Nôvo meio para isolamento de enterobacteriáceas e diferenciação simultânea das colônias de Proteus e Providência

COMUNICAÇÃO

Nôvo meio para isolamento de enterobacteriáceas e diferenciação simultânea das colônias de Proteus e Providência¹

Sebastião Timo Iaria; Luis Cotillo Z.

RESUMO

Um nôvo meio é proposto para o isolamento de enterobacteriáceas. Baseia-se na propriedade de desanimar a fenil-alanina que possuem tôdas as bactérias dos grupos Proteus e Providencia. As colônias dêstes microrganismos apresentam no meio descrito coloração marrom característica. As colônias das outras enterobacteriáceas, fermentadoras rápidas ou lentas e não fermentadoras da lactose, apresentam aspecto diferente.

SUMMARY

A new culture medium for the isolation of Enterobacteriaceae is proposed. It is based on the property common to Proteus and Providence of deaminating phenylalanine. In the culture medium here proposed the colonies of the mentioned microorganisms show a characteristic brown colour. Colonies of other Enterobacteriaceas show a quite different aspect.

Quando se pretende isolar enterobacteriáceas constitui sempre um problema, nos diversos meios seletivos e diferenciais de que dispomos, a semelhança entre as colônias das bactérias dos grupos Proteus e Providencia e as das outras enterobacteriáceas não fermentadoras ou fermentadoras lentas da lactose. Geralmente, isolam-se diversas colônias suspeitas de serem de salmonelas ou shigelas que, na realidade, não raro são de Proteus ou de Providencia, grupos êstes identificáveis pela capacidade que apresentam todos os seus componentes de desaminar a fenil-alanina. Baseando-se nesta propriedade dêstes microrganismos, idealizou-se um nôvo meio de isolamento que, permitindo a separação das colônias dos microrganismos fermentadores rápidos ou tardios da lactose daquelas dos não fermentadores dêste açúcar, possibilitam, ao mesmo tempo, a diferenciação direta das colônias de Proteus e Providencia.

A fórmula do meio proposto, denominado Agar lactose fenil-alanina (ALFA), é a seguinte:

Para o preparo dêste meio, misturar num balão de vidro cloreto de sódio, extrato de levêdo, proteose-peptona, agar e água destilada (82,5 ml) ; aquecer até dissolver os ingredientes misturados e ajustar o pH a 7,2; em seguida, adicionar fenil-alanina, solução de vermelho de fenol a 1% (0,25 ml) e esterilizar em autoclave a 120°C durante 15 minutos. Enquanto ainda quente (80-100°C) adicionar, assèpticamente, solução de desoxicolato a 4% em água destilada (12,5 ml) esterilizada a 100°C durante 15 minutos, solução de lactose a 20% (5 ml) esterilizada por filtração em filtro Seitz e citrato de ferro amoniacal (0,2 g). Em seguida, o meio é distribuído em placas. Conserva-se bem na geladeira por 4 a 6 dias.

No meio acima descrito as colônias de Proteus e Providencia apresentam uma coloração marrom característica, enquanto que as de salmonelas e shigelas se mostram de côr rósea. As colônias de bactérias fermentadoras da lactose apresentam-se com côr branco amarelada. Por outro lado, as colônias de Proteus em tôdas as experiências realizadas mostraram-se sempre isoladas, não ocorrendo em nenhuma oportunidade crescimento do tipo invasor.

Recebido para publicação em 31-7-1967

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Da Cadeira de Microbiologia e Imunologia Aplicadas da Faculdade de Higiene e Saúde Pública da USP.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  20 Set 2006
• Data do Fascículo
  Jun 1967

Histórico

• Recebido
  31 Jul 1967