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Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical

Print version ISSN 0037-8682On-line version ISSN 1678-9849

Abstract

CAMPOS, Rozália F. et al. Sensibilidade da reação em cadeia da polimerase para a detecção de alíquotas conhecidas do Trypanosoma cruzi no sangue da camundongos: estudo in vitro. Rev. Soc. Bras. Med. Trop. [online]. 2002, vol.35, n.5, pp.487-490. ISSN 0037-8682.  http://dx.doi.org/10.1590/S0037-86822002000500011.

A sensibilidade da reação em cadeia da polimerase (PCR) para revelar a presença de números conhecidos de tripomastigotas no sangue de camundongos, foi investigada em três experimentos separados. No primeiro, foram adicionados 1, 2, 3, 4, 5, 10, 20 e 50 tripomastigotas respectivamente, em oito amostras de 500ml de sangue de camundongo. No 2o e 3o experimentos: foram feitas 10 amostras contendo 1, e 10 amostras contendo 2 tripomastigotas/500ml de sangue. Controle positivo: 500ml de sangue contendo 100.000 trypomastigotas. Para amplificação dos minicirculos do kDNA pela PCR foram usados os iniciadores S35 e S36. A PCR revelou produtos de 330 p.b nos controles positivos e nas amostras contendo de 3 a 50 tripomastigotas. Quando apenas uma amostra contendo 1 ou 2 tripomastigotas foi examinada, os resultados foram negativos, porém no 2o e 3o experimentos 9/10 amostras contendo 1 e 2 tripomastigotas foram PCR positivas, revelando alta sensibilidade da reação. Em conclusão, a presença de um só parasito em 500ml de sangue é suficiente para uma PCR positiva e este método pode ser usado como complementação dos demais testes parasitológicos de cura, em camundongos tratados, quando pequenos volumes de sangue são individualmente examinados.

Keywords : Trypanosoma cruzi; Reação em cadeia da polimerase; Sensibilidade da PCR em camundongos; PCR como teste de cura.

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