Cross-linking da cornea: protocolo padrão

RESUMO

O objetivo desta revisão é de determinar as indicações e eficácia da cirurgia que promove novas ligações covalentes entre as fibras de colágeno da córnea, conhecida como Cross-Linking (CXL), assim como esclarecer seus objetivos. O ceratocone é uma doença ectasica da córnea, bilateral, assimétrica, que, principalmente, cursa com encurvamento e afinamentos progressivo, e se inicia em geral na segunda década de vida. O uso primário do CXL tem sido na interrupção da progressão do Ceratocone. Apesar do conhecido encurvamento no estroma da córnea ocorrer nesses pacientes, a fisiopatologia por trás do ceratocone ainda é desconhecida e parece ser multifatorial. Pela evidencia literária disponível até o momento, o CXL da córnea esta, portanto indicado nos pacientes com doença em progressão. Concluímos que existe evidencia suficiente para afirmar que o CXL da córnea é eficaz na estabilização da doença ectásica da cornea.

Descritores:
Córnea/fisiologia; Córnea/metabolismo; Cross-linking reagentes; Ceratocone/terapia; Riblflavina/administração & dosagem; Protocolos

ABSTRACT

The purpose of this review is to determine the indications and efficacy of the surgery that promotes new covalent bonds between the collagen fibers of the cornea, known as Cross-Linking (CXL), as well as to clarify its objectives. Keratoconus is a bilateral, asymmetric ectasic disease of the cornea that mainly courses with steepening and progressive thinning, and usually begins in the second decade of life. The primary use of CXL has been in discontinuing the progression of keratoconus. Although known corneal stromal remodeling occurs in these patients, the pathophysiology behind keratoconus is still unknown and appears to be multifactorial. By the literary evidence available to date, the CXL of the cornea is safely indicated in patients with progressing disease. We conclude that there is sufficient evidence to affirm that cornea CXL is effective in stabilizing corneal ectasic disease.

Keywords:
Cornea/physiology; Cornea/metabolismo; Cross-linking reagents; Keratoconus/therapy; Riboflavin/administration & dosage; Protocolos

INTRODUÇÃO

Observações quanto a menor progressão do ceratocone em pacientes com diabetes e maior idade levou a ideia de que o crosslinking natural das fibras de colágeno da córnea, poderia resultar em fortalecimento e enrijecimento dos tecidos.⁽¹⁾ Isto levou ao desenvolvimento da reticulação ou crosslinking (CXL) da córnea, um processo no qual uma combinação de um fotoindutor, luz ultra violeta (UV), e uma reação fotoquímica leva a indução de radicais livres, que conduz a uma ligação química entre as fibras de colágeno.

Um estudo inicial em animais revelou um aumento de até 70% da rigidez da córnea,⁽²⁾ enquanto o primeiro estudo clínico por Wollensak et al, mostrou interromper a progressão e levar a aplanamento da topografia corneana em pacientes com ceratocone.⁽³⁾Desde então, vários estudos prospectivos têm ecoado os mesmos resultados em pacientes com ceratocone ^(4-6) e ectasia corneana após a cirurgia refrativa (daqui em diante denominado "ectasia").⁽⁷⁾

O objetivo desta revisão é de determinar as indicações da cirurgia que promove novas ligações covalentes entre as fibras de colágeno da córnea, conhecida como Cross-Linking (CXL), assim como esclarecer seus objetivos.

Fotoindutor

A Riboflavina funciona como um fotoindutor ótimo na reação bioquímica do CXL. Mesmo com ampla gama de absorção é segura para a circulação sistémica.⁽⁸⁾É, no entanto, uma molécula relativamente grande e sua principal limitação é a penetraçãoadequadano estroma da córnea através de um epitélio íntegro, o que é fundamental para a sua ação eficaz. A técnica padrão (ou tradicional) que será discutida nesta revisão inclui a remoção do epitélio. Várias técnicas de CXLcom epitélio integro (denominadas "epi on") têm sido estudadas para contornar esse problema, embora a eficácia destes protocolos seja controversa.

Luz Ultravioleta (UV)

A luz UV é o segundo componente importante no CXL. Parâmetros-chave incluem comprimento de onda, fluência e tempo de irradiação, que são específicos para aeficáciaea segurança do tratamento. A gama de pico de absorção de riboflavina para CXL varia entre 360-370nm, tal como determinado através de estudos iniciais.⁽⁹⁾ As variações na intensidade e duração em estudos pré-clínicos estabeleceram que a máxima rigidez envolveu o uso de 3mW/ cm² de energia durante 30 minutos, o que correspondeu à uma dose total de energia (fluência) de 5.4J / cm², e permitiu a maior eficiência de endurecimento do tecido. Esta forma de utilização foi denominadadeprotocolo padrão ou Standard(ou protocolo Dresden). Variações deste protocolo, com maior fluência e menor tempo, foram denominados CXL acelerado, que serão discutidos em outro capitulo.

A reação fotoquímica que leva ao real processo de enrijecimento envolve a riboflavina absorvendo a energia UV e excitação da molécula, para criar espécies reativas de oxigênio.Esta reação induz ligações covalentes entre as próprias moléculas de colágeno da córnea e entre o colágeno e proteoglicanos, ⁽¹⁰⁾ processo que conduz à maior rigidez biomecânica. O oxigênio desempenha um papel fundamental em toda esta reação química, embora mais estudos sejam necessários para entender completamente esta relação e de que forma o tempo e a forma de exposição ao oxigênio podem influenciar no resultado do tratamento.

Aplicação e indicações do CXL

Ceratocone

O ceratocone é uma doença ectasica da córnea, bilateral, assimétrica, que, principalmente, cursa com encurvamento e afinamentos progressivo, e se inicia em geral na segunda década de vida^.(11)O uso primário do CXL tem sido na interrupção da progressão do Ceratocone. Apesar do conhecido encurvamento no estroma da córnea ocorrer nesses pacientes, a fisiopatologia por trás do ceratocone ainda é desconhecida e parece ser multifatorial.

Pela evidencia literária disponível até o momento, e discutida em pormenores mais adiante, o CXL da córnea esta, portanto indicado nos pacientes com doença em progressão:

Tabela 1
Principais sinais de progressão

· Aumento de pelo menos 1 dioptria (D) nos parâmetros ceratometricos em 12 meses (m)

· Aumento de pelo menos 0.75 D nos parâmetros ceratometricos em 6 m

· Aumento da miopia de 0.75D em 12 m em refração sob cicloplegia

· Perda de pelo menos duas linhas de visão, na melhor visão corrigida em 12 m

Muito ainda tem se discutido sobre a forma como a paquimetria, ou mapa paquimétrico, pode ser utilizado como documentação de progressão, e consequente indicação de CXL.

Evidencia científica da eficácia do tratamento

O primeiro estudo clínico incluiu pacientes com ceratocone progressivo que foram submetidos ao protocolo padrão (de Dresden), que consistia em aplicar Riboflavina sobre a córnea desepitelizada, previamente à exposição durante 30 minutos à uma fonte de radiação UV com uma intensidade luminosa de 3mW/cm.^(2,3)Os primeiro estudos controlados e randomizadosconfirmaram a eficácia na interrupção da progressão da doença de forma segura, incluindo ainda aplanamento, melhora na acuidade visual, afinamento transitório da córnea durante os seis primeiros meses e melhora dos parâmetros topográficos.^(8,12) Raiskup et al.⁽⁶⁾ publicou o estudo com o follow-up mais longo até a presente data, dez anos de acompanhamento de pacientes com ceratocone, confirmando estabilidade, melhora da acuidade visual e dos parâmetros topográficos a longo prazo.Estudos conduzidos por nosso grupo demonstraram que o CXL é também eficaz em pacientes com ceratocone mesmo em fases avançadas da doença.⁽¹³⁾

Em recente revisão sistemática com meta-análise em vias de publicação conduzido por Santhiago e colaboradores, consultando os bancos de dados do MEDLINE, CINAHL, Biblioteca Cochrane e EMBASE, e analisando apenas estudos comparativos, foi demonstrado que há evidencia cientifica suficiente para afirmar que o protocolo padrão de CXL, é eficaz na interrupção da progressão da doença. Foram encontrados quinze estudos comparativos entre olhos submetidos ao método padrão de CXL e olhos não submetidos a tratamento, porem em sete artigos na há dados suficientes para análise adequada.^(14-20) Nossa meta-analise incluiu, portanto,396 olhos submetidos ao CXL, avaliados por período que variou de 12 a 36 meses, comparados a 338 olhos não tratados. Outros estudos, não comparativos, corroboram os achados de interrupção de progressão e aparente segurança do tratamento.^{(3-7,12,21-27)}

Considerando o seu início em geral na segunda década de vida e a natureza progressiva do ceratocone, pacientes pediátricos podem beneficiar-se através do tratamento com o CXL.⁽²⁸⁾Estudos recentes confirmam a eficácia do tratamento, assim como a significativa melhora dos padrões topográficos e acuidade visual.^29-30 Todavia, acompanhamento maior sugere que apesar da melhora inicial, pacientes pediátricos podem apresentar progressão a longo prazo.³¹ Estudos adicionais são ainda necessários e devem ter como foco o desenvolvimento de técnicas e um protocolo apropriado, não somente afim de obter resultados duradouros e eficazes, mas principalmente que sejam seguros para o grupo de pacientes em idade pediátrica. O aconselhamento adequado aos pais é fundamental para que compreendam a natureza progressiva da doença e a necessidade de intervenção.

Sugerimos que se indique o CXL em:

• · Ceratocone em progressão documentada na população adulta;

• · No diagnostico de ectasia pós cirurgia refrativa

• · No diagnostico de ceratocone na população com menos de 18 anos.

Pacientes com acuidade visual de 20/25 ou melhor, em qualquer idade, podem optar apenas por acompanhamento da doença, pois o CXL também apresenta complicações e pode cursar com baixa visual. Especificamente em crianças, que ainda apresentam adequada visão, o objetivo e as potenciais complicações de um eventual tratamento cirúrgico deve ser discutido e esclarecido antes de determinar qualquer conduta.

Ectasia iatrogênica da córnea

Ectasia de cornea após cirurgia refrativa (Ectasia) ocorre devido a instabilidade biomecânica entre as fibras de colágeno resultando em afinamento da córnea e encurvamento similar ao Ceratocone²¹. É por definição uma alteração progressiva.^(32-33)

Estudos iniciais demonstraram que o CXL é eficaz na interrupção da progressão da ectasia⁷, e, posteriormente, estudos prospectivos revelaram ainda aplanamento na topografia da córnea e melhora na acuidade visual um ano após o tratamento.³⁴ Os riscos específicos para CXL no tratamento da ectasia pós-LASIK incluem chance de haze, complicações no flap e crescimento epithelial na interface.

Avaliandoaeficácia do Tratamento

A principal medida evolutiva para se identificar o resultado do CXL, ou seja, que se interrompeu a progressão, é a analise longitudinal da curvatura da córnea. Além dos parâmetros de ceratomeria (K), como K máximo, K central, K mais curvo e até K mais plano, as outras variáveis que indicaram a progressão e subsequente indicação do tratamento devem também ser utilizadas para acompanhamento do resultado de estabilização, como acuidade visual e miopia.⁽¹²⁾

Clinicamente uma linha de demarcação estromal, que provavelmente é uma das indicações da profundidade do tratamento, pode ser detectadaao exame com lâmpada de fenda embora seja mais facilmente documentada atravésda tomografia de coerência optica (OCT) de segmento anterior e/ou microscopia confocal.⁽³⁵⁾Esta linha de demarcação provavelmente representa a transição entre estroma modificado pelo CXLe o estroma não tratado, mas não confirma o limite, até mesmo a presença de uma reação biomecânica, e, definitivamente, não representa necessariamente as únicas alterações promovidas pelo CXL. A linha de demarcação parece não estar relacionada com a alteração na acuidade visual ou na ceratometria máxima.⁽³⁶⁾

Estudos de laboratório nos mostram dados objetivos que confirmam que o CXL é de fato eficaz, através da visualização, em microscopia eletrônica, do aumento do diâmetro das fibras de colágeno.⁽³⁷⁾Além de maior resistência à digestão enzimática, ocorre aumento da rigidez biomecânica indicado pelo aumento no módulo de Young⁽²⁾identificados através de modalidades de imagem como a microscopia de força atômica⁽³⁸⁾ e a microscopia de geração de segundo harmônico. A microscopia de geração de segundo harmônico oferece uma oportunidade de imagem das fibrilas de colágeno em um modo de alto contraste, gerando uma reconstrução tridimensional e detectando diferenças no padrão de lamelas entre córneas tratadas e não tratadas.⁽³⁹⁾

A córnea tem propriedades elásticas dinâmicas e por isso a topografia fornece apenas uma fração da informação necessária para determinar a progressão, regressão ou estabilidade da doença. O estudo da biomecânica da córnea fornece informações adicionais que podem levar a uma melhor determinação do que significa eficácia pós CXL

Acompanhamento e medidas refrativas

Após o CXL para doenças ectasicas da córnea, recomendamos o acompanhamento do paciente de 3 em 3 meses no 1º ano, e de 6 em 6 meses a partir do 2º ano. De um modo geral medidas com finalidade refrativa, como adaptação de lente de contato pós CXL, tem melhores resultados após o período mais intenso de remodelamento estromal que dura cerca de 12 meses. Esta tem sido a rotina adotada pelo autor desta revisão.

Parâmetros de segurança e potenciais complicações

Os padrões de segurança estão centrados na proteção de estruturas oculares, tais como o endotelio da córnea, cristalino e retina. Primeiramente, uma espessura da córnea acima de 400µmdeve ser respeitada afim de proteger o endotelio da córnea.⁽⁴⁰⁾ Uma vez removido o epitélio, existe o risco de desidratação, causando afinamento significativo em alguns casos. Muitos pacientes que sofrem de ectasia da córnea, dentre elas o Ceratocone, já possuem um afinamento acentuado antes do tratamento.

Protocolos modificados utilizama Riboflavina hipo-osmolar, que promove retenção de liquido, levando a aumento da espessura em até aproximadamente 25% do valor original, e, em alguns casos, chegando-se até a espessura mínima recomendada. Sabe-seporem que em córneas com valores abaixo de 350 µm, é improvável que se chegue ate 400 µm. Estudos mais recentes utilizaram a Riboflavina sem Dextran para permitir o aumento da espessura da córnea.⁽⁴¹⁾Existe uma preocupação a respeito da segurança e eficácia dessas córneas de espessuras "iatrogenicamente modificadas", uma vez que a resposta ao CXL pode ser menor devido à concentração diminuídadas fibras de colágeno em uma córnea artificialmente hidratada.

Outra possível explicação para um risco de menor eficácia se refere ao fato do enrijecimento da cornea após o CXL ocorrer principalmente nas 300µm anteriores, logo, uma cornea excessivamente hidratada pode ser demasiadamente profunda para um tratamento efetivo.⁽⁴²⁾

Outra preocupação quanto a segurança inclui as complicações devido ao próprio tratamento. A remoção do epitélio cria uma variedade de riscos: infiltrados, reepitelização tardia e ceratite infecciosa.Quando ocorrem os infiltrados são estéreis e responde ao tratamento com corticoide, provavelmente representando uma reação de anticorpos do próprio organismo à modificação do tecido corneano.⁽⁴³⁾

Embora venha sendo estudado, o haze na cornea após o CXL ainda não tem seu impacto sobre a visão estabelecido. O dano aos ceratócitos, também é uma preocupação mesmo nas abordagens que preservam o epitelio. No entanto, estudos têm sugerido um repovoamento que ocorre dentro de semanas ou meses após o tratamento. Outros estudos sugerem que a apoptose de ceratócitos pode servir como um indicador para o sucesso do CXL.^(44-45)

Remodelamento e aplanamento pós CXL

O remodelamento e enrijecimento associados ao processo cicatricial pós CXL, podelevar a aplanamento, muitas vezes significativo, afinamento e até opacidade. Muitos estudos, inclusive alguns conduzidos por nosso grupo,^(46,47) já demostraram que pode acontecer intenso aplanamento pós CXL, podemos ultrapassar 10D. A melhor forma de acompanhar este aplanamento é através de mapas diferencias, comparativos.

Os principais motivos relacionados ao aplanamento intenso são provavelmente o aumento localizado do modulo elástico do tecido, profundidade efetiva do tratamento e a localização central do cone.^(47,48)

O aumento localizado do modulo elástico é explicado em parte por um ajuste viscoelastico gradual à alteração da distribuição do stress tecidual, imposto por um enrijecimento seletivo da córnea relativo a esclera adjacente. Teoricamente este enrijecimento associado ao CXL reduz a tensão central da cornea e a transfere para o limbo,possibilitando aplanamento e hipermetropização.

Como um processo fotoquímico, diferentes barreiras biológicas vão desempenhar um papel na profundidade efetiva do tratamento. Dentro deste contexto, respostas diferentes em relação as propriedades biomecânicas ou um maior ou menor aumento no módulo elástico é provavelmente explicada pela heterogeneidade da doença; que envolve a interação intrínseca entre as fibras de colágeno e matrix celular e suas orientações, específicos de cada paciente. Sendo assim, fibras de colagénio com maior espaçamento entre elas, e um entrelaçamento mais defeituoso permite oefeito fotoquímico CXL alcançar áreas mais profundas e provocar um aumento mais intenso na rigidez da córnea. É, provavelmente, por este motivo que casos mais avançados (topograficamente córneas mais curvas) tem mais chance de maior aplanamento.

A influencia da localização central no maior aplanamento esta relacionada ao ancoramento à esclera em 360º, possibilitando maior distribuição das foras tensionais e efeito na curvatura.

Protocolo de CXL com maior fluência (método acelerado)

De acordo com a lei da reciprocidade de Bunsen-Roscoe, o mesmo efeito fotoquímico poderia ser alcançado com a redução do tempo de iluminação e correspondente aumento da intensidade de irradiação. De forma que 3 minutos de irradiação à 30 mW/cm², 5 minutos de irradiação à 18 mW/cm² ou 10 minutos de irradiação à 9 mW/cm² deveriam prover o mesmo efeito obtido com 30 minutos de irradiação à 3 mW/cm². Uma vez que todas combinações de tempo e intensidade resultariam a mesma quantidade de energia 5,4 J/cm².

Há uma grande variação nos parâmetros utilizados nos diferentes estudos que utilizam o método acelerado. As intensidades luminosas descritas variam de 7 - 30 mW/cm² com tempo de irradiação entre 3 e 15 minutos e um tempo de exposição à Riboflavina pré-irradiação entre 5 e 30 minutos. Todavia, apesar de ainda não haver um protocolo padrão para a forma acelerada, os resultados são concordam em revelar interrupção da progressão, estabilidade nos valores ceratométricos e, em alguns casos, até mesmo aplanamento da córnea.^(49-54)

Novas indicações do CXL

Além das indicações iniciais afim de estabilizar o processo da doença ectásica, recentemente novas indicações foram avaliadas, que incluem a combinação do CXL combinado ao excimer laser denominado CXL plus⁽⁵⁵⁾ e o PACK- CXL (denominada cromóforo fotoativados para ceratite) usando os princípios do CXL para tratar infecções da córnea.⁽⁵⁶⁾

CXL Plus

O termo CXL plus refere-se à combinação de CXL com excimer laser. A ceratectomia fotorrefrativa (PRK)guiada pela topografia permite remodelar a córnea, teoricamente tornando-a mais regular, sem abordar a natureza progressiva da doença. Estudos têm mostrado uma melhora na acuidade visual e estabilidade com PRK topoguiado com CXL.⁽⁵⁷⁾

A eficácia e segurança deste tipo de tratamento sequenciais, a profundidade do tratamento máximo e o uso de mitomicina C ainda são assuntos em debate. Caso seja realmente seguro a longo prazo a associação de PRK Topoguiadoseguido do CXL pode ser promissor para a reabilitação visual e interrupção da progressão da doença.

Além de potenciais complicações documentadas como opacidade ou afinamento, ainda há muito a se aprender sobre como por exemplo deve ser a sequencia adequada de combinação, antes o PRK guiado pela topografia e depois o CXL ou o contrario. Ou se devem ser feitos um imediatamente em sequencia ou deve-se aguardar algum tempo, e depois realizar o 2º procedimento. Caso se realize 1º o PRK guiado e depois o CXL, poderíamos ter uma grande imprevisibilidade do tratamento pelo processo de remodelamento associado ao CXL que já foi discutido. Seria então melhor realizar o CXL, esperar o remodelamento em aproximadamente 12 meses e somente depois realizar a cirurgia guiada pela topografia. Devemos lembrar que neste caso excimer laser seria empregado sobre uma córnea teoricamente modificada, enrijecida, e a taxa de ablação seria diferente, pois ocorreria hipocorreção. Teríamos que compreender melhor as taxas de ablação do excimer laser após o CXL.

Além disso devemos compreender que quando se trata de excimer laser em córneas com ceratocone, a opção que tem sido mais estudada e aceita, é o PRK guiado pela topografia. Isto porque diferente de outras modalidades de PRK convencional ou até mesmo guiado por frente de onda, o PRK guiado pela topografia realiza uma combinação de PRK miopico parcial no ápice do cone com um PRK hipermetropico na área adjacente. Desta forma há uma menor remoção de tecido da área mais fina e mais afetada pela doença. É importante lembrar ainda que a principal função deste tipo de tratamento guiado pela topografia não é correção refrativa e sim a regularização da córnea.

Tratamentos guiados por frente de onda parecem não ser menos adequados que os guiados por topografia, primeiro pela dificuldade de se obter exames de aberrometria confiáveis e reprodutíveis em córneas tão irregulares, segundo porque neste tratamento tipo de tratamento o software iria identificar a área mais aberrada (geralmente ápice do cone) e tentar regulariza-la ao máximo, podendo significar afinamento excessivo em uma área já doente.

Cromóforo fotoativado para ceratite - PACK-CXL

Em adição ao tratamento da ectasia, os princípios básicos do CXL já foram sugeridos como opção de tratamento para ceratite infecciosa denominado "photoactivated chromophore for keratitis" (PACK-CXL) ou cromóforo fotoativado usado para o tratamento da ceratite infeciosacTeorias incluem a capacidade para danificar diretamente o microorganismo e aumentar a resistência a danos enzimáticos, impedir a replicação microbiana, liberar radicais livres, e alterar a superfície ocular com o propósito de criar um ambiente hostil para mais microrganismos.

Estudos in vivo em animais mostraram eficácia no tratamento de patógenos em ceratite desafiadoras, enquanto dados clínicos mostram melhoria na ceratite com o uso concomitante de anti-microbianos.⁽⁵⁷⁾ O único estudo prospectivo comparativo que avalia o uso da medicação sozinha versus a medicação associada ao PACK-CXL foi descrito por Said et al, e revelou que o tempo de cura era o mesmo com uma tendência de resolução mais rápida no grupo PACK-CXL.⁽⁵⁸⁾Uma revisão sistemática e meta-análise de 12 séries de casos sugeriu um melhor tempo de cicatrização em casos relacionados a bactérias e pior prognostico e maior risco de transplante em casos de fungo, acantameba e gram negativos.⁽⁵⁹⁾

Os protocolos acelerados parecem também ser capazes de tratar e eliminar agentes patogênicos, permitindo um tratamento mais breve e com resolução equivalente quanto a morte dos patógenos. Alguns relatos de caso sugerem que o PACK-CXL sozinho pode ajudar no tratamento da ceratite infecciosa, mas estudos maiores são necessários.

Estudo prospectivos randomizados comparando o tratamento com medicamento versus medicamento com PACK-CXL, versus PACK-CXLseriam o ideal, mas existem considerações éticas relevantes. Independentemente, o PACK-CXL oferece outra opção de tratamento para casos difíceis de ceratite microbiana.

Em conclusão, existe evidencia suficiente para afirmar que o CXL da córnea é eficaz na estabilização da doença ectásica da cornea.

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  Jan-Feb 2017

Histórico

• Recebido
  25 Nov 2016
• Aceito
  18 Jan 2017