SciELO - Scientific Electronic Library Online

 
vol.82 issue4The central role of RNA in the genetic programming of complex organismsEndoscopic and symptoms analysis in Mexican patients with irritable Bowel syndrome, dyspepsia, and gastroesophageal reflux disease author indexsubject indexarticles search
Home Pagealphabetic serial listing  

Anais da Academia Brasileira de Ciências

Print version ISSN 0001-3765

Abstract

YU-BAO, Cui et al. Cloning, expression, and analysis of the group 2 allergen from Dermatophagoides farinae from China. An. Acad. Bras. Ciênc. [online]. 2010, vol.82, n.4, pp. 941-951. ISSN 0001-3765.  http://dx.doi.org/10.1590/S0001-37652010000400017.

Com a finalidade de obter o produto recombinante do alergeno grupo 2 do Dermatophagoides farinae (Der f2), o gene Der f2 foi sintetizado por RT-PCR. O cDNA continha 441 nucleotídeos e era idêntico em 99,3% à sequência de referência (GenBank AB195580). O cDNA foi ligado ao vetor pET28a para construir o plasmídeo pET28a(+)-Der f2, o qual foi introduzido por transformação em E. coli BL21 e induzido por IPTG. Em SDS-PAGE foi vista mia banda específica de 14 kDa no lisado celular. Conforme estimado por cromatografia, cerca de 3,86 mg do produto recombinante foi obtido, que reagia com IgE sérica de crianças asmáticas. A proteína continha um peptídeo sinal de 17 amino ácidos. Sua estrutura secundária consistia de uma alfa hélice (19,86%), uma fita estendida (30,82%), e uma sequência randômica (49,32%). A localização subcelular desse alergeno foi predita ocorrer nas mitocôndrias. Sua função foi associada com o domínio de reconhecimento lipídico (ML) relacionado a MD-2. Os resultados desse estudo permitem a produção em larga escala do alergeno para o diagnóstico clínico e tratamento das doenças alérgicas.

Keywords : Dermatophagoides farinae; alergia a ácaro de poeira doméstica; alergenos acarianos; Der f 2; alergeno recombinante; imunoterapia; bioinformática.

        · abstract in English     · text in English     · pdf in English