Acessibilidade / Reportar erro
Biotecnologia Fitoquímica • Bragantia 52 (2) • 1993 • https://doi.org/10.1590/S0006-87051993000200001   copiar

Determinação da viabilidade de protoplastos irradiados de laranja 'pêra'

Determination of viability of irradiated 'pera' orange protoplasts

Autoria SCIMAGO INSTITUTIONS RANKINGS

Resumos

Estudou-se a viabilidade de protoplastos de laranja 'Pêra' (Citrus sinensis Osbeck), submetidos a diferentes doses de radiação gama, com a finalidade de determinar a dose letal (DL) 50 - dose que causa 50% de letalidade. Empregou-se a análise por fluorescência, utilizando-se o corante diacetato de fluoresceína (DAF): suas diluições testadas - 1:50; 1:100 e 1:150 - não mostraram diferenças significativas entre si, tendo sido possível o uso da maior diluição para a determinação da viabilidade dos protoplastos. A viabilidade mostrou-se inversamente proporcional às doses de radiação gama e a DL 50 foi cerca de 41 Gy. Os protoplastos não irradiados apresentaram até 84% de viabilidade, quando esta foi estudada logo após o isolamento daqueles.

Citrus sinensis Osbeck; protoplastos; viabilidade; radiação gama

The viability of 'Pera' orange (Citrus sinensis Osbeck) protoplasts, submitted to different dosages of Gamma radiation, was studied to determine the lethal dose (DL) 50. The analysis by fluorescence was employed using Fluorescein diacetate (FDA). The dilutions of FDA (1:50; 1:100 and 1:150) did not show any statistical difference: Then it was possible to use the 1:150 dilution in order to determine the protoplasts viability. The viability was inversaly proportional to Gamma radiation and the DL 50 was about 41 Gy. The non-irradiated protoplasts had their viability up to 84% when tested as soon after their isolation.

Citrus sinensis Osbeck; protoplasts; viability; Gamma radiation

I. BIOTECNOLOGIA/FITOQUÍMICA

Determinação da viabilidade de protoplastos irradiados de laranja 'pêra'1 1 Parte de trabalho de dissertação apresentada pelo primeiro autor para obtenção do título de Mestre em Genética e Melhoramento de Plantas no Curso de Pós-graduação em Genética e Melhoramento de Plantas da ESALQ/USP, Piracicaba (SP).

Determination of viability of irradiated 'pera' orange protoplasts

Mariângela CristofaniI; Beatriz Januzzi MendesII; Augusto Tulmann NetoII; Akihiko AndoII

ICentro de Citricultura Sylvio Moreira, Instituto Agronômico de Campinas, Caixa Postal 4, 13490-970 Cordeirópolis (SP)

IISeção de Radiogenética, Centro de Energia Nuclear na Agricultura/USP, Caixa Postal 96, 13400-000 Piracicaba (SP)

RESUMO

Estudou-se a viabilidade de protoplastos de laranja 'Pêra' (Citrus sinensis Osbeck), submetidos a diferentes doses de radiação gama, com a finalidade de determinar a dose letal (DL) 50 - dose que causa 50% de letalidade. Empregou-se a análise por fluorescência, utilizando-se o corante diacetato de fluoresceína (DAF): suas diluições testadas - 1:50; 1:100 e 1:150 - não mostraram diferenças significativas entre si, tendo sido possível o uso da maior diluição para a determinação da viabilidade dos protoplastos. A viabilidade mostrou-se inversamente proporcional às doses de radiação gama e a DL 50 foi cerca de 41 Gy. Os protoplastos não irradiados apresentaram até 84% de viabilidade, quando esta foi estudada logo após o isolamento daqueles.

Termos de indexação:Citrus sinensis Osbeck, protoplastos, viabilidade, radiação gama.

ABSTRACT

The viability of 'Pera' orange (Citrus sinensis Osbeck) protoplasts, submitted to different dosages of Gamma radiation, was studied to determine the lethal dose (DL) 50. The analysis by fluorescence was employed using Fluorescein diacetate (FDA). The dilutions of FDA (1:50; 1:100 and 1:150) did not show any statistical difference: Then it was possible to use the 1:150 dilution in order to determine the protoplasts viability. The viability was inversaly proportional to Gamma radiation and the DL 50 was about 41 Gy. The non-irradiated protoplasts had their viability up to 84% when tested as soon after their isolation.

Index terms:Citrus sinensis Osbeck, protoplasts, viability, Gamma radiation.

Texto completo disponível apenas em PDF.

Full text available only in PDF format.

Recebido para publicação em 10 de novembro de 1992 e aceito em 2 de agosto de 1993.

  • BURGER, D.W. & HACKETT, W.P. The isolation, culture and division of protoplasts from citrus cotyledons (Citrus sinensis). Physiologia Plantarum, Copenhagen, 56:324-328, 1982.
  • GALUN, E. & RAVEH, D. In vitro culture of tobacco protoplasts: survival of haploid and diploid protoplasts exposed to X-ray radiation at different times after isolation. Radiation Botany, Oxford, 15:79-82, 1975.
  • GOLDMAN, M.H.S. Cultura de tecidos nucelares, isolamento e radiossensitividade de protoplastos de Citrus sinensis (L.) Osbeck cv. Pera. Piracicaba, 1988. 127p. Dissertação (Mestrado) - ESALQ-USP, 1988.
  • HOOLEY, R. Protoplasts isolated from aleurone layers of wild oat (Avena fatua L.) exhibit the classic response to gibberellic acid. Planta, Berlin, 154(1):29-40, 1982.
  • KANAI, R. & EDWARDS, G.E. Purification of enzymatically isolated mesophyll protoplasts from C3, C4 and crassulacean acid metabolism plants using an aqueous dextranpolyethylene glycol two phase system. Plant Physiology, Lancaster, 52:484-490, 1973.
  • KARANTINE, S.M. & SCOTT, K.J. Mitotic activity in protoplasts isolated from Sorghum bicolor leaves. Plant Science Letters, Amsterdam, 23:11, 1981.
  • KOBAYASHI, S.; IKEDA, I. & UCHIMIYA, H. Conditions for high frequency embryogenesis from orange (Citrus sinensis Osb.) protoplasts. Plant Cell Tissue and Organ Culture, Dordrecht, 4:149-159, 1985.
  • LARKIN, P.J. Purification and viability determinations of plant protoplasts. Planta, Berlin, 128:213-216, 1976.
  • MURASHIGE, T. & TUCKER, D.P.H. Growth factors requirements of citrus tissue culture. In: INTERNATIONAL CITRUS SYMPOSIUM, Riverside, 1968. Proceedings. Riverside, University of California, 1969. v.3,p.H55-1166.
  • NAGATA, T. & TAKEBE, I. Plating isolated tobacco mesophyll protoplasts on agar medium. Planta, Berlin, 99:12-20, 1971.
  • NEGRUTIU, I.; JACOBS, M. & CABOCHE, M. Advances in somatic cell genetics of higher plants: the protoplast approach in basic studies on mutagenesis and isolation of biochemical mutants. Theoretical and Applied Genetics, Berlin, 67(4):289-304, 1984.
  • SZABADOS, L. Protoplast: aislamiento, cultivo y regeneración. In: ROCA, W.M. & MROGINSKI, eds. Cultivo de tecidos en la agricultura: fundamientos y applicaciones. Cali,CIAT, 1991. p.239-271.
  • VARDI, A.; SPIEGEL-ROY, P. & GALUN, R. Citrus cell culture: isolation of protoplasts, plating densities, effect of mutagens and regeneration of embryo s. Plant Science Letters, Amsterdam, 4:231-236, 1975.
  • WIDHOLM, J.R. The use of fluorescein diacetate and phenolsafranine for determine viability of culture plant cells. Stain Technology, Baltimore, 47:189-194, 1972.
  • 1
    Parte de trabalho de dissertação apresentada pelo primeiro autor para obtenção do título de Mestre em Genética e Melhoramento de Plantas no Curso de Pós-graduação em Genética e Melhoramento de Plantas da ESALQ/USP, Piracicaba (SP).

    • Datas de Publicação

    • Publicação nesta coleção
      16 Out 2007
    • Data do Fascículo
      1993

    Histórico

    • Recebido
      10 Nov 1992
    • Aceito
      02 Ago 1993
    Creative Common - by-nc 4.0
    This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.
    Instituto Agronômico de Campinas Avenida Barão de Itapura, 1481, 13020-902, Tel.: +55 19 2137-0653, Fax: +55 19 2137-0666 - Campinas - SP - Brazil
    E-mail: bragantia@iac.sp.gov.br
    Acompanhe os números deste periódico no seu leitor de RSS