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Brazilian Journal of Microbiology

versão impressa ISSN 1517-8382versão On-line ISSN 1678-4405

Resumo

LASARO, Melissa Ang-Simões et al. Avaliação das condições experimentais para quantificação de LT produzida por linhagens de Escherichia coli enterotoxigênica isolada de humanos. Braz. J. Microbiol. [online]. 2007, vol.38, n.3, pp.446-451. ISSN 1517-8382.  http://dx.doi.org/10.1590/S1517-83822007000300012.

A toxina termo-lábil (LT) é um fator de virulência associado à diarréia secretora não invasiva causada por linhagens de Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) em humanos ou animais domésticos. Diversos métodos de detecção de LT foram descritos na literatura, no entanto, a quantificação da toxina produzida por linhagens selvagens de ETEC é geralmente realizada por ensaio imunoenzimático com o gangliosídeo GM-1 (GM-1 ELISA). Neste estudo, conduzimos uma otimização experimental de um método alternativo de quantificação de LT, o ELISA de captura (cELISA). Análise detalhada de diluições apropriadas dos anticorpos LT específicos de captura e detecção melhorou significantemente a sensibilidade do método. Em adição, testes com diferentes técnicas de extração de LT indicaram que a ruptura das células por ultra-som, mas não o tratamento com polimixina B, clorofórmio ou Triton X-100, aumentou o rendimento da recuperação de LT. Além disto, os dados apresentados demonstram que o desempenho do método de extração de LT baseado no tratamento com polimixina B pode variar entre linhagens selvagens de ETEC.

Palavras-chave : toxina termo-lábil; LT; ETEC; cELISA.

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