Abstract

CHANG, Xiaojuan  and  YU, Zhengping. Determination of etimicin in rat plasma using 9-fluorenylmethyl chloroformate precolumn derivatization by HPLC with fluorescence detection. J. Braz. Chem. Soc. [online]. 2011, vol.22, n.7, pp. 1246-1252. ISSN 0103-5053.  http://dx.doi.org/10.1590/S0103-50532011000700008.

Um método novo e sensível foi desenvolvido para a determinação de etimicina (ETM) utilizando pré-coluna de derivatização (PCD) com 9-fluorenilmetilcloroformiato (FMOC-Cl) por separação de fase reversa e subsequente detecção por fluorescência. As condições PCD foram todas otimizadas para o menor limite de detecção. A separação cromatográfica foi efetuada em uma coluna Agilent XDB-C8 a 25 ºC, velocidade de fluxo de 1,0 mL min^-1 e fase móvel acetonitrila/água (87:13, v/v). O derivativo etimicina-FMOC-Cl foi monitorado por detecção de fluorescência a λ_excitação 265 nm e λ_emissão 315 nm. Neomicina, um composto de estrutura similar ao ETM foi usado como padrão interno. A avaliação estatística do método foi examinada, mostrando-se preciso e exato com um intervalo de linearidade de 0,038-9,69 µg mL^-1 (r > 0,9994). Os estudos de precisão intra- e inter-dia mostraram boa reprodutividade com desvio padrão médio (R.S.D.) menor que 5%, e recuperação de 97,80-100,09 % (n = 3). O limite de detecção (LOD) e o limite inferior de quantificação (LLOQ) em plasma foram 0,01 e 0,02 µg mL^-1, respectivamente. Um volume de 50 µL de plasma foi suficiente para detecção de etimicina. O método estabelecido fornece um método bionalítico confiável para a farmacocinética de etimicina em plasma de rato.

Keywords : high-performance liquid chromatography; 9-fluorenylmethyl chloroformate; derivatization; etimicin; pharmacokinetic.