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Journal of the Brazilian Chemical Society

 ISSN 0103-5053

PELUSA, Héctor F. et al. Quantification of autoantibodies to annexin V in plasma by an "in house" sandwich ELISA. []. , 23, 3, pp. 453-460. ISSN 0103-5053.  http://dx.doi.org/10.1590/S0103-50532012000300011.

Foi desenvolvido e validado um ELISA tipo sanduíche "in house" para a quantificação de anticorpos (Ac) anti-anexina V em plasma. Os parâmetros de validação estudados foram: (i) precisão, expressado como coeficiente de variação (CV) inter- e intra-ensaio, (ii) exatidão, expressado como porcentagem de desvio entre o valor obtido e o valor real, (iii) limite de detecção (LOD), avaliado a partir do branco de reagentes e (iv) robusteza, obtida através da introdução propositada de pequenas variações em diferentes parâmetros. Além disso, a técnica "in house" foi comparada com um método comercial. Encontrou-se que ambos CV foram < 20%, a exatidão foi de 100 ± 20%, o limite de detecção foi menor que 1 U mL-1 e as pequenas variações na técnica não produziram variações significativas nos resultados. A comparação com o método comercial mostrou uma correlação aceitável. Concluiu-se que o método desenvolvido cumpre satisfatoriamente com os parâmetros de padronização e validação para imuno-análise.

: ELISA; annexin V; antibodies; anti-phospholipid syndrome; foetal losses.

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