Estudo molecular dos alelos DI A/DI B e da banda 3-Memphis na população brasileira

Molecular study of the DI A / DI B and Memphis band 3 alleles in the Brazilian population

RESUMO DE TESE / THESIS

Estudo molecular dos alelos DI A/DI B e da banda 3-Memphis na população brasileira

Molecular study of the DI A / DI B and Memphis band 3 alleles in the Brazilian population

Wilson B. Júnior

Orientadora: Prof. Dra. Lilian M. DE Castilho

Tese de Mestrado apresentada à Pós-Graduação da Faculdade de Ciências Médicas da Universidade Estadual de Campinas para obtenção do título de Mestre em Clínica Médica

Resumo

O sistema de grupo sanguíneo Diego é constituído por 21 antígenos localizados na glicoproteína banda 3 da membrana eritrocitária. Compreende 4 antígenos antitéticos Di^a/Di^b e Wr^a/Wr^b e 17 antígenos de baixa incidência populacional. O fenótipo Di^a resulta de uma mutação de ponto no nucleotídeo 2561 (T>C) que leva à substituição do aminoácido Prolina (Di^b) para Leucina (Di^a) na posição 854. O antígeno Di^b é um antígeno de alta incidência na população geral, enquanto que o antígeno Di^a é de baixa incidência em caucasianos, mas pode ser comum entre índios e japoneses.

A mutação 166A>G no gene SLC4A1 (AE 1) que codifica a banda 3 dá origem a uma proteína variante, chamada banda 3-Memphis. Podem ser distinguidos dois tipos de banda 3 Memphis: variantes I e II. A banda 3 Memphis II está associada a presença do antígeno Di^a e apresenta maior afinidade de reação covalente com o H₂DIDS do que a Memphis I e a banda 3 normal.

De acordo com a literatura, o antígeno Di^a está sempre associado a presença da banda 3-Memphis, caracterizando a variante Memphis II. Entretanto, nenhum estudo de freqüência dos alelos DI A e 166G foi realizado até o momento.

Com a finalidade de determinar a freqüência dos alelos DI A/DI B e da mutação 166A>G na população brasileira por métodos moleculares, estudamos 318 amostras de DNA de 4 diferentes populações (93 doadores voluntários de sangue, 71 descendentes de japoneses, 84 descendentes de africanos e 70 índios da tribo dos Parakanãs).

Nossos resultados demonstraram que existe forte associação entre os alelos DI A e 166G e que o alelo DI A pode também ocorrer sem o alelo 166G. Em nosso trabalho foram identificadas 4 formas alélicas da associação DI / Memphis na população brasileira: alelo DI A_166A, DI A_166G, DI B_166A e DI B_166G .

Os resultados da genotipagem 166A/G demonstraram que a banda 3-Memphis é um polimorfismo comum entre as populações estudadas. Devido a alta freqüência da mutação 166A>G encontrada, o alelo 166G pode ser considerado como um bom marcador genético de populações não miscigenadas e que o alelo 166G pode também ser considerado um protótipo do gene SLC4A1.

Além disso, considerando a importância clínica dos antígenos Di^a e Di^b, a possibilidade em determinar os genótipos DI A/DI B, poderá contribuir substancialmente na segurança transfusional e materno-fetal.

Abstract

The Diego blood group system consists of 21 antigens located on band 3 of the red blood cell membrane. It includes the 4 antithetical antigens Di^a / Di^b and Wr^a / Wr^b, and 17 low incidence antigens. The Di^a phenotype results from a point mutation at nucleotide 2561 (T>C) leading to a single amino acid substitution from Leu (Di^a) to Pro (Di^b) in position 854. Di^b is a high incidence antigen while Di^a has a low incidence among Caucasians but is particularly common among American Indians and Japanese.

The Memphis variants of band 3 result from a point mutation 166 A>G in SLC4A1 leading to an amino acid substitution (56 Lys>Glu). There appears to be a strong association of Memphis (56Glu) with Di^a (854Leu) among Native Americans.

The initial aim of this study was to determine the frequency of Diego (DI A/DI B) and Memphis (166A>G) mutations in the Brazilian population.

We studied samples from 70 Amazonian Indians, 71 individuals of Japanese descent, 93 regular blood donors and 84 Sickle Cell Disease patients by PCR-RFLP. PCR assays were designed to amplify a sequence of 149 bp from exon 18 (DI A/DI B alleles), and of 84 bp from exon 3 SLC4A1gene that determine band 3-Memphis. Alleles were identified by digestion of amplified products with the restriction enzymes Msp I to discriminate DI A from DI B in exon 18, and Mnl I to identify band 3-Memphis in exon 3.

Both the DI A allele and band 3-Memphis had high gene frequency among Amazonian Indians (0.571 and 0,543, respectively). Unexpectedly, four Amazonian Indians had the DI A allele without the band-3 Memphis mutation.

Recebido: 05/11/2002

Aceito: 15/11/2002

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  24 Nov 2003
• Data do Fascículo
  Dez 2002