Resumo

SANTOS, Sânia Alves dos; ANDRADE, Dahir Ramos de  e  ANDRADE JUNIOR, Dahir Ramos de. Invasão de hepatócitos de rato por Listeria monocytogenes e análise do papel do TNF-a na apoptose. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo [online]. 2005, vol.47, n.2, pp. 73-80. ISSN 0036-4665.  http://dx.doi.org/10.1590/S0036-46652005000200003.

Listeria monocytogenes, agente etiológico de infecção grave de origem alimentar, utiliza mecanismos sofisticados de entrada no citoplasma do hospedeiro e manipulação do citoesqueleto, resultando em morte celular. As interações entre células do hospedeiro e bactérias podem resultar em produção de citocinas como o Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-a). Hepatócitos têm potencial de produzir citocinas pro-inflamatórias como TNF-a, quando invadidos por bactérias. No presente trabalho demonstramos o comportamento dos hepatócitos invadidos por L. monocytogenes pela análise microscópica, determinação da produção de TNF-a por bioensaio e análise da apoptose pela técnica TUNEL. A presença da bactéria, na razão que variou de 5 a 50.000 bactérias por célula, induziu ruptura das monocamadas celulares. Observamos presença de bactérias internalizadas na 1ª hora de incubação por microscopia eletrônica. Os níveis de TNF-a aumentaram da 1ª hora de incubação até a 6ª hora, variando de 0 a 3749 pg/mL. Nas 7ª e 8ª horas de incubação, ocorreram quedas não significativas dos níveis de TNF-a, indicando possível saturação dos receptores celulares. A quantidade de TNF-a produzido por hepatócitos foi dependente do tempo de incubação, assim como da proporção entre bactérias e células. A taxa de apoptose aumentou diretamente com o tempo de incubação (1 h a 8 + 24 h), variando de 0 a 43%, assim como com a razão bactérias : células. Estes resultados mostram a habilidade de L. monocytogenes não-hemolítica em invadir os hepatócitos, e as principais conseqüências deste fenômeno são: liberação de TNF-a e indução de apoptose. Assim, podemos especular que hepatócitos usam apoptose induzida por TNF-a para liberar bactérias de seu interior, facilitando a destruição destas pelo sistema imune.

Palavras-chave : Listeria monocytogenes; Hepatocytes; Tumor Necrosis Factor; Apoptosis.