Isolamento de myxovirus parainfluenza 3 de gado bovino no Estado de São Paulo, Brasil

Isolation of Myxovirus parainfluenza type 3 from cattle in S. Paulo State, Brazil

ARTIGO ORIGINAL

Isolamento de myxovirus parainfluenza 3 de gado bovino no Estado de São Paulo, Brasil

Isolation of Myxovirus parainfluenza type 3 from cattle in S. Paulo State, Brazil

José Alberto N. Candeias^I; Washington Sugay^II; Luiz Conrado Ribeiro^III

^IDo Departamento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas da USP – Av. Dr. Arnaldo, 715, São Paulo, SP – Brasil

^IIDa Secção de Toxicologia e Higiene Comparada do Instituto Biológico – Av. Cons. Rodrigues Alves, 1252, São Paulo, SP – Brasil

^IIIDa Secção de Virus do Instituto Biológico – Av. Cons. Rodrigues Alves, 1252, São Paulo, SP – Brasil

RESUMO

Faz-se referência ao isolamento, em São Paulo, de 4 cêpas de Myxovirus parainfluenza do tipo 3, do tecido pulmonar de gado bovino com lesões de pneumonia, que se mostraram antigenicamente semelhantes à cêpa bovina SF-4. Uma das cêpas isoladas mostrou certa relação antigênica com a cêpa humana HA-1.

Unitermos:Myxovirus parainfluenza 3 *; Pneumonia *; Gado bovino *; Cêpa bovina SF-4; Cêpa humana HA-1.

SUMMARY

The isolation of Myxovirus parainfluenza type 3 from cattle with pneumonia, in S. Paulo, Brazil, is reported. All the strains isolated appeared to be antigenically related to the bovine strain SF-4. It was possible to establish a certain degree of antigenic relationship between the human strain HA-1 and one of the bovine strains isolated.

Uniterms:Myxovirus parainfluenza 3 *; Cattle pneumonia*; Bovine strain SF-4; Human strain HA-1.

INTRODUÇÃO

REISINGER et al.¹⁸ isolaram, da secreção nasal de bovinos com "febre dos transportes", uma cêpa de vírus parainfluenza do tipo 3. Esta observação foi complementada, em têrmos da relação etiológica, pelas pesquisas de HOERLEIN et al.¹³ e ABINANTI & HUEBNER ³. Trabalhos posteriores^{2, 4, 7, 11, 16, 21} vieram confirmar os resultados destas pesquisas. A relação antigênica entre as cêpas isoladas de bovinos e caprinos e a cêpa humana HA-1 foi estudada por HENLE et al.¹², ABINANTI et al.³ e KETLER et al.¹⁵. No Brasil, os dois primeiros inquéritos sorológicos, em relação ao vírus parainfluenza 3, feitos em gado bovino leiteiro do Estado de São Paulo^5,6, evidenciaram não só uma elevada porcentagem de animais com anticorpos inibidores da hemaglutinação para as cepas SF-4 e HA-1, mas permitiram, também, demonstrar a relação antigênica existente entre as cepas humana e bovina. Apresentamos os resultados da tentativa de isolamento de Myxovirus parainfluenza de gado bovino com quadros pneumônicos.

MATERIAL E MÉTODOS

Foram utilizadas culturas primárias de rim de macaco rhesus e rim de bovino. As primeiras, obtidas de fonte comercial, foram preparadas em meios de Melnick A e B e as segundas em meio de Hanks' contendo 20% de sôro bovino; o meio de manutenção utilizado nas culturas de rim de bovino e de macaco rhesus foi o meio 199.

Os espécimens para inoculação prepararam-se por trituração dos fragmentos de tecido pulmonar, com lesões pneumônicas, em solução fosfatada tamponada contendo 0,75% de albumina bovina e 1.000 unidades de penicilina e 1.000 mu de estreptomicina por mililitro, de modo a obter-se uma suspensão final a 10%. Após centrifugação a 500 r.p.m., durante 15 min, utilizou-se o sobrenadante para inoculação das culturas celulares, usando-se 0,2 ml por cultura. A multiplicação viral foi confirmada pelo ECP e pela prova de hemadsorção com hemácias de cobaia ²³. As culturas foram mantidas a 33°C, em sistema giratório e a 37°C, em sistema estacionário.

As reações de neutralização e fixação do complemento foram executadas segundo a técnica descrita por KETLER et al.^l5. Executaram-se reações de neutralização cruzada entre as cepas isoladas e as cepas SF-4 e HA-1 ⁽¹⁾, usando soros padrões anti-SF-4 e anti-HA-1 e soros preparados em coelho. Êstes foram obtidos com duas inoculações" endovenosas das cêpas bovinas isoladas, com 15 dias de intervalo. A sangria dos animais imunizados foi feita 20 dias após a primeira inoculação.

RESULTADOS

Do total de espécimens de tecido pulmonar obtido de 25 bovinos, abatidos em matadouro, com lesões pneumônicas, foram isoladas 4 cepas de Myxovirus parainfluenza do tipo 3. Os títulos obtidos em cultura de rim de bovino não ultrapassaram, para qualquer das cepas isoladas, 10 ^{6, 5} DICT₅₀ por mililitro. A reação de inibição da hemadsorção feita com soros padrões para Myxovirus parainfluenza dos tipos 1, 2 e 3 levou à caracterização de tôdas as cêpas como pertencendo ao tipo 3. O tratamento das cêpas bovinas isoladas com 5% de clorofórmio, durante 10 min, resultou na destruição total do poder infetante do vírus. Na Tabela 1 apresentamos os resultados das reações de neutralização cruzada. Cada vírus isolado foi neutralizado em título mais elevado pelo sôro homólogo. Os títulos de neutralização obtidos usando os soros preparados contra as cêpas bovinas isoladas e a cêpa SF-4 são elevados e semelhantes, excetuando os relativos à cêpa bovina B-7 e à cêpa humana HA-1. Em relação à cêpa HA-1 obtiveram-se, em geral, títulos de neutralização mais baixos.

Na Tabela 2 figuram os resultados da reação de fixação de complemento usando o sôro anti-SF-4 e, como antígenos, as diferentes cêpas isoladas. A "titulação em bloco" evidencia que o sôro anti-SF-4 reage igualmente bem com três das cêpas isoladas; há um comportamento diferente em relação à cêpa B-7. Na Tabela 3 apresentamos os resultados da "titulação em bloco" da cêpa B-7 frente ao sôro anti-HA-1.

DISCUSSÃO

Os quadros de pneumonia em gado bovino estão, freqüentemente, relacionados com adenovirus^{8, 9} e vírus parainfluenza 3 ^{2, 4, 18, 21}. COLE ⁸ refere-se igualmente à participação de reovírus dos tipos 1, 2 e 3 e ao estudar a incidência de anticorpos virais para o vírus parainfluenza 3, em casos de pneumonia de bovinos, encontrou 51% de casos positivos. As porcentagens por nós encontradas ⁶ foram bem mais elevadas, atingindo valores de 84,1%. Porcentagem semelhante foi encontrada por ST. GEORGE ¹⁹ na Austrália e na Nova Guiné. O vírus parainfluenza 3 parece ser um agente etiológico freqüentemente comprometido em quadros pneumônicos de bovinos.

As quatro cepas de Myxovirus parainfluenza do tipo 3, isoladas no grupo estudado de 25 animais com lesões pneumônicas, mostraram-se antigênicamente muito semelhantes, talvez idênticas, à cêpa SF-4; a cêpa bovina B-7 apresentou-se antigênicamente mais próxima da cêpa humana HA-1, muito embora seja semelhante às cêpas bovinas (Tabelas 1 e 2). A "titulação em bloco", por fixação de complemento, frente ao sôro anti-HA-1 (Tabela 3) também evidenciou uma certa semelhança antigênica entre a cêpa- B-7 e a cêpa humana, o que permite considerar que, das quatro cêpas bovinas isoladas, a cêpa B-7 é a única que parece possuir um componente antigênico comum à cêpa humana HA-1. Nossos resultados com os soros preparados em coelho, com as cêpas bovinas, e o sôro padrão anti-HA-1 (Tabela 1) indicam uma semelhança antigênica nos dois sentidos, frente à cêpa HA-1; as pequenas diferenças observadas podem corresponder a variações antigênicas ocorridas dentro da mesma espécie, podem refletir infecções cruzadas entre espécies diferentes ou podem, simplesmente, ser de natureza casual. Seria necessário estudar um número muito mais amplo de soros para determinar qual o verdadeiro significado das diferenças notadas. A ocorrência de transmissão inter-espécies de vírus parainfluenza 3 tem sido sugerida por vários autores ^{10, 11, 20, 21} e recentemente PRAVI et al. ¹⁷ isolaram de morcêgos frugívoros um nôvo sub-tipo de vírus parainfluenza do tipo 2, demonstrando a presença, em soros humanos, de anticorpos contra êste vírus. É possível que as reações sorológicas do tipo das encontradas entre a cêpa bovina B-7 e a cêpa humana HA-1 sejam simplesmente de natureza heterotípica cruzada, ou o resultado manifesto de recombinações genéticas entre diferentes cepas de vírus parainfluenza de várias espécies animais, tal como sucede com os sub-tipos de vírus da influenza A isolados do homem e outros animais ²². Não devemos, por outro lado, esquecer que o processo de maturação dos vírus parainfluenza torna possível a incorporação ao envólucro viral de materiais celulares, cuja presença poderia igualmente ser responsável pelas reações sorológicas cruzadas ¹⁴.

Recebido para publicação em 28-7-1971

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(1)

Cêpas SF-4 e HA-1, cedidas pelo Virus Reference Laboratory – Central Public Health Laboratories – Londres.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  14 Set 2006
• Data do Fascículo
  Dez 1971