Utilização da sílica nanoestruturada SBA-15 como adjuvante em imunizações com a vacina para hepatite B

Demonstrar a aplicabilidade da sílica do tipo SBA-15 como adjuvante nas imunizações com a proteína recombinante HBsAg do vírus da hepatite B, principal componente da vacina Butang^® produzida pelo Instituto Butantan.

Métodos:

Camundongos BALB/c receberam, pela via oral ou subcutânea, 0,5 μg do HbsAg adsorvido/encapsulado à SBA-15 ou adsorvido ao Al(OH)₃. Para avaliar a resposta imune secundária, uma dose de reforço foi administrada subcutaneamente 30 dias após a primeira imunização. Amostras individuais de soro e fezes foram coletadas periodicamente para titulação de anticorpos específicos por ELISA.

Resultados:

A análise de IgA secretada mostrou que camundongos imunizados pela via oral com HbsAg em SBA-15 apresentaram aumento nos níveis de anticorpos específicos nas respostas primária e secundária. Ainda, após o reforço, observaram-se maiores níveis de IgA e IgG séricas anti-HBsAg no grupo preparado com HBsAg:SBA-15 pela via oral. Todos os grupos imunizados apresentaram maior produção de IgG1.

Conclusão:

Os resultados indicam o uso promissor da sílica SBA-15 como adjuvante, especialmente nas imunizações pela via oral.

Descritores:
Hepatite B; Vacinação oral; Adjuvantes; Memória imunológica

Autoria

Karina Scaramuzzi

Laboratório de Imunoquímica, Instituto Butantan – São Paulo (SP), BrasilLaboratório de Imunoquímica, Instituto Butantan – São Paulo (SP), BrasilBrasilSão Paulo, SP, BrasilLaboratório de Imunoquímica, Instituto Butantan – São Paulo (SP), Brasil

Denise Cristina André Oliveira

Setor de Hepatite, Instituto Butantan – São Paulo (SP), BrasilSetor de Hepatite, Instituto Butantan – São Paulo (SP), BrasilBrasilSão Paulo, SP, BrasilSetor de Hepatite, Instituto Butantan – São Paulo (SP), Brasil

Luciana Vieira Carvalho

Denise Vilarinho Tambourgi

Elisabeth Christina Nunes Tenório

Marisa Rizzi

Farmacêutica Cristália – São Paulo (SP), BrasilFarmacêutica Cristália – São Paulo (SP), BrasilBrasilSão Paulo, SP, BrasilFarmacêutica Cristália – São Paulo (SP), Brasil

Juliana Mussalem

Farmacêutica Cristália – São Paulo (SP), BrasilFarmacêutica Cristália – São Paulo (SP), BrasilBrasilSão Paulo, SP, BrasilFarmacêutica Cristália – São Paulo (SP), Brasil

Márcia Carvalho de Abreu Fantini

Departamento de Física Aplicada, Universidade de São Paulo – USP, São Paulo (SP), BrasilDepartamento de Física Aplicada, Universidade de São Paulo – USP, São Paulo (SP), BrasilBrasilSão Paulo, SP, BrasilDepartamento de Física Aplicada, Universidade de São Paulo – USP, São Paulo (SP), Brasil

Viviane Fongaro Botosso

Osvaldo Augusto Sant´Anna Autor correspondente: Osvaldo Augusto Sant´Anna – Laboratório de Imunoquímica do Instituto Butantan – São Paulo (SP), Brasil – Tel.: 11 3726-7222 – ramal: 2001 – E-mail: gbrazil@usp.br

Autor correspondente: Osvaldo Augusto Sant´Anna – Laboratório de Imunoquímica do Instituto Butantan – São Paulo (SP), Brasil – Tel.: 11 3726-7222 – ramal: 2001 – E-mail: gbrazil@usp.br

Conflito de interesse: não há

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Figuras

Figuras (5)

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Figura 1
SBA-15 sílica mesoporosa nanoestruturada. (A) Microscopia Eletrônica de Transmissão (TEM) de sílica SBA-15, com destaque para a estrutura porosa hexagonal organizada com diâmetro médio de poro de aproximadamente 10 nm.(B) Imagem de Microscopia Eletrônica de Varredura (SEM) de partículas de SBA – 15 de cerca de 30 μm de diâmetro, mostrando a morfologia macroporosa

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Figura 2
Produção de anticorpos por camundongos BALB/c imunizados por via oral ou subcutânea. (A) Níveis séricos de IgG, (B) IgG1, (C) IgG2a anti-HBsAg (n = 5 animais/grupo). Títulos de anticorpos medidos por ELISA, nos 7, 14 e 30 dias depois do reforço, administrado por via subcutânea, 30 dias após a primeira imunização. O grupo de animais imunizados com rHBsAg foi utilizado como referência para a análise do teste t de Student não pareado, *p < 0,05; •••p < 0,001. Títulos de anticorpos nos dias 7, 14 e 30 após o reforço também foram usados como referência para análise pelo teste t de Student não pareado, ° p < 0,05

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Figura 3
Produção de anticorpo IgG1 e IgG2a por camundongos BALB/c imunizados por via subcutânea. Níveis séricos de anticorpos IgG1 e IgG2a anti-HBsAg (n = 5 animais/grupo). Títulos de anticorpos medidos por ELISA 7, 14 e 30 dias após o reforço, administrados por via subcutânea 30 dias após a primeira imunização. As respostas de IgG1 e IgG2a entre os grupos foram usadas como referência para análise pelo teste t de Student não pareado, *p < 0,05

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Figura 4
Produção de anticorpo IgG1 e IgG2a por camundongos BALB/c imunizados por via oral. Níveis séricos de anticorpos IgG1 e IgG2a anti-HBsAg (n = 5 animais/grupo). Títulos de anticorpos medidos por ELISA 7, 14 e 30 dias após o reforço, administrados por via subcutânea 30 dias após a primeira imunização. As respostas de IgG1 e IgG2a entre os grupos foram usadas como referência para análise pelo teste t de Student não pareado, *** p < 0,05

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Figura 5
Produção de anticorpo por camundongos BALB/c imunizados por via oral ou subcutânea. (A) Níveis secretórios de IgA (s-IgA) e (B) níveis séricos de IgA anti-HBsAg (n = 5 animais/grupo). Títulos de anticorpos medidos por ELISA durante as respostas imunes primária e secundária. O reforço subcutâneo foi administrado 30 dias após a primeira imunização oral. Grupos de animais imunizados e não imunizados com rHBsAg foram usados como referência para análise pelo teste t de Student não pareado

Figura 1 SBA-15 sílica mesoporosa nanoestruturada. (A) Microscopia Eletrônica de Transmissão (TEM) de sílica SBA-15, com destaque para a estrutura porosa hexagonal organizada com diâmetro médio de poro de aproximadamente 10 nm.(B) Imagem de Microscopia Eletrônica de Varredura (SEM) de partículas de SBA – 15 de cerca de 30 μm de diâmetro, mostrando a morfologia macroporosa

Figura 2 Produção de anticorpos por camundongos BALB/c imunizados por via oral ou subcutânea. (A) Níveis séricos de IgG, (B) IgG1, (C) IgG2a anti-HBsAg (n = 5 animais/grupo). Títulos de anticorpos medidos por ELISA, nos 7, 14 e 30 dias depois do reforço, administrado por via subcutânea, 30 dias após a primeira imunização. O grupo de animais imunizados com rHBsAg foi utilizado como referência para a análise do teste t de Student não pareado, *p < 0,05; •••p < 0,001. Títulos de anticorpos nos dias 7, 14 e 30 após o reforço também foram usados como referência para análise pelo teste t de Student não pareado, ° p < 0,05

Figura 3 Produção de anticorpo IgG1 e IgG2a por camundongos BALB/c imunizados por via subcutânea. Níveis séricos de anticorpos IgG1 e IgG2a anti-HBsAg (n = 5 animais/grupo). Títulos de anticorpos medidos por ELISA 7, 14 e 30 dias após o reforço, administrados por via subcutânea 30 dias após a primeira imunização. As respostas de IgG1 e IgG2a entre os grupos foram usadas como referência para análise pelo teste t de Student não pareado, *p < 0,05

Figura 4 Produção de anticorpo IgG1 e IgG2a por camundongos BALB/c imunizados por via oral. Níveis séricos de anticorpos IgG1 e IgG2a anti-HBsAg (n = 5 animais/grupo). Títulos de anticorpos medidos por ELISA 7, 14 e 30 dias após o reforço, administrados por via subcutânea 30 dias após a primeira imunização. As respostas de IgG1 e IgG2a entre os grupos foram usadas como referência para análise pelo teste t de Student não pareado, *** p < 0,05

Figura 5 Produção de anticorpo por camundongos BALB/c imunizados por via oral ou subcutânea. (A) Níveis secretórios de IgA (s-IgA) e (B) níveis séricos de IgA anti-HBsAg (n = 5 animais/grupo). Títulos de anticorpos medidos por ELISA durante as respostas imunes primária e secundária. O reforço subcutâneo foi administrado 30 dias após a primeira imunização oral. Grupos de animais imunizados e não imunizados com rHBsAg foram usados como referência para análise pelo teste t de Student não pareado

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[1] Autor correspondente: Osvaldo Augusto Sant´Anna – Laboratório de Imunoquímica do Instituto Butantan – São Paulo (SP), Brasil – Tel.: 11 3726-7222 – ramal: 2001 – E-mail: gbrazil@usp.br