Imunofluorescência indireta no pênfigo foliáceo endêmico. contribuição para sua padronização

Friedman, Horácio; Campbell, Iphis T.; Alvarez, Rosicler Rocha; Diaz, Luis A.; Castro, Raymundo Martins De; Roitman, Isaac; Parreiras, Rosa M.; Raick, Alberto N.

doi:10.1590/S0036-46651989000300005

Resumos

O propósito da presente investigação foi padronizar a reação de imunofluorescência indireta para Pênfigo Foliáceo Endêmico (Fogo Selvagem). Verificamos que a pele humana normal é o substrato ideal e que pode proceder de prepúcio, cabeça, pescoço ou da parede abdominal anterior. A lavagem prévia da pele precedendo a incubação com o soro deve ser evitada pois a antigenicidade pode ser diminuída. O TAS-cálcio preserva as propriedades antigênicas da pele e deve ser preferido como diluente para os soros. Lâminas cobertas com albumina são úteis porque aumentam a aderência dos cortes de pele. A diluição apropriada do conjugado é convenientemente determinada pelo teste de imunodifusão radial (método de Ouch-terlony). Com referência à correlação entre título de anticorpos e atividade clínica, concluímos que um título igual ou maior do que 160 era de mau prognóstico pois estava associado à forma generalizada da doença ou à casos de forma localizada refratários à terapêutica usual. Contudo, esta obervação requer confirmação através de estudos que envolvam uma abordagem clínica apropriada.

Pênfigo foliáceo endêmico; Imunofluorescência indireta

The aim of the present research was to standardize the indirect immunofluorescence reaction for Endemic Pemphigus Foliaceus (Fogo Selvagem). We found that fresh human skin was the ideal substrate and could proceed from foreskin, head, neck, or anterior abdominal wall. PBS pre-washing of the skin preceding the incubation with the serum should be avoided since the antigenicity might be diminished. TAS-calcium preserves the Pemphigus antigenic properties of the skin and shall be preferred as the diluent for the sera. Albumin-coated slides are useful because they increase the adherence of the skin sections. The conjugate appropriate dilution is convenientely determined by the radial immunodiffusion test (Ouchterlony method). So far as the correlation between the antibody titer and the clinical activity is concerned, we concluded that a titer of 160 or more was of bad prognosis, since it was associated with the generalized form of the disease or with cases of the localized form refractory to the usual therapy. Nevertheless, this assumption needs confirmation by further studies involving an appropriate clinical approach.

ARTIGO ORIGINAL

Imunofluorescência indireta no pênfigo foliáceo endêmico. contribuição para sua padronização

Indirect immunofluorescent reaction in endemicus pemphigus foliaceus

Horácio Friedman^I; Iphis T. Campbell^I; Rosicler Rocha Alvarez^I; Luis A. Diaz^II; Raymundo Martins De Castro^III; Isaac Roitman^IV; Rosa M. Parreiras^I; Alberto N. Raick^I

^ILaboratório de Patologia e Serviço de Dermatologia da Fundação Universidade de Brasília. Brasília, DF, Brasil

^IIImmunodermatology Unit, Department oí Dermatology, Johns Hopkins Medical Institutions. Baltimore, MD, USA

^IIIDepartamento de Dermatologia, Escola Paulista de Medicina. São Paulo, SP, Brasil

^IVLaboratório de Microbiologia e Imunologia da Fundação Universidade de Brasília. Brasília, DF, Brasil

^{Endereço para correspondência} Endereço para correspondência: Dr. Horácio Friedman Laboratório de Patologia Faculdade de Ciências da Saúde Universidade de Brasília CEP 70910. Brasília, DF, Brasil

RESUMO

O propósito da presente investigação foi padronizar a reação de imunofluorescência indireta para Pênfigo Foliáceo Endêmico (Fogo Selvagem). Verificamos que a pele humana normal é o substrato ideal e que pode proceder de prepúcio, cabeça, pescoço ou da parede abdominal anterior. A lavagem prévia da pele precedendo a incubação com o soro deve ser evitada pois a antigenicidade pode ser diminuída. O TAS-cálcio preserva as propriedades antigênicas da pele e deve ser preferido como diluente para os soros. Lâminas cobertas com albumina são úteis porque aumentam a aderência dos cortes de pele. A diluição apropriada do conjugado é convenientemente determinada pelo teste de imunodifusão radial (método de Ouch-terlony). Com referência à correlação entre título de anticorpos e atividade clínica, concluímos que um título igual ou maior do que 160 era de mau prognóstico pois estava associado à forma generalizada da doença ou à casos de forma localizada refratários à terapêutica usual. Contudo, esta obervação requer confirmação através de estudos que envolvam uma abordagem clínica apropriada.

Unitermos: Pênfigo foliáceo endêmico; Imunofluorescência indireta.

SUMMARY

The aim of the present research was to standardize the indirect immunofluorescence reaction for Endemic Pemphigus Foliaceus (Fogo Selvagem). We found that fresh human skin was the ideal substrate and could proceed from foreskin, head, neck, or anterior abdominal wall. PBS pre-washing of the skin preceding the incubation with the serum should be avoided since the antigenicity might be diminished. TAS-calcium preserves the Pemphigus antigenic properties of the skin and shall be preferred as the diluent for the sera. Albumin-coated slides are useful because they increase the adherence of the skin sections. The conjugate appropriate dilution is convenientely determined by the radial immunodiffusion test (Ouchterlony method). So far as the correlation between the antibody titer and the clinical activity is concerned, we concluded that a titer of 160 or more was of bad prognosis, since it was associated with the generalized form of the disease or with cases of the localized form refractory to the usual therapy. Nevertheless, this assumption needs confirmation by further studies involving an appropriate clinical approach.

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AGRADECIMENTOS

Agradecemos o auxílio técnico de Paula Bonitz, Gerardine M. M. Finn, Pedro B. Araújo e Bráulio S. Santos Filho e a assistência fotográfica de Paulo H. B. Leite. Esta pesquisa foi em parte amparada financeiramente pelo Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq (projeto 40.6319/84) e pelo Decanato de Pesquisa e Pós-Graduação da Fundação Universidade de Brasília (projeto 54025).

Recebido para publicação em 16/9/1988.

1. ACOSTA, E. & IVANYL, L. - Comparison of the reactivity of various epithelial substrates for the titration of Pemphigus antibodies by indirect immunofluorescence. Brit. .J. Derm., 107: 537-541, 1982.
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35. WENK, P. A. - Pre-coated slides can save time and headaches for histotechs. Detroit, Lab Tips from Lipshaw, 1986.

Endereço para correspondência:

Dr. Horácio Friedman

Laboratório de Patologia

Faculdade de Ciências da Saúde

Universidade de Brasília

CEP 70910. Brasília, DF, Brasil

Datas de Publicação

Publicação nesta coleção
24 Fev 2011
Data do Fascículo
Jun 1989

Histórico

Recebido
16 Set 1988

This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.

[1] 1. ACOSTA, E. & IVANYL, L. - Comparison of the reactivity of various epithelial substrates for the titration of Pemphigus antibodies by indirect immunofluorescence. Brit. .J. Derm., 107: 537-541, 1982.

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