolated from Penicilium puberulum Science, 145: 1439.
  • HOLZAPFEL, C. W., P. S. STEYN & I. F. H. PURCHASE, 1966 - Isolation and structure of aflatoxins M1 and M2 Thetrahedron Letters, pp. 2799-2803.
  • KRAYBILL, F. H. & M. B. SHIMKIN, 1964 - Carcinogenesis related to foods contaminated by processing and fungal metabolites. Advan. Cancer Res., 8: 191-246.
  • KULIK, M. M. & C. E. HOLADAY, 1967 - Aflatoxin: a metabolite product of several fungi. Mycopathol. Mycol. Appl., 30: 137-40.
  • LEVITSKII, R. G. & V. B. KONIUKHOVA, V. B. 1947 - On the toxicity of feed contaminated with common fungi. Veterinaryia, 24:40-3.
  • MARTH, E. H., 1967 - Aflatoxin and other mycotoxins in agricultural products. J. Milk Food Technol., 30: 192-8.
  • MATELES, R. I. & G. N. WOGAN, 1967 - Aflatoxin. Advan. Microb. Physiol. 1:25.
  • PEERS, F. G., 1967 - Aflatoxin - A summary of recent work. Trop. Sci., 9: 186-203.
  • RAPER, K. B. & D. I. FENNEL (Eds.), 1965 - «The Genus Aspergillus». The Wiliams and Wilkins Co. Baltimore, E. U. A.
  • SARGEANT, K., A. SHERIDAN, J. O'KELLY & R. B. A. CARNAGHAN, 1961 - Toxicity associated with certain samples of groundnuts. Nature, 192:1096-7.
  • SCHOENTAL, R., 1967 - Aflatoxins. Ann. Rev. Pharmacol., 7: 343-56.
  • SCOTT, P. M., W. van WALBEEK & J. FORGACS, 1967 - Formation of aflatoxin by Aspergillus ostianus Wihmer. Appl. Microbiol., 15:945.
  • SHILO, U. M., 1940 - Toxic action of Aspergillus flavus in the animal body. Sbornik Trudov Kharkowskogo Inst., 19: 63-73.
  • SKAU, D. B., 1965 - Bibliography on aflatoxin from 1960. U. S. Dept. Agr. ARS. SURDD, N. Orleans, E. U. A. 36 pp.
  • SNEDECOR, G. W., 1956 - «Statistical Methods). The Iowa State College Press, Ames, Ia. E. U. A. 5.Ş Ed., 534 pp.
  • SPENSLEY, P. C. 1963 - Aflatoxin, the active principle in turkey «X» disease. Endeavour, 22: 75-9.
  • van WALBEEK, W., P. M. SCOTT, & F. S. THATCHER, 1968 - Mycotoxins from food borne fungi. Can. J. Microbiol., 14: 131-7.
  • WILDMAN, J. D., L. STOLOFF & R. JACOBS, 1967 - Aflatoxin production by a potent. Aspergillus flavus Link isolate. Biotechnol. Bio Eng., 9: 429-37.
  • WOGAN, G. N., 1965 - Experimental toxicity and carcinogenicity of aflatoxins. Em: G. N. Wogan (Ed.): «Mycotoxins in Foodstuffs». M. I. T. Press, Cambridge, Mass., E. U. A. 291 pp.
  • YOKOTSUKA, T., M. SASAKI, T. KIKUCHI, Y. ASAO & A. NOBUHARA, 1967 - Production of fluorescent compounds other than aflatoxins by Japanese industrial molds. Em: R. I. Mateles & G. N. Wogan (Eds.): «Biochemistry of Some Foodborne Microbial Toxins». The M. I. T. Press, Cambridge, Mass. E. U. A.
  • ZUCKERMAN, A. J. & F. FULTON, 1966 - Acute toxic effects of aflatoxin on human embryo liver cells in culture. Brit. Med. J., 2: 90-1.
  • *
    Agradecemos à FAPESP pelo auxílio financeiro concedido para a realização da pesquisa.

    • Datas de Publicação

    • Publicação nesta coleção
      29 Maio 2012
    • Data do Fascículo
      1974
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