Aspectos morfológicos de ovos de triatominae: II - Características macroscópicas e exocoriais de dez espécies do gênero Rhodnius Stal, 1859 (Hemiptera - Reduviidae)

Morphological aspects of triatominae eggs: II. Macroscopic and exochorial characteristics of ten species of the genus Rhodnius Stal, 1859 (Hemiptera - Reduviidae)

ARTIGO ORIGINAL

Aspectos morfológicos de ovos de triatominae. II – Características macroscópicas e exocoriais de dez espécies do gênero Rhodnius Stal, 1859 (Hemiptera – Reduviidae)

Morphological aspects of triatominae eggs. II. Macroscopic and exochorial characteristics of ten species of the genus Rhodnius Stal, 1859 (Hemiptera – Reduviidae)

José Maria Soares Barata

Do Departamento de Epidemiologia da Faculdade de Saúde Pública da USP – Av. Dr. Arnaldo, 715 – 01255 – São Paulo, SP – Brasil

RESUMO

Foi realizado estudo morfológico do exocório de ovos de dez espécies de Rhodnius (Hemiptera-Reduviidae) através de microscopia eletrônica de varredura e microscopia óptica, com vistas à classificação taxionômica: Rhodnius domesticus Neiva & Pinto, 1923; R. ecuadoriensis Lent & León, 1958; R. nasutus Stal, 1859; R. neglectus Lent, 1954; R. neivai Lent, 1953; R. pallescens Barber, 1932; R. paraensis Sherlock, Guitton & Miles, 1977; R. pictipes Stal, 1972; R. prolixus Stal, 1859; e R. robustus, 1927. São apresentados dados sobre aspectos gerais das cascas e dos ovos quanto à forma, coloração e tamanho, bem como as modificações que poderão ocorrer quanto à coloração durante o desenvolvimento embrionário pós-oviposição. São elaboradas chaves dicotômicas para a classificação destas espécies, baseadas na utilização de caracteres visíveis pela microscopia óptica e microscopia eletrônica de varredura.

Unitermos: Triatomíneos, ovos. Rhodnius (Hemiptera, Reduviidae).

ABSTRACT

Morphological studies of exochorial patterns of Rhodnius (Hemiptera-Reduviidae) genus were made. Ten species were studied by scanning and common microscopy, and data were described mainly for systematic purposes. The species included are Rhodnius domesticus Neiva & Pinto, 1923; R. ecuadoriensis Lent & Leon, 1958; R. nasutus Stal, 1959; R. neglectus Lent, 1954; R. neivai Lent, 1953; R. pallescens Barber, 1932; R. paraensis Sherlock, Guitton & Miles, 1977; R. pictipes Stal, 1872; R. prolixus Stal, 1859; and R. robustus Larrousse, 1927. General aspects of eggs and shells such as shape, color patterns, and size measurements are also presented. Data about changes of coloration occurred during egg maturation were recorded and related to the embryonic development. The characteristics described were utilized to work out identification keys for these Triatominae eggs, both by optical and scanning electron microscopy.

Uniterms: Triatomidae, eggs. Rhodnius (Hemiptera, Reduviidae).

1. INTRODUÇÃO

O papel do inseto vetor é sem dúvida decisivo no controle da tripanossomíase americana, quer pela alta capacidade de domiciliação de determinadas espécies de triatomíneos, quer pelas próprias características da doença, tais como dificuldade de diagnóstico precoce, cronicidade, ausência de tratamento e imunização adequada, ou mesmo pela alta freqüência de animais reservatórios domesticados ou domiciliados. Dessa maneira, novas informações sobre esses insetos, tanto em sua fase adulta, quanto na de ninfa ou de ovo, serão sempre importantes elementos para se estabelecer diagnósticos específicos cada vez mais precisos e que, conseqüentemente, virão auxiliar no esclarecimento do papel de cada espécie transmissora. Esses aspectos ecológicos deverão ser aprofundados com o desenvolvimento das campanhas de controle, quando se fará mais necessário o conhecimento de tais espécies em todos os seus estágios biológicos, principalmente porque está comprovado que, com o desenvolvimento dessas medidas, particularmente nas áreas em vigilância, as populações vetoras tornam-se rarefeitas, e no ambiente domiciliar passa a ser mais freqüente o encontro de ovos ou cascas de ovos que de ninfas ou adultos. Com isso, faz-se necessário dar maior importância ao registro e identificação específica desses ovos, o que não ocorria enquanto esses casos eram apenas registrados como suspeitos de infestação.

Na revisão de Triatominae de Lent e Wygodzinsky²⁹ (1979) o gênero Rhodnius Stal, 1859, está constituído por doze espécies: R. brethesi Matta, 1919; K. dalessandroi Carcavallo e Barreto, 1976; R. domesticus Neiva e Pinto, 1923; R. ecuadoriensis Lent e León, 1958; R. nasutus Stal, 1859; R. neglectus Lent, 1954; R. neivai Lent, 1953; R. pallescens Barber, 1932; R. paraensis Sherlock, Guitton e Miles, 1977; R. pictipes Stal, 1872; R. prolixus Stal, 1859 e R. robustus Larrousse, 1927.

O objetivo do presente trabalho é o estabelecimento do diagnóstico de dez espécies deste gênero: R. domesticus, R. ecuadoriensis, R. nasutus, R. neglectus, R. neivai, R. pallescens, R. paraensis, R. pictipes, R. prolixus e R. robustus, tomando-se por base as características dos ovos. Embora esse diagnóstico tenha se situado preferentemente na escultura exocorial, acresceu-se-lhes aspectos macroscópicos dos ovos e/ou das cascas.

No gênero Rhodnius as fêmeas fixam seus ovos ao substrato, característica essa provavelmente associada a hábitos ornitófilos primitivos ou atuais. E desse fato advém aspectos morfológicos, ecológicos e/ou epidemiológicos muito peculiares. A escultura exocorial, por exemplo, é típica e mantém semelhança muito acentuada com outras espécies em outros gêneros que também fazem fixação ao substrato. O estudo desse caráter poderá detectar algum fator decisivo a essa fixação, e contribuir para a profilaxia. Como se sabe o homem rural utiliza folhas e caules de palmeiras como matéria prima para confecção de casas e artefatos diversos, isso então introduz no domicílio a colonização desses insetos a partir de ovos fixados a esse substrato. Outra característica importante em relação a esta fixação é a presença de opérculos inclinados em relação ao plano sagital do ovo, o que garante durante a eclosão um deslocamento desse opérculo livre de obstáculos e, conseqüentemente, uma melhor eficácia reprodutiva.

Por outro lado pertence a esse gênero, Rhodnius prolixus, que, juntamente com Triatoma infestans e Panstrongylus megistus, são no momento atual as espécies epidemiológicamente mais importantes na transmissão da Doença de Chagas. Aquela espécie é a responsável pela transmissão em extensas áreas da região Neotropical, particularmente no norte e noroeste da América do Sul, decerto por suas características de alta capacidade de domiciliação, elevada densidade nos domicílios, grande suscetibilidade ao Tripanosoma cruzi e ampla distribuição geográfica. Do sul do México ao norte do Brasil tem sido assinalada a sua presença, mas Tavares³⁵ (1971) a encontrou bem mais ao sul, no Estado de São Paulo, cohabitando com R. neglectus em ninhos de pássaros em casas abandonadas. Convindo ressalvar que se trata de encontro isolado e não repetido até o momento.

R. neglectus é outra espécie epidemiologicamente importante, tem ampla distribuição no Brasil e mantém todas as características de R. prolixus, apenas com dispersão mais restrita ao ambiente natural. Entretanto, registros da capacidade para invadir ecótopos artificiais foi verificada em São Paulo e Minas Gerais, através de colonizações em galinheiros experimentais (Forattini e col.^20,21, 1971, 1979). Bem como tem sido observada sua colonização no ambiente domiciliar com certa freqüência.(Barreto e col.⁴, 1968; Forattini e col.²¹, 1971).

Na subfamília Triatominae alguns autores preocuparam-se com as características dos ovos ao estudar uma ou mais espécies, entretanto, no total da literatura existente, perfazem uma minoria. Alguns deram uma ou mais características macroscópicas (tamanho, forma, coloração, tipo da casca, fixação, entre outros) ao descrever ou redescrever uma espécie (Neiva e Pinto³¹, 1923; Uribe³⁷, 1927; Lent²⁶, 1943; Herrer e col.²³, 1954; Lent e Jurberg²⁷, 1965; Carcavallo e col.¹⁴, 1975; entre outros). Galliard²² (1935), Abalos e Wygodzinsky¹ (1951), Ryckman³³ (1962), estudando grupo de espécies preocuparam-se tanto com aspectos macroscópicos quanto com aspectos exocoriais. Outros ainda como Usinger³⁸ (1944); Carcavallo e Tonn¹⁵ (1976), fixaram suas observações quase exclusivamente nos aspectos macroscópicos. Outras vezes chegou-se a apresentar chaves para classificação utilizando-se esses caracteres (Usinger³⁸, 1944; Abalos e Wygodzinsky ¹, 1951; Carcavallo e Tonn ¹⁵, 1976).

No gênero Rhodnius em particular, com raras exceções, os dados mais antigos sobre os aspectos macroscópicos são quase sempre referentes a R. prolixus (Brumpt ^10,11,12. 1913, 1927 e 1949; Larrousse²⁵, 1927; Uribe³⁷, 1927; Galliard²², 1935; Beament⁶, 1946). Trabalhos mais recentes, entretanto, tem abrangido outras espécies. Tal é o caso da presença ou ausência de projeções exocoriais (Forattini e Barata¹⁹, 1974), da mensuração e coloração de três espécies (Lent e Valderrama²⁸, 1977) ou da mensuração de dez espécies (Barata e col.², 1980).

Em relação ao aspecto da escultura exocorial Galliard²² (1935) foi um dos primeiros a mostrar a importância deste caráter na taxionomia, afirmando que as cascas dos ovos de triatomíneos apresentavam em sua superfície externa uma ornamentação característica e constante que permitia distinguir as diferentes espécies uma das outras.

Os trabalhos de Abalos e Wygodzinsky ¹ (1951), Barth e Muth⁵ (1958), Ryckman³³ (1962) e Lucena e Rego³⁰ (1969) confirmaram a validade taxionômica desses caracteres. Ryckman³³ chegou a utilizá-los como importante fator no estudo do "complexo protracta".

Entretanto na maioria dos autores citados não se observou a tentativa de delinear uma caracterização genérica. Os dados apresentados eram quase sempre estudo aleatório de diferentes espécies e muitas vezes a caracterização apresentada como específica era pertencente a um grupo de espécies e, portanto, de ordem genérica. De qualquer forma, no gênero Rhodnius coube a Barth e Muth⁵ (1958) descrever mais de uma espécie (R. prolixus e R. neglectus) e a apresentar características específicas capazes de diferenciá-las.

A taxionomia, entretanto, não é a única meta do estudo desses caracteres, alguns autores os estudaram na tentativa de associá-los a aspectos funcionais particularmente aqueles ligados a embriogênese (Beament ^6,9 1946, 1949; Barth e Muth⁵ , 1958; Chauvin e col.¹⁶ 1973).

A seguir relaciona-se as espécies com as principais citações em qualquer um desses aspectos.

2. MATERIAL E MÉTODOS

Todo o material estudado, com exceção de algumas doações de cascas, foi obtido a partir de colônias mantidas no insetário do Departamento de Epidemiologia da Faculdade de Saúde Pública da Universidade de São Paulo. Essas colônias foram constituídas por material coletado no campo ou a partir de cepas doadas por diferentes pesquisadores. Nelas os barbeiros são alimentados uma vez por mês com sangue de ave e mantidos em estufa a uma temperatura uniforme (28^oC) e com umidade relativa do ar de 70 a 80%. Dessas colônias retiraram-se então ovos e cascas para as observações constantes no presente trabalho.

Para observações dos ovos e cascas quanto à forma e coloração utilizou-se lupa estereoscópica ao exame da luz natural. Para observações quanto ao aspecto da casca estudaram-se todas as espécies e procedências relacionadas neste trabalho. Não tendo sido determinado número fixo de exemplares, todo o material disponível foi examinado. Para observações em ovos embrionados com vistas à mudança de forma e/ou coloração durante o desenvolvimento embrionário foram estudadas as seguintes espécies: R. ecuadoriensis, R. nasutus, R. neglectus, R. neivai, R. pictipes, R. prolixus e R. robustus. Sempre que possível foram tomados 20 ovos recém-postos, mantidos em condições idênticas a das colônias e examinados diariamente até a eclosão das ninfas. Pela impossibilidade de aquisição de material vivo de R. domesticus e R. pallescens, destas espécies examinaram-se ovos embrionados mortos em diferentes estágios de evolução. A impossibilidade de obtenção de material embrionado de R. paraensis impediu-nos de descrever-lhes esse aspecto.

Para observações do exocório através de microscopia eletrônica de varredura (MEV) foram estudadas todas as espécies, e sempre que possível foi analisado o mínimo de 5 ovos ou cascas para cada procedência. Os ovos ou cascas inteiras sem prévia preparação foram fixados em pequenos toros de latão, com cola carbônica ou esmalte de unha (incolor), e este último ofereceu melhores resultados. Esse material foi então metalizado, revestindo-se primeiro de carbono e depois de ouro, em metalizador a vácuo Metal-Lux modelo ML. 444e/77. Após essa metalização, as amostras foram levadas ao microscópio eletrônico de varredura Jeol, modelo JSM-P/15, para observações das estruturas da superfície da casca e seleção de áreas representativas, que passaram então a ser fotografadas.

Para observações do exocório através de microscopia óptica (MO) foram também estudadas todas as espécies e do mesmo modo, sempre que se dispunha de material, 5 exemplares de cada procedência foram examinados. Este processo pode ser subdividido em duas partes: a) quanto às observações através de transparência de fragmentos planos sem coloração; e b) através de cortes histológicos transversais corados.

a) Observação por transparência de planos. – As cascas de ovos foram colocadas em maceração em solução de álcool 70%, glicerina e fenol, conforme técnica de Lucena e Rego³⁰ (1969). Pequenos fragmentos foram cortados e montados com este mesmo líquido entre lâmina e lamínula, sob lupa esteroscópica e levadas a examinar em microscópio óptico. Embora todo o material de exocório estudado tivesse sido examinado mediante esta técnica e em todas descrições feitas tenham sido sempre citados tais aspectos, deixamos de apresentar fotos ou desenhos obtidos por este processo, por achar que as ilustrações em fotos por MEV dispensariam tal duplicação.

b) Observação por transparência de cortes transversais. – Os cortes transversais de cascas de ovos de 10 u de espessura foram feitos em micrótomo e analisados em microscópio óptico. As áreas padrões desses cortes são neste trabalho apresentadas, para cada uma das espécies estudadas, através de desenhos em câmara clara. Para esses cortes foi utilizada a técnica de desidratação pelo xilol, inclusão em parafina e coloração pela hematoxilina e eosina (Eosin Bluish) segundo Bücherl¹³ (1972).

3. RESULTADOS E DISCUSSÕES

3.1. Características do Gênero Rhodnius.

3.1.1. Aspectos macroscópicos dos ovos e/ou das cascas

Os ovos das espécies de Rhodnius têm formato geral elipsóide, sendo mais acentuadamente alongados em determinadas espécies como R. pallescens, ou menos alongados, com certo aspecto atarracado como R. neivai e R. robustus. Possuem "achatamento lateral" ¹ evidente, discreto ou ausente, o que poderá, em cada caso, dar assimetria nítida, pouco acentuada ou mesmo ausente em relação ao eixo longitudinal (Figs. 1-4 e ⁷). Esse achatamento induz inclinação do eixo transversal do opérculo em relação ao plano sagital do ovo e por conseguinte ao plano do substrato, já que freqüentemente esses ovos são fixados em posição horizontal (Fig. 3).

Esse caráter, aparentemente constante em todos os ovos heterópteros hematófagos que se fixam ao substrato, é particularmente acentuado entre os Cimicídeos. De um certo modo, seria isso uma importante peculiaridade ecológica ² pois, inexistindo essa inclinação, o deslocamento do opérculo durante a eclosão poderia ser parcial ou totalmente obstruído pelo cimento da fixação ou mesmo por elementos do substrato. Uma vez que tais ninfas não possuem, como as de certos grupos, estruturas rompedoras, ocorrendo a saída pelo simples impulso de dentro para fora provocado pela ninfa. Outras vezes esse achatamento torna-se mais acentuado marcando no cório uma depressão em forma de "chanfradura longitudinal" (Fig. 4), de tal forma que se poderá evidenciar mesmo em corte histológico transversal, como em R. pallescens (Fig. 5). Nesta espécie essa formação sobressai ainda mais ,pois do mesmo modo que o "colarinho" e o opérculo, ela é mais pigmentada em castanho do que as outras áreas do cório (Fig. 4).

No polo anterior possuem opérculo que, segundo Southwood ³⁴ (1956), é o do tipo "opérculo verdadeiro", e que se desprende na ocasião da eclosão possibilitando a saída da ninfa. Esse opérculo tem forma de disco delgado e apresenta duas regiões – uma borda plana, mais grossa, e freqüentemente de coloração mais clara, e uma região central, suavemente convexa, e quase sempre de coloração mais acentuada do que a borda e a própria casca do ovo (^{Fig. 6}).

O opérculo se conecta com a "borda corial da casca" através da "faixa de vedação" que, na sua junção, constitui a chamada "linha de eclosão", ao longo da qual ele se destaca da casca do ovo (Figs. 11 e 12). Nessa "borda corial" está situado o "complexo micropilar" que de uma maneira simplista poderíamos dizer que é formado de dois tipos de pequenos canais, que são as aerópilas (pseudomicrópilas de Beament⁷, 1947) e as micrópilas, cuja abertura externa situa-se na goteira espermática (^{Figs. 9}, 11 e 12). Muito embora suas funções tenham dado ensejo a grande número de controvérsias (Hinton²⁴, 1961), parece que basicamente as micrópilas seriam responsáveis pela penetração do espermatozóide durante a fecundação, e as aerópilas pelas trocas gasosas do embrião com o meio externo. As aerópilas são formadas de maneira semelhante aos "tubos foliculares" normais e entram em contacto com a superfície externa através de feixes de pequenos "poros aeropilares" (Beament⁷, 1947) (Fig. 11). Os orifícios de entrada das micrópilas e aerópilas poderão ser detectados com relativa facilidade através de microscopia eletrônica de varredura (MEV), como poderemos verificar em foto MEV da borda corial de R. pictipes (^{Fig. 9}).

O opérculo se conecta com a "borda corial", que realmente é a região superior da casca do ovo macroscopicamente visível. Logo abaixo da borda corial ocorre um estrangulamento circular evidente, denominado "colo" (Figs. 1-3) que poderá apresentar-se com aspecto curto e largo, como em R. neivai, R. robustus, entre outros, ou longo e estreito como em R. pictipes e outros (^{Figs. 8} e ¹⁰).

Em algumas espécies poderá haver projeções exocoriais situadas logo abaixo do colo, descritas por Forattini e Barata¹⁹ (1974), projeções essas por sua forma denominadas de "colarinho" e que poderão ser utilizadas como importante caráter taxionômico (Figs. 2 e ⁷). Além das espécies citadas pelos autores como possuidoras ou não desta formação, evidenciou-se no material estudado sua presença em R. paraensis e sua ausência em R. ecuadoriensis e R. pictipes.

A coloração dos ovos de Rhodnius é tida, há muito tempo, como rosa na ocasião da postura, tomando tons mais fortes à medida que o embrião se vai desenvolvendo, e chegando ao vermelho, deixando transparecer manchas oculares da ninfa (Brumpt^{10, 11}; Larrousse²⁵; Uribe³⁷; Galliard²²; Beament⁶). Essa coloração, segundo Wygglesworth ³⁹ (1974) é dada exclusivamente pelo embrião devido à presença de hematina, um pigmento do grupo da hemoglobina. A mudança de coloração é correta, entretanto, somente para algumas espécies, como R. prolixus, que foi até Lent e Valderrama ²⁸ (1977), praticamente, a única espécie de Rhodnius estudada nesse aspecto, e de onde certamente foram extrapoladas tais conclusões, que passaram a ser encaradas como características de todo o gênero (Southwood³⁴, 1956; Wygglesworth³⁹, 1974). Na verdade, em todo o material estudado, as cascas são mais ou menos translúcidas, o que está de acordo com a literatura existente. Porém, tanto em relação à coloração do ovo (embrião) quanto a da casca, isso não pode ser aplicado como regra geral, pois espécies como R. pallescens, R. pictipes e R. paraensis têm casca sempre de coloração castanho acentuada; e R. pallescens, R. pictipes e R. ecuadoriensis ³ têm embrião de coloração amarelo-pálida, pelo menos quando jovem. Lent e Valderrama ²⁸ (1977) consideram as cascas de ovos de R. pictipes como de coloração cinzenta, com o que não concordamos (Vide item 4.2.8). Parece haver uma certa associação entre a coloração castanho da casca e ausência e/ou diminuição desse pigmento rosa no embrião. Para R. ecuadoriensis, que aparentemente faria exceção a essa regra, pois possui casca em tom castanho bem mais claro ou em raros casos albino, exibe porém um acentuado anel de pigmentação castanho na casca logo abaixo do colo. Quanto a R. pallescens, não tendo sido possível o exame de material vivo, partimos de observação de ovos recentemente embrionados e mortos. Pudemos assim deduzir, por analogia com R. prolixus e outros, em que embriões (jovens) mortos permanecem por tempo indeterminado com a coloração inicial, que tal fato deve ocorrer também com aquela e outras espécies. Assim, a coloração amarelo-pálida observada nos embriões (jovens) mortos deve ser a mesma de embriões vivos nessa idade. É preciso ressaltar, entretanto, que isso não e constante para os embriões mortos em todas as idades de desenvolvimento. Se embriões com desenvolvimento tardio morrem dentro da casca ou durante e eclosão, ocorre, após algum tempo, mudança da coloração inicial para castanho. Isso pode ser observado em R. prolixus e outras espécies de Rhodnias possuidoras de pigmentação vermelha. Certamente aí se verifica o mesmo processo de oxidação da quitina ocorrente em ninfas e adultos recém-eclodidos. Esse fato tem certa aplicação prática, pois poderá dar falsa idéia de coloração castanho para ovos com embriões mortos nesta fase. Portanto, os fenômenos aqui relacionados seriam amplo campo aberto à investigação, não só quanto à interpretação, mas ainda quanto à observação e à descrição, pois tais dados são insuficientes.

Com exceção das espécies já citadas, as cascas são de coloração esbranquiçada e parcialmente translúcidas (Galliard²² e Beament⁶), podendo tomar entretanto diferentes tonalidades, tais como branco-níveo, amarelo-limão ou salmão-claro. Essa variação poderá ocorrer entre espécies diferentes ou em uma mesma espécie entre amostras diferentes ou não.

Os ovos são postos isoladamente ou em pequenos grupos e, em todo o material disponível, sempre se fixam ao substrato. Fato esse há muito conhecido para R. prolixus, através das citações de Brumpt¹⁰ (1913); Larrousse²⁵ (1927) e Uribe³⁷(1927). Pudemos verificar que algumas espécies, como R. pallescens, fixam-se ao substrato mais fortemente e outras, como R. neglectus, mais fracamente, podendo ser destacados com maior facilidade. Aparentemente essa fixação estaria ligada a características ecológicas, pois neste gênero a maioria das espécies são ornitófilas. Utilizando copas de palmeiras e de árvores como ecótopos, redundaria em perda acentuada de ovos, caso não ocorresse esta particularidade. Segundo Galliard²² (1935) a fixação é devida à secreção eliminada pelas fêmeas durante a oviposição e produzida pela glândula acessória, situada na parte dorsal da vagina e muito desenvolvida em Rhodnius ⁴.

Medidas de comprimento e diâmetro de ovos de Rhodnius tem sido apresentadas por diversos autores (Brumpt¹⁰, 1913; Uribe³⁷ , 1927; Galliard²², 1935; Beament^{6, 8}, 1946 e 1949; Lent e Valderrama ²⁸, 1977). Em tratamento estatístico, Barata e col.² (1980) apresentaram medidas para dez espécies deste gênero. Esses autores encontraram médias com uma variação para o comprimento de 1,556 ± 0,018 mm (R. domesticus) a 1,981 ± 0,075 mm (R. pallescens) e com um comprimento médio de 1,719 ± 0,118 mm. Para o diâmetro a variação encontrada foi de 0,828 ± 0,037 mm (R. nasutus) a 0,979 ± 0,039 mm (R. neivai) e com diâmetro médio de 0,885 ± 0,050 mm.

3.1.2. Aspectos exocoriais

3.1.2.1. Aspectos morfológicos

O cório como é conhecida a casca dos ovos de insetos é formado por duas camadas, uma externa ou exocório e uma interna ou endocório. Cobben¹⁷ (1968) desaconselha o uso dessa terminologia em razão das controvérsias suscitadas na análise de tais membranas, porém por efeitos práticos e para os fins a que nos propusemos, freqüentemente empregaremos essa nomenclatura.

Beament^{6, 7} (1946, 1947) estudando o cório dos ovos de R. prolixus encontra distintas subcamadas para o exocório e para o endocório. O exocório seria formado pelo que chamou de exocório rijo, uma fina e resistente membrana de corionina que faz o revestimento externo do cório, e o exocório mole – situado logo abaixo, formado por uma espessa camada, responsável pela escultura exocorial (Fig. 13). Do mesmo modo o endocório seria formado pela endocório mole – uma espessa camada formada por material protéico, seguida logo abaixo pelo endocório rijo – um conjunto de quatro camadas de fina espessura que faz o revestimento interno de toda a casca, e que na verdade é a região mais altamente especializada do cório, e que segundo esse autor são no mesmo sentido, as seguintes: ambarina, externa polifenólica, interna polifenólica e cerosa primária (Fig. 13). No material estudado e com a metodologia empregada nos cortes histológicos, é possível visualizar por microscopia óptica (Fig. 19) uma região externa larga que não se deixa corar pelos corantes convencionais, contornada superiormente por uma linha corada que delimita os desenhos dessa estrutura, provavelmente correspondendo ao exocório mole e ao exocório rijo, respectivamente. Essas estruturas são seguidas logo abaixo por uma faixa larga, via de regra correspondente a cerca de metade da espessura do cório, que se deixa corar de modo difuso e quase sempre sem um limite nítido com a parte superior (exocório), e inferiormente delimitada por uma estreita faixa dupla mais intensamente corada, de certo correspondendo ao endocório mole e ao endocório rijo, respectivamente.

A superfície do exocório apresenta esculturas que basicamente são desenhos hexagonais com uma depressão central (vide Fig. 18), as quais, com pequeno aumento, têm aspecto geral alveolado, lembrando "favos de colméia", particularmente acentuado quando a depressão é mais profunda, como no caso de R. prolixus. Essa depressão, embora muito evidente em microscopia eletrônica de varredura (MEV), não é de fácil observação em microscopia óptica (MO), já tendo sido inclusive descrita por Lucena e Rego ³⁰ (1969) como "formações pontiagudas". De fato, sem o auxílio de MEV não é fácil interpretar a sucessão de planos que nos fornece a MO, cujo baixo poder de resolução faz perder inteiramente a noção de profundidade, dificultando com isso a interpretação. Nas Figs. 14-17 vêem-se os diferentes aspectos, em planos subseqüentes, do exocório de Rhodnius, observados em MO e comparados com a Fig. 18 de foto em MEV. O fundo dessa depressão dá continuidade a uma estrutura tubuliforme que penetra na casca em direção ao endocório, conhecida como "tubos foliculares" (Beament⁶, 1946) ou "tubos na extremidade da cavidade" (Barth e Muth ⁵, 1958), obviamente só visíveis em corte ou por transparência, onde poderão apresentar-se longos ou curtos, finos ou grossos, e com inclinação e dilatação apical ou não (Figs. 13 e 19).

Ao conjunto formado pelo hexágono, área periférica, depressão e tubo, chamaremos de "funil", por sua configuração, particularmente em corte (Figs. 21 e ²³). E preferimos utilizar, sempre que possível, características relacionadas a esse conjunto que nos parecem dar uma idéia mais real do que algumas características particulares como fizeram Barth e Muth⁵ (1958), considerando para diferenciação entre R. prolixus e R. neglectus o que eles chamaram de respectivamente áreas periféricas estreitas e áreas periféricas largas. (Fig. 20: a e b; Fig. 22: a e b, respectivamente). Na verdade, as primeiras têm conseqüentemente o diâmetro da depressão mais largo e portanto maior profundidade, e são exatamente o que chamamos de "funis profundos" (Figs. 20: c e 21). As segundas têm conseqüentemente o diâmetro da depressão mais estreito e portanto menor profundidade, e são o que chamamos de "funís rasos" (Figs. 22: c e ²³).

Esses funis têm suas bordas superiores contornadas pelas chamadas "linhas limitantes" (Barth e Muth⁵, 1958) (Figs. 13, 18, 20-²³). Estas poderão apresentar-se proeminentes ou planas, revestidas ou não de granulações, porém nunca em sulcos, como as descreve Lucena e Rego³⁰ (1969) e fazem crer os desenhos de corte de Barth e Muth⁵ (1958) ⁵. Por transparência poderão ser evidentes ou não, ter maior ou menor refringência e parecer que se prolongam no cório. Entretanto, com a metodologia utilizada nos cortes, isso não pôde ser confirmado, tendo-se encontrado sempre uma superfície ou plana ou proeminente, mas sem nenhuma demarcação de sulcos, e cuja área, em corte, passamos a chamar de "demarcação das linhas limitantes (d 11) (Figs. 13, 19, 21 e ²³).

Com freqüência todo o tegumento é revestido em maior ou menor intensidade por minúsculas pontuações claras a que chamamos de "granulações" ⁶, já referidas por Barth e Muth⁵ (1958) como numerosos pontos brancos sobre a superfície (Fig. 18). Essas granulações, facilmente identificáveis em MEV, apresentam-se esféricas ou irregulares, graúdas ou miúdas, de distribuição uniforme sobre o tegumento, com maior ou menor concentração no fundo do "funil" ou em torno das linhas limitantes (LL), quando poderão revestí-las totalmente dando-lhes certo aspecto rugoso (Fig. 41). Entretanto, por transparência nem sempre são de fácil visualização, particularmente se miúdas e revestindo uniformemente a superfície, caso em que apresentam leve rugosidade, podendo passar despercebidas (Fig. 14).

3.1.2.2. Aspectos funcionais

As estruturas componentes do exocório teriam sua formação relacionada à forma e função das células do epitélio folicular. Assim, as áreas hexagonais representariam exatamente a réplica da face apical do epitélio, as LL seriam os sulcos mais ou menos profundos e estreitos dos limites celulares, e os outros componentes do relevo (linhas, pontos, massas compactas) representariam irregularidades na composição do protoplasma (Barth e Muth⁵, 1958).

Entretanto a função da escultura exocorial ainda não está bem esclarecida. Pelos trabalhos de Galliard²² (1935), poderemos supor que esteja relacionada ao acúmulo de substância produzida pela glândula acessória, muito desenvolvida em fêmeas de Rhodnius, e cuja secreção seria destinada à fixação dos ovos ao substrato, caso em que os ovos teriam "casca fosca e rugosa"; por outro lado, fêmeas com glândulas acessórias reduzidas e cujos ovos são livres como em Triatoma, teriam ovos com "cascas lisas e brilhantes". Pick³² (1962) acha que a escultura do exocório teria papel mais importante sobre a deposição no substrato do que a secreção dessa glândula, pois isso poderia ser constatado tanto nos ovos que se fixam, como nos livres; estes, devido à presença de delgados canalículos, permaneceriam aderentes ao substrato, por efeito da força capilar exercida sobre superfícies úmidas ou molhadas.

Não nos propusemos estudar tal aspecto, mas no desenvolvimento das observações foi possível deduzir que pelo menos duas funções estariam a ele relacionadas: – a fixação ao substrato e a respiração do embrião.

Quanto à fixação ao substrato, parece efetivamente haver certa associação entre ela e a estrutura infundibiliforme dos hexágonos, pois todas as espécies atualmente conhecidas com ovos aderentes ao substrato apresentam sempre uma estrutura exocorial semelhante, embora pertencentes a grupos genéricos distintos. Pelo que nos foi possível observar, espécies que fazem fixação dos ovos constante e/ou vigorosamente, como as do gênero Rhodnius e Psammolestes, ou as que o fazem ocasional e/ou fracamente como Triatoma lecticularia e T. protracta ⁷, apresentam sempre tal estrutura ⁸ (Figs. 24, 25 e 26). Aparentemente, a única exceção seria T. platensis, que esporadicamente tem seus ovos fixados ao substrato e não apresenta a estrutura típica deste grupo. Lucena e Rego³⁰ (1969), baseados em desenhos de Abalos e Wygodzinsky ¹ (1951), acham que T. platensis tem as mesmas estruturas exocoriais e associam isso com o fato de essa espécie ser também habitante de ninhos de pássaros. Examinamos esse material e, como poderemos verificar em fotografia feita em microscopia eletrônica de varredura (Fig. 27), não há formação característica dos funís, apresentando entretanto uma arquitetura complexa e estruturas profundas, semelhantes aos tubos foliculares, como poderemos verificar em desenhos de cortes (Fig. 28).

Quanto à respiração do embrião, o papel das aerópilas tem sido aceito pela maioria rios autores (Hinton²⁴; Tuft³⁶; Wigglesworth e Beament⁴⁰), mas ficou também demostrado em experimentos com R. prolixus que trocas gasosas poderão ser efetuadas, embora em pequena escala, através da casca (Tuft³⁶). Certamente essas trocas só se poderão realizar através dos tubos foliculares, pois como já vimos, são as únicas estruturas que penetram profundamente no cório. Por outro lado, as aerópilas e os tubos foliculares são formados de maneira similar (Beament⁷) e guardam entre si estreita semelhança morfológica, o que nos leva a acreditar em um relacionamento íntimo entre essas esculturas e a respiração do embrião. Se bem que as aerópilas em Rhodnius, segundo Beament⁷, terminem na superfície externa em inúmeros e finos canais aeropilares, em outros grupos como Nepidae (Hemiptera), elas terminam em um número reduzido de canais de diâmetro acentuadamente maior (Hinton²⁴); portanto com uma estrutura bem mais próxima dos citados tubos foliculares de Rhodnius. E em grupos mais afastados como Galleria mellonella (Pyralidae – Lepidoptera) terminam na superfície em um único orifício e seu canal atravessa o cório atingindo as camadas internas (Barbier e Chauvin³). Em R. pictipes e outras espécies, ficou constatada, através de microscopia eletrônica de varredura, a presença de orifícios situados na borda corial da casca, acima da goteira espermática, fora, portanto, da posição das micrópilas (^{Fig. 9, letra c}). Acreditamos que se trate de orifícios de entrada das aerópilas ou quando muito das curtas aerópilas (curtas pseudomicrópilas de Beament⁷), que aqui terminariam diretamente na superfície e não em material protéico poroso formado por células especializadas (F e H) conforme descrição daquele autor. E que de certa forma viria reforçar a idéia do papel semelhante desempenhado pelas aerópilas e tubos foliculares.

3.2. Características específicas

3.2.1. Rhodnius Domesticus Neiva e Pinto, 1923

a) Material examinado

Estação Experimental de Pariquera-Açú, Pariquera-Açú, São Paulo, Brasil. Exemplares: adultos e ninfas capturados em ninho de roedores em bromélias, árvore n^o 3, área I, junho 1974 (E.X. Rabello, col.). Colônia HEP/FSP/USP ⁹, número RCT 141. Amostra n^o 17.

b) Aspecto geral do ovo

Os ovos são esbranquiçados, com cascas pouco translúcidas, freqüentemente em tom salmão claro ou raramente amarelo-pálido e discreto brilho sedoso. Quando recém-postos, apresentam-se com embrião provavelmente de coloração rosa claro, isso porque não tendo sido possível o exame de material vivo, foi constatado que embriões mortos (jovens possuem essa coloração, e desta forma ovos embrionados maduros tomariam coloração vermelha.

O opérculo apresenta-se de coloração castanho-pálido, em tom levemente mais forte do que R. prolixus e evidentemente mais claro do que R. neglectus, e como estes, com bordas translúcidas e esbranquiçadas.

Não possuem colarinho (Forattini e Barata¹⁹ 1974), têm colo aparentemente estreito, apresentam achatamento lateral, possuem evidente inclinação do opérculo em relação ao achatamento e não têm chanfradura longitudinal (Fig. 29).

Os ovos são alongados, relativamente pequenos, tendo em média 1,556 ± 0,018mm

c) Aspecto geral do exocório

O aspecto geral do exocório é uniforme, freqüentemente com funís rasos, em cortes histológicos suas bordas apresentam-se arredondadas, porém culminadas por pequenas proeminências bizeladas relativas ao traçado das linhas limitantes (LL) (Fig. 32), caráter esse pouco observado em outras espécies e que para os ovos albinos de R. ecuadoriensis servirá como importante característica diferencial.

As linhas limitantes em microscopia eletrônica de varredura (MEV), evidentes mas não tanto quanto em R. prolixus ou R. pictipes, apresentam-se aqui proeminentes, estreitas, lisas e retilíneas (Fig. 30). Em microscopia óptica (MO) são de difícil visualização, exceto na área periopercular, onde são passíveis de observação, mas não tão facilmente, apresentando-se retilíneas e pouco refringentes e podendo parecer largas e rugosas devido à presença de granulações.

As granulações são facilmente evidenciáveis em MEV, onde são irregulares quanto a tamanho, forma e distribuição, freqüentemente esparsas e podendo estar ou não recobrindo as linhas limitantes (Fig. 31), sem entretanto lhes conferir aspecto rugoso, característico em R. prolixus e R. robustus. Em MO não são facilmente observáveis, com exceção da área periopercular, onde podem ser confirmadas essas características.

Os tubos foliculares são longos, retos ou encurvados, estreitos na base e com acentuada dilatação palmatiforme, lembrando escamas alares de dípteros. Por isso, em corte, podem apresentar-se daquela maneira ou estreitos como no desenho (Fig. 32).

O endocório mole tem largura aproximadamente igual à metade do cório e o endocório rijo é visível como uma dupla membrana que se cora mais intensamente (Fig. 32).

3.2.2. Rhodnius Ecuadoriensis Lent e León, 1958

a) Material examinado

Distrito de Cascas, Contumazá, Departamento de Cajamarca, Peru. Coletado em "Caserios". Leg. Dra. Arlita C. de Pinho, do Departamento de Biologia Geral, Faculdade de Filosofia da Universidade Federal de Minas Gerais, obtido através do Dr. Cezar Cuba Cuba, de material de colônia do insetário do Instituto Nacional de Endemias Rurais, Belo Horizonte, Minas Gerais. Colônia HEP/FSP/USP n^o RCT 159. Amostra n^o 20.

b) Aspecto geral, do ovo

Os ovos são de coloração castanho muito claro, com uma certa gradação de tons e leve brilho áureo, exibem acentuado anel de pigmentação castanho mais escuro logo abaixo do colo e que poderá ser confundido com o colarinho, particularmente se visto com pequenos aumentos. Observaram-se, em alguns casos, ovos totalmente brancos em tom níveo, portanto sem esse anel. Em todos os casos, entretanto, o embrião jovem apresenta-se amarelo-pálido. Nesta espécie, mais do que em outras, nota-se a evolução do embrião a partir de um duplo filamento rosa, situado em posição mediana, com orientação longitudinal e que se vai expandindo lateralmente até tomar praticamente todo o corpo do embrião, fazendo com que o ovo mude de coloração, primeiro para rosa claro e depois para rosa escuro, quando se tornam visíveis as manchas oculares de coloração vermelho-púrpura da ninfa.

O opérculo é de coloração castanho no mesmo tom do anel já citado e portanto em tom mais escuro do que o corpo do ovo, e com bordas translúcidas e esbranquiçadas ou totalmente branco para os casos albinos já citados.

Não possuem colarinho, têm colo aparentemente estreito, apresentam freqüentemente achatamento lateral e, em alguns casos, evidente inclinação do opérculo em relação ao achatamento, e são desprovidos da chanfradura longitudinal (Fig. 33).

Os ovos, acentuadamente alongados, têm em média 1,766 ± 0,089 mm de comprimento por 0,865 ± 0,025 mm de diâmetro. São significativamente maiores em comprimento do que os de R. neglectus, R. robustus e R. domesticus; e significantemente menores do que os de R. pallescens, não apresentando diferenças significativas dos das outras espécies. Em diâmetro, são significativamente menores que os de R. neivai, R. robustus e R. pallescens, não apresentando diferenças significativas dos das outras espécies (Barata e col.², 1980).

c) Aspecto geral do exocório

Há certa constância de caracteres exocoriais dentro da amostra, tendo-se inclusive evidenciado características idênticas tanto no grupo de ovos com pigmentação castanha, quanto naqueles totalmente brancos. O aspecto geral é uniforme, com funís rasos. Em microscopia óptica, por transparência, são apenas evidentes os pequenos orifícios centrais de entrada dos tubos. Em corte esses orifícios têm abertura ampla e os funis bordas arrendondadas culminando em proeminências amplas, onde se situariam as linhas limitantes (Fig. 37), fator esse que diferencia os ovos albinos encontrados nesta espécie dos de R. domesticus, com os quais mantêm estreitas semelhanças.

As linhas limitantes em microscopia eletrônica de varredura não tem nítida delimitação, a área onde estão situadas é suavemente proeminente e porisso tomam aspecto largo, retilíneo e levemente rugoso (Figs. 34, 35 e 36). Por transparência, são pouco refringentes e em conseqüência pouco evidentes. Entretanto, devido ao revestimento de granulações, tomam aspecto largo e rugoso, muitas vezes parecendo formar uma moldura em torno dos funis, cujos ângulos de junção se mostram suavemente arredondados.

As granulações que revestem o tegumento são em MEV, miúdas, esparsas, raramente aglutinadas, freqüentemente mais distribuídas em torno das linhas limitantes (Fig. 35); outras vezes apresentam-se aglutinadas formando pequenos grumos (Fig. 36). Por transparência, são de difícil visualização, visíveis mais facilmente quando concentradas sobre as linhas limitantes, irregulares, pouco translúcidas e com leve tom esverdeado.

Os tubos são pouco perceptíveis por transparência, têm pequena dilatação apical e encurvamento discreto ou mesmo ausente; em corte são curtos e largos, alcançando entretanto o endocório (Fig. 37). Em alguns casos foi notada, em corte, ou em fotos MEV, a obstrução desses tubos por "esferas", como no caso de R. pallescens (Fig. 36).

O endocório mole é razoavelmente largo, isto é, ligeiramente mais largo do que a metade da largura do cório, e o endocório rijo é visível como uma dupla membrana que se cora mais intensamente (Fig. 37).

Quando os cortes histológicos estão situados no polo superior do ovo, é visível uma faixa larga e irregular de pigmentação castanho, situada na parte inferior do exocório mole, correspondendo, portanto, ao já citado anel nessa área (Fig. 37).

3.2.3. Rhodnius Nasutus Stal 1859

a) Material examinado

Lagoa de Pajuçara, Fortaleza, Ceará, Brasil, Leg. Dr. José Jurberg, Instituto Oswaldo Cruz, Manguinhos, Rio de Janeiro, Brasil. Colônia HEP/FSP/USP n^o RCT 111. Amostra n^o 01.

Jorge, município de Itapagé, Ceará, Brasil. Material coletado em galinheiro, em novembro de 1975. Cascas de ovos doadas pelo Dr. Joaquim Alencar da Universidade Federal do Ceará. Não há colônia. Amostra n^o 174.

b) Aspecto geral do ovo

Os ovos são esbranquiçados, com cascas pouco translúcidas, em tom branco níveo ou amarelo-limão e discreto brilho sedoso. Quando recém-postos, o embrião pode apresentar coloração que varia entre o amarelo-pálido e o rosa típico. À medida que evoluem acentuam-se essas colorações: os amarelos-pálidos chegam até a castanhos-pálidos e os rosas a vermelhos; em ambos os casos tornam-se visíveis as manchas oculares das ninfas. Essas, quando recém-eclodidas, tomam coloração respectivamente castanho-pálido e vermelho intenso, sendo que as últimas, passando o tempo necessário à oxidação da quitina, tomam coloração castanho mais forte do que as primeiras. Entretanto, é interessante frisar que nem todos os ovos com embriões amarelo-pálidos evoluem para coloração castanho-pálida; no material examinado, cerca de 50% evoluiu para rosa e posteriormente vermelho.

O opérculo apresenta-se de coloração escura, castanho bronze com bordas translúcidas e esbranquiçadas, muito semelhante a R. neglectus, todavia com o corpo visivelmente mais translúcido do que naquela espécie.

Possuem colarinho (Forattini e Barata ¹⁹, 1974), colo aparentemente normal, evidente achatamento lateral, nítida inclinação do opérculo em relação a esse achatamento e não possuem chanfradura longitudinal (Fig. 38).

Os ovos são alongados, tendo em média 1,663 ± 0,032 mm de comprimento por 0,828 ± 0,037 mm de diâmetro; são significativamente menor em comprimento do que R. pallescens e R. prolixus, não apresentando diferença significativa das outras espécies. Assim como é significativamente menor em diâmetro do que R. neivai, R. robustus, R. pallescens, R. prolixus e R. neglectus, sem diferença significativa das demais espécies (Barata e col.², 1980).

c) Aspecto geral do exocório

Apresentam acentuada variação de caracteres, dentro de uma mesma amostra ou entre amostras diferentes. Freqüentemente, em um mesmo espécimen também ocorre falta de uniformidade, particularmente em referência às características das delimitações dos exágonos (LL) e das granulações, porisso dificilmente são encontradas áreas com aspecto geral uniforme e a regra geral é a irregularidade e certa aparência "suja". Os "funís", fazendo exceção, quase que constantemente são muito rasos, não sendo observável a característica de "favos de colméia" encontrada na maioria das espécies. Por transparência e com pequeno aumento (objetiva 10x), essas depressões são praticamente imperceptíveis sendo visíveis apenas os orifícios centrais de entrada dos tubos, fato que poderá ser confirmado em microscopia eletrônica de varredura (MEV) (Fig. 39). Em corte, essas estruturas são também confirmadas, e as bordas desses funís apresentam-se visivelmente arredondadas, sem nenhum vestígio de proeminência das linhas limitantes (LL) (Fig. 42). Essa característica constitui a mais importante diferenciação entre esta espécie e R. neglectus, cujas formações exocoriais mantêm estreita semelhança.

Por microscopia eletrônica de varredura, as linhas limitantes são praticamente ausentes devido ao intenso revestimento de granulações que as recobre (Fig. 39), revestimento esse que algumas vezes forma, pela concentração, verdadeiras áreas delimitantes (Fig. 41). Ainda em outros casos essas linhas limitantes são formadas por áreas lisas, largas e irregulares, em conseqüência da ausência e/ou aglutinação de granulações, dando idéia de pelo atrito terem sido despojados de tais elementos (Fig. 40). Por transparência, esses aspectos são mais ou menos mantidos, essas formações são pouco evidentes, tanto que com pequeno aumento (objetiva 10x) são totalmente imperceptíveis. Com aumento maior consegue-se visualizá-las debilmente, mostrando-se então, lisas, estreitas, retilíneas e pouco refringentes, podendo assumir aparência rugosa devida ao acúmulo de granulações sobre elas, aspecto esse, entretanto, que tenderá a desaparecer na medida em que o foco for feito em profundidade.

As granulações que revestem o tegumento são de tamanho irregular, com predomínio de graúdas, distribuindo-se irregularmente e concentrando-se ou não sobre as linhas limitantes, freqüentemente aglutinadas em formações grumosas, ou ainda, esparsas, quase ausentes (Figs. 39, 40 e 41).

Os tubos foliculares são médios ou longos, com acentuada dilatação apical (Fig. 42). O endocório mole é de aproximadamente a metade da largura do cório, e o endocório rijo é visível como uma dupla membrana que se cora mais intensamente.

3.2.4. Rhodnius Neglectus Lent, 1954

a) Material examinado

Estrada Pitangueiras – Bebedouro, município de Pitangueiras, São Paulo, Brasil. Clone obtido a partir de um casal capturado em cópula, em copa de palmeira "macaúba". Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 20. Amostra n^o02.

Fazenda Bonsucesso, município de Monte Alto, São Paulo, Brasil. Clone obtido de uma fêmea capturada em ninho de pássaro em teto de uma casa. Colônia HEP/FSP/ USP, n^o RCT 48. Amostra n^o 04.

Fazenda Campo Doce, município de Sales de Oliveira, São Paulo, Brasil. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 68. Amostra n^o 05.

Bairro João Pedro, município de Guaíra, São Paulo, Brasil. Adultos e ninfas capturados em casas e anexos. Colônia HEP/ /FSP/USP, n^o RCT 23. Amostra n^o 03.

Fazenda Barcelona, município de Guaíra, São Paulo, Brasil. Adultos e ninfas capturados em copa de palmeira "macaúba". Na área III. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 190. Amostra n^o 137.

Fazenda Rosário, município de Guaíra, São Paulo, Brasil. Adultos e ninfas capturados em copa de palmeira "macaúba", Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 234. Amostra n^o 168.

Fazenda Brejão, município de Guaíra, São Paulo, Brasil. Adultos e ninfas capturados em galinheiro experimental n^o 3, área I. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 233. Amostra n^o 169.

Fazenda Três Barras, município de Frutal, Minas Gerais, Brasil. Adultos e ninfas capturados em galinheiro experimental n^o 2, área I. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 241. Amostra n^o 180.

Fazenda Buriti, município de Frutal, Minas Gerais, Brasil. Adultos e ninfas capturados em copa de palmeira "macaúba", Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 235. Amostra n^o 176.

Fazenda São Mateus, município de Frutal, Minas Gerais, Brasil. Adultos e ninfas capturados em galinheiro experimental n^o1, área I Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 206. Amostra n^o 146.

Fazenda Serradão, município de Frutal, Minas Gerais, Brasil. Adultos e ninfas capturados em copa de palmeira "macaúba", na área II. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 245. Amostra n^o 181.

b) Aspecto geral do ovo

Os ovos são esbranquiçados com cascas pouco translúcidas, freqüentemente com leve tom amarelo-limão, raramente salmão-claro e discreto brilho sedoso. Quando recém-postos, apresentam-se com embrião freqüentemente de coloração rosa-clara. Entretanto, nessas condições foram também observados raros embriões de coloração amarelo-pálida, que tomavam coloração rosa à medida que evoluíam, e apresentavam-se ao término do desenvolvimento embrionário, praticamente iguais aos primeiros, isto é, assumiam coloração vermelha e deixavam transparecer nitidamente as manchas oculares das ninfas.

O opérculo evidenciou-se pela coloração escura, castanho-cobre, com o mesmo brilho sedoso do corpo do ovo e bordas translúcidas e esbranquiçadas. Possuem colarinho (Forattini e Barata¹⁹, 1974), colo normal, evidente achatamento lateral, nítida inclinação do opérculo em relação ao achatamento e ausência de chanfradura (Fig. 43).

Os ovos são alongados, tendo em média, 1,673 ± 0,057 mm de comprimento por 0,875 ± 0,015 mm de diâmetro; são significativamente maior em comprimento do que R. domesticus e menor do que R. pallescens, R. prolixus e R. ecuadoriensis; sem diferenças significativas das outras espécies. Significativamente é maior em diâmetro do que R. nasutus e menor do que R. neivai, R. robustus e R. pallescens; sem diferenças significativas das outras espécies (Barata e col.², 1980).

c) Aspecto geral do exocório

A citação de Barth e Muth ⁵ (1958) é a única existente para descrição do exocório desta espécie, onde são estabelecidas diferenças com R. prolixus, espécie que em relação às características dos ovos está consideravelmente afastada de R. neglectus, tanto em relação aos aspectos macroscópicos quanto exocoriais.

O exocório nesta espécie apresenta acentuada variação de caracteres não só entre amostras diferentes, mas até dentro da mesma amostra, por isso as descrições referem-se ao padrão mais ocorrente em cada estrutura. Freqüentemente o aspecto geral, no mesmo espécimen, é uniforme. Possuem funís médios ou rasos, por este motivo em microscopia óptica (MO) o fundo desses funís apresenta-se de diâmetro pequeno, porém evidente, com menor aumento (objetiva 10x) lembram pequenas "poças". Foram certamente essas características que fizeram com que Barth e Muth ⁵ (1958) a considere possuidora de áreas periféricas largas, portanto ao contrário de R. prolixus, que teria áreas periféricas estreitas. De fato, os funís com depressões rasas deixam evidentes, em MO, a pequena área central, aumentando, em conseqüência, a visualização das superfícies laterais. Em corte, esses funís têm bordas pontiagudas, em cujo ápice estariam situadas as linhas limitantes (LL) embora com fraca evidência de demarcação; de qualquer forma essa é uma característica importante na diferenciação entre esta espécie e R. nasutus, com a qual guarda estreitas semelhanças (Fig. 47).

As linhas limitantes são, em microscopia eletrônica de varredura, fracamente salientes, retilíneas, estreitas e freqüentemente evidenciáveis pelo espaço ocasionado pela ausência de granulações (Figs. 45 e 46), ou em certos casos, de difícil visualização, por efeito do denso revestimento de granulações nessa área (Fig. 44). Em microscopia óptica poderão apresentar-se na maioria das vezes evidentes e em raros casos ausentes. Quando visíveis, são lisas, estreitas, retilíneas e pouco refringentes, algumas vezes podendo parecer rugosas pelo acúmulo de granulações sobre elas, caráter esse que tenderá a desaparecer na medida em que o foco for feito em profundidade.

As granulações que revestem o tegumento são miúdas, abundantes, esféricas, com distribuição uniforme, muito evidentes em microscopia eletrônica de varredura (Fig. 46) e de difícil visualização em microscopia óptica onde têm coloração clara, distribuição uniforme, dando aspecto levemente rugoso ao tegumento e fazendo lembrar rugosidade de "poros de casca de laranja".

Os tubos são freqüentemente longos, quando observados por transparência, e com pequeno aumento tomam o aspecto característico de pequenas cerdas ou pelos. Em corte, são finos e freqüentemente com pequena curvatura e dilatação apical. Neste; o endocório mole é razoavelmente estreito, isto é, toma menos que a metade da espessura do cório (Fig. 47) e o endocório rijo é visível como uma dupla membrana corada mais intensamente.

3.2.5. Rhodnius Neivai Lent, 1953

a) Material examinado

Camacaro, C. Parapara, Estado de Lara, Venezuela. Leg. Dr. José Torrealba, Universidade de Los Andes, Mérida, Venezuela. Cepa de colônia a partir do material original da descrição. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 144. Amostra n^o 18.

Camacaro, C. Parapara, Estado de Lara, Venezuela. Leg. Dr. Hélio Espinola, Organização Panamericana de Saúde, Aragua, Venezuela. Cepa de colônia a partir do material original da descrição. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 297. Amostra n^o 222.

b) Aspecto geral do ovo

Os ovos são esbranquiçados com cascas pouco translúcidas, freqüentemente em tom salmão-claro ou amarelo-pálido e discreto brilho sedoso. Quando recém-postos, apresentam-se com embrião de coloração muito pálida, em tom bem mais claro do que R. neglectus e R. prolixus. Com o desenvolvimento toma tons mais fortes, chegando a um rosa mais escuro, com o aparecimento de manchas oculares da ninfa. Lent e Valderrama²⁸ (1977) consideram-nos como rosados na ocasião da oviposição, posteriormente vermelhos, e brancos após a eclosão.

O opérculo é de coloração castanho muito pálido, em tom semelhante ou pouco mais fraco que R. prolixus, e como esse, com bordas translúcidas e esbranquiçadas.

Possuem colarinho (Forattini e Barata ¹⁹, 1974), colo aparentemente largo, freqüente evidência de achatamento lateral, discreta inclinação do opérculo em relação ao achatamento e ausência de chanfratura longitudinal (Fig. 48).

Os ovos são de aspecto atarracado com 1,705 ± 0,043 mm de comprimento por 0,979 ± 0,039 mm de diâmeero, em média; são significativamente menor em comprimento do que R. pallescens e sem diferenças significativas das outras espécies. Significativamente é maior em diâmetro que R. domesticus, R. prolixus, R. neglectus, R. ecuadoriensis e R. nasutus, e sem diferenças significativas das outras espécies. Lent e Valderrama²⁸ (1977) registraram para esta espécie 1,650 mm de comprimento por 0,920 mm de diâmetro, e embora tenham deixado de citar o desvio padrão encontrado, essas medidas estão relativamente próximas dos dados de Barata e col.² (1980).

c) Aspecto geral do exocório

O aspecto geral é uniforme, guardando essa uniformidade tanto em um mesmo espécimen quanto em amostras diferentes. Freqüentemente possuem funís profundos e estreitos. Em corte, entretanto, as bordas desses funís apresentam-se arrendondadas. e não pontiagudas, como em R. prolixus, não se evidenciando em nenhuma circunstância as proeminências relativas ao traçado das linhas limitantes (LL) (Fig. 51).

As linhas limitantes são pouco evidentes em MEV: quando muito a concentração de granulações delimita o seu traçado (Fig. 49). Em microscopia óptica (MO) praticamente inexistem, por efeito do adensamento de granulações, já citado, que lhes dá aspecto rugoso, largo, irregular e sem refringência, mantido ainda quando observados em profundidade.

As granulações são graúdas, abundantes e com distribuição uniforme sobre o tegumento, salvo no fundo dos funís, onde são mais escassas. Algumas vezes se adensam, formando grumos, particularmente sobre as linhas limitantes; guardando as devidas proporções, são de fácil observação tanto em microscopia eletrônica de varredura quanto em microscopia óptica (Fig. 50).

Os tubos são freqüentemente longos, largos, retilíneos e com expansão apical (Fig. 51).

O endocório mole é estreito, de largura menor que a metade do cório, e o endecório rijo é visualizado como uma dupla membrana que se cora mais intensamente (Fig. 51).

3.2.6. Rhodnius Pallescens Barber, 1932

a) Material examinado

Panamá. Leg. Dr. E. Osorno Mesa, Laboratório do Instituo Nacional para Programas Especiales de Salud (INPES), Bogotá, Colômbia. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 97. Amostra n^o 07.

Panamá. Leg. Dr. José Jurberg, Instituto Oswaldo Cruz, Manguinhos, Rio de Janeiro, Brasil. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 81. Amostra n^o 08.

b) Aspecto geral do ovo

Os ovos são de coloração castanho com leve brilho bronzeado, com opérculo, "colarinho" e "chanfradura longitudinal" de tom acentuadamente mais escuro. Foram observados em raríssimos casos ovos de um castanho muito pálido e discreto brilho bronzeado sem as citadas áreas de pigmentação mais intensa, os quais consideramos como "albinos".

As cascas são pouco translúcidas, certamente menos translúcidas do que as das espécies de coloração esbranquiçada, entretanto o suficiente para deixar a coloração do embrião reforçar-lhes os tons. Embora não tendo sido possível o exame de material vivo, pudemos constatar, em material morto, que os embriões jovens são de coloração amarelo-pálido e embriões maduros de coloração levemente avermelhada.

O opérculo, como já citado, é de coloração castanho forte, com bordas translúcidas e esbranquiçadas, contornadas por um delgado anel de coloração castanho mais escuro; nos casos "albinos", de coloração castanho muito pálido.

Possuem colarinho (Forattini e Barata ¹⁹ 1974), entretanto com expansões acentuadamente menos salientes que nas outras espécies possuidoras desta formação, mas muito evidente pela coloração mais escura. Têm colo aparentemente estreito, opérculo ligeiramente inclinado, possuem achatamento lateral, acentuado por uma depressão alongada, mediana, e de coloração castanho escuro e a que chamamos de "chanfradura longitudinal" (Figs. 52 e 53). Essa formação encontrada freqüentemente nesta espécie e ocasionalmente em R. pictipes, poderá marcar profundamente o cório, o que será facilmente detectado em corte histológico transversal (Fig. 5).

Ovos acentuadamente alongados, relativamente grandes, com 1,981 ± 0,075 mm de comprimento por 0,938 ± 0,101 mm de diâmetro em média. Comprimento significativamente maior que os de todas as outras espécies estudadas. Diâmetro significativamente maior que os de R. prolixus, R. neglectus, R. ecuadoriensis, R. domesticus e R. nasutus, sem diferenças significativas em comparação com as outras espécies (Barata e col.², 1980).

c) Aspecto geral do exocório

Há certa uniformidade de caracteres entre as diferentes amostras estudadas. Os funís são profundos, podendo-se em corte, verificar que são estreitos, com bordas arredondadas sem nenhuma demarcação de preeminência das linhas limitantes (LL) (Fig. 61). Provavelmente, por efeito da ausência de bordas biseladas, o sentido de profundidade não é marcante em microscopia de varredura (MEV) e ainda menos acentuado por transparência.

Em microscopia eletrônica de varredura não há formação típica das linhas limitantes e as áreas destas podem apresentar-se intensamente revestidas de granulações, ou simplesmente formando faixas lisas, largas e irregulares por efeito do escasseamento dessas granulações (respectivamente Figs. 54 e 55). Em microscopia óptica (MO) são também de difícil visualização, podendo ser identificadas mais facilmente em certas áreas, como as pigmentadas, onde se apresentam como linhas claras, retilíneas, estreitas e sem refringência.

As granulações por microscopia eletrônica de varredura podem apresentar-se miúdas, abundantes e revestindo uniformemente o tegumento (Fig. 54) ou então com um maior ou menor escasseamento na área das linhas limitantes, fato esse que poderá expandir-se, tomar o corpo dos funís e dar aspecto glabro a determinadas áreas (Figs. 55 e 56). Em microscopia óptica são de difícil visualização, sendo observáveis com menor dificuldade nas áreas pigmentadas, como "colarinho" e "chanfradura"; ainda assim nessas áreas há dificuldade de identificação por causa de sua distribuição homogênea.

Os tubos são longos, ora largos, ora estreitos, freqüentemente retilíneos e com dilatação apical, alguns com suave inclinação. Por transparência e com pequeno aumento (objetiva 10x), em muitas áreas eles tomam o aspecto geral de aglomerados de cerdas.

Em corte histológico, o exocório mole, que pela metodologia utilizada não se deixa corar, apresenta na porção basal e limítrofe com o endocório mole, uma faixa de pigmentos muito reduzidos, não refringentes e de coloração castanha, muito evidente na região da "chanfradura" e menos em outras áreas (Fig. 61). Provavelmente esse pigmento é o responsável pela coloração castanha da casca do ovo e das áreas mais escuras, como "chanfradura", "colorinho" e opérculo. Essa formação foi constatada também em R. pictipes, entretanto não foi possível sua confirmação em R. paraensis, espécie que, como R. pallescens, tem ovos de coloração castanha típica.

O endocório mole é estreito, de largura menor que a metade do cório. Em algumas amostras nessa região foi constatada, através de corte histológico, a presença de cutro pigmento, diferente do já citado, maior que aquele, refringente, corado intensamente pelo carmim e ocupando praticamente toda essa área, com exceção de uma estreita faixa superior limítrofe com o exocório mole. Para essa formação, que só localizamos nesta espécie, não nos foi possível encontrar nenhuma explicação. O endocório rijo é como nas outras espécies do gênero, formado por uma dupla membrana que se deixa corar mais intensamente (Fig. 61).

Esta espécie apresenta, além das estruturas constantes para o gênero, outras formações que, por sua freqüente ocorrência, achamos relevante citar. Uma dessas formações constitui-se de pequenas esferas localizadas no fundo do funil, obstruindo parcialmente a entrada dos tubos, que poderiam em uma primeira observação ser confundidas com esporos de fungos, já que freqüentemente o material em exame está contaminado por esses organismos, e as dimensões de uns e outros se assemelham. Entretanto, pelo aspecto morfológico (compare respectivamente as Figs. 57 e 58) e pela regularidade ou irregularidade da respectiva distribuição das esferas e dos fungos, logo se reconhecerá desprezável tal hipótese (Fig. 56). Através de microscopia eletrônica de varredura, há indicação de que essas esferas sejam formadas pelo mesmo material do exocório rijo, ou pelo menos, revestidas por esse material, uma vez que possuem em sua superfície granulações semelhantes às já descritas para o exocório (Figs. 54 e 57). Por transparência e sem coloração, elas apresentam-se como pontos refringentes; e em cortes histológicos, quer por microscopia eletrônica de varredura, quer por microscopia óptica poderá ser confirmada sua presença e a obstrução da entrada dos tubos (Figs. 59 e 61). Por outro lado, acreditamos que estejam fracamente aderidas à superfície do exocório por uma de suas faces, pois através de cortes hitológicos, embora em raras oportunidades, nos pareceu não haver solução de continuidade entre o exocório mole e o corpo dessas esferas (Figs. 60 e 61). Outro elemento que reforçaria esse fato é a observação de esferas deslocadas de sua posição normal, algumas vezes dentro dos tubos foliculares, outras vezes, mas raramente, sobre o tegumento, dando indicação de se terem desprendido espontaneamente: de sua localização inicial. Entretanto, ovos submetidos ao tratamento por ultra-som durante uma hora não apresentaram alteração nesta estrutura. Pelo que foi dado observar e acima exposto supomos que o papel dessa formação esteja ligado à regulação de trocas gasosas e/ou hídricas; de qualquer forma, seriam necessárias melhores investigações sobre o assunto.

Outras formações freqüentemente observadas nesta espécie e ausentes em todas as outras estudadas são o que convencionamos chamar "filamentos radiais" ¹¹. Esses filamentos, apenas constatados por transparência de fragmentos de casca sem prévio tratamento e não detectados por microscopia eletrônica de varredura ou por cortes histológicos corados, apresentam-se como linhas segmentadas, muito finas, de comprimento variável, coloração castanho-escura, originando-se na borda do orifício central da entrada dos tubos foliculares e irradiando-se em todas as direções (Fig. 62). Concomitantemente com esta formação foi verificada a presença de pequenos grânulos de forma e tamanho variáveis, da mesma coloração e irregularmente distribuídos no cório, parecendo que nas áreas onde tais filamentos são mais discretos os grânulos são mais abundantes e vice-versa (Fig. 62). As áreas intensamente atingidas por esses elementos tomam o aspecto geral de "zonas imantadas revestidas por limalha de ferro" e, observadas com menor aumento, a coloração castanha do cório torna-se mais forte com certa tonalidade plúmbea. Beament⁶ (1946) descreveu em R. prolixus a presença do que ele chamou de canais aeropilares ("pore-canals"), os quais, pela descrição dada e desenhos apresentados, têm estrutura muito semelhante a estas formações. Mas é digno de registro que ele só pôde observar tais canais após prévio tratamento por solução saturada de brometo de potássio e posterior passagem em ausência de luz pelo nitrato de prata a 5%, enquanto que, pela metodologia trabalhada, em todas as outras espécies estudadas, inclusive R. prolixus, não foi possível constatar esta formação, ao passo que nesta espécie, sem nenhum tratamento adequado, foi detectada sua presença. A explicação desse fato fugiria ao escopo deste trabalho, e o estudo da função, do desenvolvimento e da freqüência de sua apresentação nas diferentes espécies é ainda campo aberto à investigação ampla ¹².

E finalmente uma outra formação encontrada apenas nesta espécie e somente constatada por transparência é o que chamaremos de "ranhuras". Essas "ranhuras" são depressões retilíneas, finas, refringentes, incolores, que correm em sentido uni ou multidirecional, quase sempre fazendo ligação entre diferentes orifícios dos tubos foliculares, e lembrando no aspecto geral à "ranhuras em lâminas de vidro" (Fig. 63). Observados por transparência, estariam aparentemente situadas na superfície, mas examinando exaustivamente todo o material por microscopia eletrônica de varredura e por cortes histológicos corados, nada pudemos encontrar que indicasse a presença dessas ranhuras. Galliard ²² (1935) cita a presença em R. prolixus de estruturas semelhantes e Beament⁶ (1946), chamando-as de "linhas de Galliard", não lhes encontrou nenhuma função, achando que elas poderiam ser consideradas como resultado da ação do álcool absoluto e admitindo, então, que Galliard ²² as teria confundido com os canais aeropilares. Como nós não tratamos nosso material com álcool absoluto, se os nossos "filamentos radiais" anteriormente citados são os mesmos "canais aeropilares" de Beament⁶ e se estas "ranhuras" são as "linhas de Galliard", devemos concluir que Galliard²² não estava errado, pois seria impossível à mesma estrutura apresentar-se em material sem tratamento especial, de maneira tão diferente. A não ser que, de fato, outro agente que não o álcool, tenha desencadeado a formação dessas "ranhuras", quando então, Beament⁶ estará com a razão quanto à existência de um agente extrínseco. De qualquer forma esse é mais um campo aberto à investigação.

3.2.7. Rhodnius paraensis

Sherlock, Guitton e Miles, 1977

a) Material examinado

Utinga, Belém, Pará, Brasil. Ninfas coletadas em ninho de Didelphis marsupialis localizado em árvores. Doação de cascas de ovos de colônia procedente deste material por Dr. Italo Sherlock, Fundação Oswaldo Cruz, Salvador, Bahia. Amostra n^o 177.

b) Aspecto geral do ovo

Os ovos são totalmente de coloração castanha homogênea, sem o brilho característico encontrado nas espécies com esta coloração, com contorno levemente irregular e certo aspecto de "mal formado" (Fig. 64). As cascas apresentam-se mais translúcidas que em outros Rhodnius e aparentemente são formadas por material mais mole que o das outras espécies. A coloração do embrião é desconhecida, por falta do exame do material embrionado. O opérculo é desconhecido por falta de material para a descrição.

O colarinho apresenta-se com expansões bastante acentuadas quase atingindo a borda corial e praticamente encobrindo o colo, que é de dimensões aparentemente normais. Tem acentuado achatamento lateral, sem chanfradura longitudinal, e com abertura opercular discretamene inclinada em relação a esse achatamento (Fig. 64).

Os ovos são alongados, com 1,612 ± 0,007 mm de comprimento por 0,752 ± 0,002 mm de diâmetro, em média. Barata e col.² (1980) justifica a não comparação devido a não realização de testes de variância e contraste, em face da existência apenas do exemplar fornecedor das medidas relacionadas.

c) Aspecto geral do exocório

O exocório nesta espécie é caracterizado por certa irregularidade quase que constante em todos os caracteres estudados. Além disso, apresenta um aspecto "sujo" que mais se acentua quando observado em pequenos aumentos (Fig. 65). Contudo com aumento, maiores é possível estabelecer áreas com características padrões para o exocório. Assim, embora muito irregulares quanto ao tamanho, os funís são freqüentemente muito rasos, e em cortes histológicos poderemos verificar que têm bordas acentuadamente arrendondadas, quase planas e sempre com nítida proeminência biselada, relativa à conformação das linhas limitantes (LL) (Fig. 68). Essa proeminência das LL dá aos funís, em microscopia de varredura (MEV), certo aspecto de profundidade (Fig. 66) que não é real.

As LL, muito evidentes tanto em MEV quanto em MO, são proeminentes, largas, lisas, retilíneas e por transparência são muito refringentes.

As granulações, também evidentes tanto em MEV quanto em MO, são nesta espécie como em R. pictipes, muito características: miúdas, de distribuição muito irregular, freqüentemente abundantes, e aglutinadas, com grumos formando desenhos "mapeiformes" (Fig. 67); entretanto poderão também apresentar-se com distribuição rarefeita.

Os tubos foliculares são também muito irregulares quanto ao tamanho e quanto à forma, podendo apresentar-se, por transparência, de comprimento curto, médio ou longo, e embora freqüentemente sejam muito grossos, encontram-se também alguns muito finos, com ocorrência ou não de dilatação apical acentuada, sendo que nos casos mais extremos chegam a tomar aspecto de "cogumelos"; características essas suscetíveis de confirmação mediante corte histológico (Figs. 68 e 69). Conseqüentemente, os orifícios centrais da entrada desses tubos são também muito irregulares, alguns muito grandes e outros muito pequenos, não guardando uma associação direta ou inversa com a dimensão também irregular dos hexágonos e isso se constata facilmente tanto em MO quanto em MEV (Fig. 65).

A largura total do cório é também acentuadamente irregular, caráter esse apenas observado nesta espécie (Fig. 69). Não foi observado no exocório mole, como nas outras espécies de coloração castanha, a presença de pigmentos nessa cor. O endocório mole é sempre largo, de largura igual ou superior à metade do cório, e o endocório rijo é formado, como nas outras espécies, por duas finas e estreitas membranas que se coram mais intensamente, neste caso, entretanto, nem sempre de fácil visualização (Figs. 68 e 69).

3.2.8. Rhodnius Pictipes Stal, 1872

a) Material examinado

Bairro do Coqueiro, Belém, Pará, Brasil. Uma fêmea coletada em domicílio em setembro de 1974. Leg. Dr. Habib Frahia Neto do Instituto Evandro Chagas, Belém, Pará. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 152. Amostra n^o 19.

Jacundá, Pará, Brasil. Exemplares adultos coletados em entrecascas de folhas de palmeira babaçu, coletado por Noé Von-Atzingen em janeiro de 1978. Leg. Dr. Oswaldo Pinto Serra, do Instituto de Biociências da Universidade de São Paulo, São Paulo. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 289. Amostra n^o 193.

Peñas de Taria, município de Verões, Estado de Yaracum, Venezuela. Exemplares adultos coletados por Abel Hernandez em agosto de 1977. Cascas de ovos doadas pela Dra. Edelmira Mora Silveira do Instituto de Malariologia, Maracay, Aragua, Venezuela. Amostra n^o 194.

b) Aspecto geral do ovo

Os ovos são de coloração castanho-bronze, que, com a incidência da luz podem tomar tonalidades douradas, semelhante as de R. pallescens, mas dele se diferenciando pela coloração perfeitamente homogênea. Lent e Valderrama²⁸ (1977) consideram-nos de coloração cinzenta, provavelmente pelo leve brilho metálico de que esses ovos são possuidores. Comparando as diferentes nuanças de coloração dessa espécie, de R. pallescens, R. paraensis e R. ecuadoriensis e examinando-os sob lupa estereoscópica, constatar-se-á que se trata de castanho e não cinza. A borda corial e a região do colarinho, conforme a incidência de luz, poderão aparentar coloração bronze um pouco mais intensa. Não foram observados ovos albinos em nenhuma das amostras estudadas.

Cascas, como em R. pallescens, pouco translúcidas, embriões jovens de coloração amarelo-pálida e embriões maduros de cor de rosa forte, dão aos ovos embrionados recentes coloração estanho-bronze e aos embrionados maduros coloração castanho-cobre.

O opérculo apresenta-se da mesma coloração do corpo do ovo, ou seja castanho-bronze, com bordas mais translúcidas e ligeiramente esbranquiçadas.

Apresenta borda corial da casca com desenhos hexagonais nitidamente delineados, ao contrário de todas as outras espécies estudadas que, ou não os possuem, ou os têm muito mal delineados (Fig. 71).

Observou-se ausência de colarinho, colo acentuadamente estreito e longo, opérculo ligeiramente inclinado em relação ao achatamento, existência de achatamento lateral, ocorrência possível de chanfradura longitudinal, mas sem a mesma freqüência nem a pigmentação de R. pallescens, o que torna essa chanfradura mesmo quando presente, pouco evidente (Fig. 70).

Ovos apresentam-se alongados, com 1,770 ± 0,010 mm de comprimento por 0,862 ± 0,007 mm de diâmetro, em média. Barata e col.² (1980) justifica que é impossível afirmar se estes são significativamente maior ou menor do que as outras espécies, em virtude da não realização de testes de variância e contraste, pelo fato de só disporem na ocasião de um único exemplar, cujas medidas são as acima relacionadas. Lent e Valderrama ²⁸ (1977) registram para esta espécie 1,650 mm de comprimento por 0,820 mm de diâmetro, e embora não citem o desvio padrão encontrado, essas medidas estão relativamente próximas dos dados citados.

c) Aspecto geral do exocório

Possuem acentuada uniformidade de caracteres dentro de um mesmo espécimen e de uma mesma amostra. Por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e por microscopia óptica (MO), em transparência plana, de fragmentos de casca, essa uniformidade manteve-se constante. Entretanto, através de cortes histológicos corados foi possível estabelecer dois distintos grupos: um, de material procedente do Pará, onde os funís são muito rasos, os tubos médios e o endocório largo; outro, procedente da Venezuela, com funís médios, tubos muito longos e endocório estreito. (Figs. 74 e 75; respectivamente).

O aspecto geral dos hexágonos é uniforme e "limpo" e, como já vimos, os funís podem ser rasos ou médios; em ambos os casos, entretanto, têm bordas arredondadas e é nitidamente visível a proeminência relativa à formação das linhas limitantes (LL) (Figs. 74 e 75).

As linhas limitantes, muito evidentes em microscopia eletrônica de varredura, são proeminentes, largas, lisas e retilíneas (Figs. 72 e 73), características essas confirmadas pela microscopia óptica, onde, ademais elas se mostram intensamente refringentes.

As granulações são, nesta espécie, como em R. paraensis, muito características, e de fácil visualização, tanto em microscopia eletrônica de varredura quanto em microscopia óptica, onde elas se apresentam miúdas, abundantes, ausentes sobre as linhas limitantes, progressivamente escassas no fundo dos funís e aglutinadas em vários pontos, com grumos formando desenhos "mapeiformes" (Fig. 73).

Os tubos observados por transparência, em visão plana, são longos e finos, com dilatação apical e freqüente aparecimento de uma acentuada curvatura em forma de "cotovelo". Em cortes histológicos não foi possível constatar essa formação. Como já citamos, esses tubos podem apresentar-se médios (amostra 193) ou longos (amostra 194), finos, retos e freqüentemente com pequena dilatação apical (Figs. 74 e 75).

Como em R. pallescens, foi constatado nesta espécie, através de cortes histológicos, o aparecimento de pigmento castanho, formando faixa estreita e irregular na região basal do exocório mole (Figs. 74 e 75). Como naquela espécie, provavelmente esse pigmento é o responsável pela coloração castanha da casca.

O endocório mole pode ser largo (amostra 193) ou estreito (amostra 194), e o endocório rijo pode ser visualizado como uma dupla membrana que se cora mais intensamente (Figs. 74 e 75).

Constatou-se também nesta espécie, em alguns poucos casos, a presença discreta de pequenos grânulos de coloração castanho escura, muito semelhante aos grânulos e filamentos radiais descritos para R. pallescens, não tendo sido entretanto observada nesta a presença de filamentos radiais. É, do mesmo modo que R. pallescens, apenas visualizável por transparência de fragmentos, não sendo possível sua confirmação por cortes histológicos ou por microscopia eletrônica de varredura.

3.2.9. Rhodnius Prolixus Stal, 1859

a) Material examinado

Colômbia. Leg. Dr. Antonio D'Alessandro, Universidad de Valle Calli, Calli, Colômbia. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 45. Amostra n^o 10.

Colômbia. (R. prolixus de olhos vermelhos). Leg. Dr. Osorno Mesa, Instituto Nacional para Programas Especiales de Salud (INPES), Bogotá, Colômbia. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 98. Amostra n^o 13.

Colombia. Leg. Dr. Alberto Morales, Instituto Nacional de la Salud, Bogotá, Colombia. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 200. Amostra n^o 147.

Colômbia. (R. prolixus de olhos vermelhos). Leg. Dr. Alberto Morales, Instituto Nacional de La Salud, Bogotá, Colômbia. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 201. Amostra n^o 148.

Costa Rica. Leg. Dr. Rodrigo Zeledon, Universidad de Costa Rica, El Salvador, Costa Rica. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 123. Amostra n^o 11.

Venezuela. Leg. Dr. José Torrealba, Universidad de los Andes, Mérida, Venezuela. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 145. Amostra n^o 102.

b) Aspecto geral do ovo

Os ovos são esbranquiçados, com cascas pouco translúcidas e freqüentemente em tom branco níveo ou raramente amarelo-limão e discreto brilho sedoso. Quando recém-postos são de coloração rosa-clara e à medida que se desenvolvem tornam-se avermelhados e com manchas oculares da ninfa evidentes; tendo sido encontrados, entretanto, raros ovos embrionados maduros de coloração rosa-alaranjada. Essas observações aproximam-se dos dados de Galliard ²² (1935) e Beament⁶ (1946) para a coloração dos ovos e a transparência das cascas, e com Brumpt^{10, 11} 1913, 1927, Larrousse²⁵ (1927) e Uribe ³⁷ (1927) para mudança de coloração durante a evolução embrionária.

O opérculo apresenta-se de cor salmão claro, sempre em tom mais forte que o da casca, de qualquer maneira visivelmente de tonalidade mais clara que a de R. neglectus. com o mesmo brilho sedoso do corpo do ovo e bordas translúcidas e esbranquiçadas.

Observou-se ausência de colarinho (Forattini e Barata¹⁹, 1974), colo normal, freqüentemente com discreto achatamento lateral, inclinação do opérculo pouco acentuada e ausência de chanfradura longitudinal (Fig. 76).

Os ovos são alongados, com 1,782 ± 0,067 mm de comprimento por 0,880 ± 0,044 mm de diâmetro, em média; são significativamente maior em comprimento do que R. neglectus, R. nasatus, R, robustus e R. domesticus; significativamente menor do que R. pallescens; e sem diferenças significativas com as outras espécies; significativamente maior em diâmetro do que R. nasatus e significativamente menor do que R. neivai, R. robustus e R. pallescens; e sem diferenças significativas com as outras espécies (Barata e col.², 1980). As medidas presentemente citadas aproximam-se dos dados de Galliard ²² (1935) e discordam dos de Brumpt¹⁰ (1913), Uribe ³⁷ (1927) e Beament⁶ (1946).

c) Aspecto geral do exocório

Galliard²² (1935), Beament⁶ (1946) e Lucena e Rego³⁰ (1969) descrevem o exocório de R. prolixus, basicamente dentro das características genéricas, já anteriormente, referidas (item 3.1.2.1.). Barth e Muth⁵ (1958) citando-as chegam às características específicas, estabelecendo diferenças entre esta espécie e R. neglectus, pela presença de áreas periféricas estreitas e áreas periféricas largas, respectivamente, e também já mencionadas no mesmo item.

O exocório desta espécie apresenta certa constância de caracteres dentro da mesma ou entre distintas amostras, salvo algumas exceções citadas oportunamente. Com freqüência o aspecto geral do exocório em um mesmo espécimen é uniforme, com funís profundos, regulares, de bordas salientes, o que lhe confere o aspecto característico e já citado de "favos de colméia", particularmente acentuado com pequenos aumentos. Através de cortes histológicos, essas características são confirmadas e acentuadas pela conformação das bordas dos funís, que são pontiagudas, freqüentemente culminadas por proeminência relativa ao traçado das linhas limitantes (LL) (Fig. 82), caráter esse diferencial entre esta espécie e R. robastus, com a qual mantém estreita semelhança.

As linhas limitantes são evidentes em microscopia eletrônica de varredura (MEV), onde são proeminentes, largas, freqüentemente rugosas e retilíneas (Figs. 78 e 81), podendo, às vezes, parecer ausentes, quando abundantes granulações as revestem (Fig. 77). Por transparência, esses aspectos poderão ser confirmados e, em referência ao último, as linhas tomam conformação de largas faixas irregulares, sem refringência e com certo aspecto "sujo", que, entretanto, desaparece na medida em que a focalização é dada mais profundamente, quando então voltam a ser visualizadas como simples linhas-retas, lisas e refringentes. Em corte histológico poderão ser visualizadas como proeminências acima da borda dos funís (Fig. 82). Foi constatado através de microscopia eletrônica de varredura, em raros exemplares, um tipo de linhas limitantes em forma de faixas largas, proeminentes e com configuração de "molduras", encontrado também em R. robustus (Fig. 79). Talvez essa estrutura esteja relacionada a formações encontráveis em microscopia óptica onde essas linhas limitantes são do mesmo modo largas e como que formadas por pequenos fragmentos transversais, lembrando "bandas de cromossomos politênicos" e que são mais evidentes na área pré-opercular.

As granulações são freqüentemente graúdas, irregulares, abundantes, com distribuição mais acentuada na borda dos funís (Fig. 81), diferindo portanto de R. neglectus, onde são mais miúdas, esféricas e com distribuição mais ou menos uniforme. Em microscopia óptica são evidentes, pouco translúcidas, ligeiramente escurecidas, e com leve tom esverdeado. Além dessas, constatou-se com certa freqüência a presença de um grânulo maior e proeminente nos vértices desses hexágonos (Fig. 80), confirmável por transparência e tomando o mesmo aspecto descrito para as granulações.

Os tubos geralmente curtos, algumas vezes até mesmo pouco perceptíveis, entretanto alcançam o endocório, têm largura irregular, são retilíneos ou encurvados e freqüentemente apresentam evidente dilatação apical (Fig. 82).

Endocório mole de largura irregular, a maioria das vezes um pouco menor do que a metade do cório, e endocório rijo visível como uma dupla membrana corada mais intensamente (Fig. 82).

3.2.10. Rhodnius Robustus Larrouse, 1927

a) Material examinado

Lima, Peru, Leg. Dr. José Jurberg, Instituto Oswaldo Cruz, Manguinhos, Rio de Janeiro, Brasil. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 78. Amostra n^o 14.

Lima, Peru. Leg. Dr. Octavio E. Souza, Gorgas Memorial Laboratory, Canal Zone, Panamá. Colônia HEP/FSP/USP, n^o RCT 122. Amostra n^o 15.

Madre de Dios, Peru. Leg. Dr. Rodrigo Zeledon, Universidad de Costa Rica, El Salvador, Costa Rica. Colônia HEP/FSP/ /USP, n^o RCT 113. Amostra n^o 16.

b) Aspecto geral do ovo

Os ovos são esbranquiçados, com cascas pouco translúcidas, em tom branco níveo ou salmão claro e discreto brilho áureo. Quando recém-postos, o embrião tem coloração rosa-clara, mas à medida em que evolui toma coloração mais escura, chegando ao vermelho, com gradativo aparecimento de manchas oculares da ninfa.

O opérculo apresenta-se muito semelhante quanto à coloração ao de R. prolixus, mas com discreto brilho áureo e, como naquela espécie, com bordas translúcidas e esbranquiçadas.

Observou-se ausência de colarinho (Forattini e Barata¹⁹, 1974), colo aparentemente curto e largo; corpo discretamente achatado em uma das faces; inclinação do opérculo em relação ao achatamento, discreta ou mesmo inexistente; ausência de chanfradura longitudinal (Fig. 83).

O ovo apresenta-se de aspecto atarracado, com 1,606 ± 0,100mm de comprimento por 0,932 ± 0,028 mm de diâmetro, em média. É significativamente menor em comprimento do que R. pallescens, R. prolixus e R. ecuadoriensis; não apresenta numa diferença significativa com as outras espécies; é significativamente maior em diâmetro do que R. prolixus, R. neglectus, R. ecuadoriensis, R. domesticus e R. nasatus, e não apresenta diferenças significativas com as outras espécies (Barata e col.², 1980).

c) Aspecto geral do exocório

Apresentam certa constância de caracteres entre diferentes amostras estudadas, mais acentuada em um mesmo espécimen. O aspecto geral é uniforme, os funís são profundos, regulares, com bordas salientes e com o citado aspecto de "favos de colméia". Entretanto, poderá ser constatado através de cortes histológicos que freqüentemente esses funís têm bordas arrendondadas, não sendo aí delineada a proeminência relativa ao traçado das linhas limitantes (LL), caráter diferencial entre esta espécie e R. prolixus, com a qual mantém estreitas semelhanças (Fig. 87).

As linhas limitantes são evidentes tanto em microscopia óptica (MO) quanto em microscopia de varredura (MEV). Nesta, elas apresentam-se proeminentes, largas, retilíneas e freqüentemente de aspecto rugoso ou raramente liso, segundo estejam ou não recobertas por granulações (Figs. 84 e 85); em microscopia óptica além desses aspectos, notam-se nelas refringências acentuadas. Em alguns casos, na região periopercular, ficou constatada, através de microscopia eletrônica de varredura, a presença de linhas limitantes com aspecto de "molduras", bem como através de microscopia óptica o aspecto de "bandas de cromossomos politênicos", tal como foi citado para R. prolixus (Fig. 86).

As granulações são facilmente evidenciáveis tanto em microscopia eletrônica de varredura quanto em microscopia óptica; na zona periférica dos funís são freqüentemente graúdas, irregulares, abundantes, mais concentradas, às vezes revestindo as linhas limitantes e dando-lhes certo aspecto rugoso; na zona central, há escasseamento e/ou diminuição progressiva (Figs. 84 e 85).

Os tubos são aparentemente médios ou longos, quando observados por transparência dos fragmentos planos, mas revelam-se acentuadamente longos e finos se examinados em cortes histológicos; em ambos os casos podem apresentar inclinação e dilatação apical muito discretas (Fig. 87).

Seria essa outra característica diferencial entre esta espécie e R. prolixus, cujos tubos são geralmente curtos e com dilatação apical mais acentuada.

O endocório mole, por observação através de cortes histológicos, é razoavelmente estreito, ou seja, tem cerca de um terço, ou menos, da largura do cório. O endocório rijo é visível como dupla membrana que se cora mais intensamente.

Embora não nos tenhamos proposto a estabelecer medidas de largura do cório (exocório + endocório), é evidente e digno de menção que esta espécie apresenta largura de pelo menos uma vez e meia a encontrada nas outras espécies.

3.3 – Chave para classificação de ovos de 10 espécies do Gênero Rhodnius baseada em características das cascas e opérculos, e destinada a utilização em microscopia óptica.

3.3.1 – Ovos com cascas de tonalidade branca ou esbranquiçada ......................... 2

– Ovos com cascas de tonalidade castanha ...................................................... 8

3.3.2 – Ovos com colarinho (Fig. 2) ................................................................. 3

– Ovos sem colarinho (Fig. 1) ......................................................................... 5

3.3.3 – Opérculo de coloração castanho-escura. Linhas limitantes (LL) lisas, estreitas, retilíneas e pouco refringentes ........................................................................ 4

– Opérculo de coloração castanho-pálida. Linhas limitantes pouco evidentes, rugosas, largas, irregulares e sem refringência. Granulações graúdas, abundantes e revestindo uniformemente o tegumento, inclusive as linhas limitantes ............................. neivai

3.3.4 – Funís muito rasos, com bordas arredondadas, em corte histológico, sem nenhuma evidência de demarcação das linhas limitantes (Fig. 42). Estas, débilmente evidenciáveis e não salientes. Granulações irregulares com predomínio de graúdas e distribuição também irregular sobre o tegumento ....................................... nasutus

– Funís com bordas levemente pontiagudas em corte histológico, com fraca evidência de demarcação das linhas limitantes (Fig. 47). Linhas limitantes frequentemente evidenciáveis, lisas, estreitas, retilíneas e pouco refringentes. Granulações miúdas com distribuição uniforme sobre o tegumento ................................................ neglectus

3.3.5 – Funís profundos, com aspecto característico de "favos de colméia". Linhas limitantes refringentes e de fácil visualização. Granulações de fácil observação, freqüentemente graúdas, abundantes e mais concentradas na área das linhas limitantes ................................................................................................... 6

– Funís rasos, sem o aspecto nítido de "favos de colméia". Linhas limitantes pouco refringentes e conseqüentemente de difícil visualização. Granulações de difícil observação, miúdas ou irregulares. Ovos alongados e colo aparentemente estreito ... 7

3.3.6 – Funís com bordas pontiagudas e culminadas por proeminência do traçado das linhas limitantes. Tubos foliculares freqüentemente curtos, com largura irregular, retilíneos ou encurvados e com dilatação apical (Fig. 82). Ovos alongados e com colo aparentemente normal (Fig. 76) .............................................................. prolixus

– Funís com bordas arredondadas e lisas, isto é, sem proeminência do traçado das linhas limitantes. Tubos foliculares longos e finos, com discretas encurvaturas e dilatação apical (Fig. 87). Ovos atarracados e com colo aparentemente largo (Fig. 83) ....................................................................................................... robustus

3.3.7 – Bordas dos funís, em corte histológico, arredondadas, culminadas por pequenas proeminências biseladas relativas aos traçados das linhas limitantes (Fig. 32). Granulações irregulares e com distribuição também irregular. Tubos foliculares em corte, longos e com acentuada dilatação apical (Fig. 32) ....................... domesticus

– Bordas dos funís, e corte histológico, arredondadas, culminadas por largas proeminências abauladas relativas ao traçado das linhas limitantes (Fig. 37). Granulações miúdas, esparsas e freqüentemente mais concentradas na área das linhas limitantes. Tubos foliculares em corte, curtos, largos e com discreta dilatação apical (Fig. 37)............................................................... ecuadoriensis (ovos "albinos")

3.3.8 – Ovos com cascas mais fortemente pigmentadas nas áreas do opérculo, do colarinho e/ou da chanfradura longitudinal ........................................................ 9

– Ovos com cascas com coloração homogênea nessas áreas ...............................10

3.3.9 – Ovos de coloração castanho-pálida e leve brilho dourado. Ausência de colarinho e de chanfradura longitudinal. Opérculo e anel situado na área do colarinho com pigmentação em castanho mais escuro .......................................ecuadoriensis

– Ovos de coloração castanho-bronzeada. Presença de colarinho, embora com expansões discretas (Fig. 4). Opérculo, colarinho e chanfradura longitudinal com pigmentação castanho-escura ............................................................ pallescens

3.3.10 – Ovos com colarinho ........................................................................ 11

– Ovos sem colarinho, coloração castanho-bronze, com leve brilho áureo e colo estreito. Exocório com aspecto uniforme e limpo, mesmo quando observado através de lupa estereoscópica. Linhas limitantes de fácil visualização, largas, lisas, retilíneas e muito refringentes ............................................................................... pictipes

3.3.11 – Ovos com coloração castanho muito pálida e discreto brilho bronzeado. Colarinho com expansões discretas. Ovos alongados e de conformação bem definida. Exocório com aspecto uniforme e "limpo", mesmo quando observado através de lupa estereoscópica. Linhas limitantes de difícil visualização, estreitas, lisas, retilíneas e sem refringência, quando visíveis ................................... pallescens (ovos "albinos")

– Ovos com coloração castanha mais forte e sem brilho. Colarinho com expansões acentuadas, praticamente encobrinho o colo. Ovos atarracados e de conformação mal definida. Exocório com aspecto irregular e "sujo" (Fig. 65), mesmo quando observado através de lupa estereoscópica. Linhas limitantes de fácil visualização, largas, lisas, retilíneas e muito refringentes .............................................................. paraensis

3.4. Chave para classificação de ovos de 10 espécies do Gênero Rhodnius baseada em características exocoriais e da casca e destinada a utilização em microscopia eletrônica de varredura.

3.4.1 – Ovos com colarinho (Fig. 2) 2 – Ovos sem colarinho (Fig. 1) ...................... 6

3.4.2 – Ausência de chanfradura longitudinal. Colarinho com expansões evidentes (Figs. 2, 38 e 48) ......................................................................................... 3

– Presença de chanfradura longitudinal (Figs. 4 e 53). Colarinho com expansões discretas (Figs. 4 e 52). Linhas limitantes ausentes (Fig. 54) ou com traçado delineado por ausência de granulações (Fig. 55). Granulações miúdas, com distribuição abundante e uniforme (Fig. 54) ou escassa e irregular (Figs. 55 e 56). Presença freqüente de esferas situadas no fundo dos funís (Figs. 54 e 59) .............. pallescens

3.4.3 – Granulações com distribuição regular ou irregular, porém quando aglutinadas não formando desenhos "mapeiformes" (41, 44 e 50) ................................... 4

– Granulações com distribuição muito característica, aglutinadas formando desenhos "mapeiformes" (Figs. 66 e 67). Linhas limitantes muito evidentes, proeminentes, largas, lisas e retilíneas (Figs. 66 e 67) ........................................................... paraensis

3.4.4 – Funís mais ou menos profundos, com aspecto característico de "favos de colmeia" ..................................................................................................... 5

– Funís rasos, sem o aspecto característico de "favos de colméia" (Figs. 39 e 40). Linhas limitantes ausentes (Fig. 39), com traçado delineado pela concentração de granulações (Fig. 41) ou pela ausência dessas formações (Fig. 40). Granulações de tamanho e distribuição irregular, freqüentemente formando grumos (Figs. 39 a 41) ........................................................................................................ nasutus

3.4.5 – Linhas limitantes presentes ou ausentes (Figs. 44 e 45). Quando presentes, estreitas, retilíneas, fracamente salientes, levemente rugosas, evidenciáveis pela ausência de granulações (Fig. 46). Granulações miúdas, abundantes, esféricas, com distribuição uniforme (Figs. 44, 45 e 46) ................................................neglectus

– Linhas limitantes pouco evidenciáveis, delineadas pela concentração de granulações (Figs. 49 e 50). Granulações graúdas, abundantes, com distribuição uniforme, entretanto mais escassas no fundo dos funís e freqüentemente podendo formar pequenos grumos, particularmente sobre as linhas limitantes (Figs. 49 e 50) ..... neivai

3.4.6 – Granulações com distribuição regular ou irregular, porém quando aglutinadas não formando desenhos "mapeiformes" (Figs. 36 e 81).......................................... 7

– Granulações com distribuição muito característica, aglutinadas formando desenhos "mapeiformes" (Figs. 72 e 73). Linhas limitantes muito evidentes, proeminentes, largas, lisas e retilíneas (Figs. 72 e 73) .............................................................. pictipes

3.4.7 – Linhas limitantes com delimitação pouco ou muito evidente (Figs. 30 e 84).... 8

– Linhas limitantes sem delimitação evidente, com área suavemente proeminente e aparentemente largas, retilíneas e levemente regosas (Figs. 34, 35 e 36). Granulações miúdas, esparsas, raramente aglutinadas e freqüentemente mais distribuídas em torno das linhas limitantes (Figs. 35 e 36) ................................................ ecuadoriensis

3.4.8 – Granulações graúdas, irregulares, abundantes, com maior concentração em torno das linhas limitantes (Figs. 81 e 85). Linhas limitantes evidentes, proeminentes, largas, freqüentemente rugosas e retilíneas (Figs. 78, 81 e 84) ........ prolixus robustus

– Granulações irregulares quanto a tamanho, forma e distribuição, freqüentemente esparsas, recobrindo ou não as linhas limitantes, sem contudo lhes conferir aspecto rugoso (Figs. 30 e 31). Linhas limitantes pouco evidentes, embora proeminentes, estreitas, lisas e retilíneas (Figs. 30 e 31)............................................ domesticus

4. CONCLUSÕES

4.1 – É estabelecido o diagnóstico diferencial através da utilização da escultura exocorial e dos aspectos macroscópicos dos ovos de dez espécies do gênero Rhodnius (Hemiptera – Triatominae): R. domesticus Neiva e Pinto, 1923; R. ecuadoriensis Lent e León, 1958; R. nasutus Stal, 1859; R. neglectus Lent, 1954; R. neivai Lent, 1953; R. pallescens Barber, 1932; R. paraensis Sherlock, Guitton e Miles, 1977; R. pictipes Stal, 1872; R. prolixus Stal, 1859; e R. robustus Larrousse, 1927. São determinadas as características genéricas e específicas das esculturas exocoriais, e evidenciados e descritos os aspectos dos ovos e das cascas, quanto à coloração, forma e mensuração; bem como as variações de coloração dos ovos ocorrentes durante o desenvolvimento embrionário pós-oviposição. São apresentadas duas chaves para classificação desses ovos, uma para utilização em microscopia eletrônica de varredura (MEV) e outra para microscopia óptica (MO). Para diagnóstico dessas espécies utilizam-se dados fornecidos pela MEV, que representam importante potencial para a pesquisa, particularmente no que se refere ao estudo de aspectos, filogenéticos. Entretanto é possível o emprego desses dados também nas atividades dos serviços de identificação de barbeiros, uma vez que os diagnósticos foram feitos concomitantemente por aquele equipamento e pela MO, e para isso é apresentada também uma chave de classificação baseada apenas nesses aspectos.

4.2 – De apenas duas dessas espécies R. prolixus e R. neglectus, havia dados anteriores referentes ao estudo da escultura exocorial. Para os aspectos macroscópicos dos ovos, com exceção de R. prolixus, são raros até agora os dados para outras espécies. No presente trabalho, mostra-se que, características anteriormente usadas como gerais para Rhodnius não passam de características específicas de uma espécie ou de um pequeno grupo delas. Da mesma forma, outras, tidas como específicas, são simplesmente genéricas, ou seja, comuns a todas ou a algumas espécies.

4.3 – Pela análise das presentes características, concluiu-se que todas as espécies estudadas são entidades taxionômicas válidas. Embora tenha se encontrado variação de alguns caracteres, outros permaneceram constantes, o que configurou a entidade taxionômica das espécies, inclusive R. paraensis Sherlock, Guitton e Miles, 1977, de descrição recente e sem registro de novo encontro até o momento.

4.4 – Não se obtiveram dados suficientes para o estabelecimento de raças entre as espécies estudadas, pois variações encontradas entre diferentes procedências foram constantes também na mesma procedência; e as que não o foram, pelas razões expostas no texto, não nos permitiram inferir tal presença.

4.5 – O estudo dessas formações mostrou que existe acentuada diferença entre R. prolixus e R. neglectus e que essas características poderão ser utilizadas como importante elemento de diferenciação específica, uma vez que essas espécies são morfológicamente muito semelhante em suas fases ninfais e de adultos. Por outro lado, algumas espécies apresentaram semelhanças acentuadas nas características exocoriais e macroscópicas dos ovos, é o caso de R. neglectus com R. nasutus e de R. prolixus com R. robustus..

4.6 – Alguns aspectos novos relacionados aos ovos e ao cório vieram à luz com o desenvolvimento do presente estudo e, por fugirem ao escopo geral, são abordados não mais do que superficialmente, muito embora não tenhamos deixado de ressaltar a importância de futuras investigações nestes campos: a) a fixação ao substrato como importante característica ecológica relacionada ao hábito, primitivo ou atual, de essas espécies serem habitantes de ninhos de aves; b) a inclinação do eixo transversal do opérculo em relação ao plano sagital do ovo, como fator de sobrevida a um maior número de ninfas; c) o papel da escultura exocorial na fixação ao substrato e na respiração do embrião; d) o papel do complexo micropilar na fecundação do ovo e na respiração do embrião; e) a presença, sem prévio tratamento, de certas estruturas no cório de R. pallescens e R. pictipes como "pontos e linhas de irradiação", "ranhuras", "esferas", entre outros, o que certamente transforma essas espécies em excelente matéria prima para investigação.

4.7 – Ressalta-se aqui, a necessidade de os serviços de controle encarregados da profilaxia da Doença de Chagas darem maior importância a um registro adequado de ovos e/ou cascas de ovos encontrados no domicílio ou no peridomicílio, particularmente nas áreas em vigilância. Diante disso sugerimos: a) que seja discutido e reformulado o conceito atual de "casas com vestígios" – aquelas em que durante o serviço de captura são encontrados ovos ou exúvias de barbeiros, anotando-se apenas o número conjunto desse encontro; b) que no registro de coleta de "Triatomíneos" sejam incluídos espaços para anotações sobre ovos ou cascas de ovos quanto à identificação específica, número de exemplares capturados e tipo de ecótopo, tal como é feito para o registro de ninfas e adultos; c) que o pessoal de campo e laboratório seja adestrado nessa técnica.

AGRADECIMENTOS

Ao Prof. Oswaldo Paulo Forattini pela orientação e estímulo ao presente trabalho; aos Dr. Alberto Morales, Dr. Antonio D'Alessandro, Dra. Arlita Coelho de Pinho, Dra. Edelmira Mora Silvera, Prof. Euclides Caripuna Soares, Dr. E. Osorno Mesa, Dr. Habib Frahia Neto, Dr. Hélio Espínola, Dr. Italo Sherlock, Dr. Joaquim Alencar, Dr. José Jurberg, Dr. José Torrealba, Sr. Noé Von Atzingen, Dr. Octávio E. Souza, Dr. Octávio Ferreira Bezerra, Dr. Oswaldo Pinto Serra, Dr. Rodrigo Zeledon e Sra. Wanda Cunha Ramos, pela gentileza do envio do material.

Recebido para publicação em 11/03/1981

Aprovado para publicação em 21/07/1981

Realizado com auxílio financeiro do Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq – Processo SIP/08-065), do Centro Brasileiro de Estudos Entomológicos em Epedemiologia (CENTEP) e da Fundação do Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (PAPESP – Processo 75/1173)

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10

de comprimento por 0,850 ± 0,036 mm

¹⁰ de diâmetro. Significantemente menor em comprimento do que

R.

pallescens, R. prolixus, R. ecuadoriensis e

R. neglectus, não apresenta diferença significativa com as outras espécies. Assim, é significativamente menor em diâmetro do que

R.

neivai, R. robustus e

R. pallescens e não apresenta diferença significativa das outras espécies (Barata e col.

², 1980).

1

Freqüentemente esse achatamento é ausente na ocasião da oviposição e, à medida que o embrião começa seu desenvolvimento, manifesta-se e acentua-se, provavelmente por efeito de certa desidratação do ovo, pois acidentalmente foi observado que ovos recém-postos, quando colocados imediatamente sob lâmpadas de 60W, apresentam-no após alguns minutos de exposição.

2

Forattini, 1980 – informação pessoal.

3

Não foi estudado material embrionado de R. paraensis.

4

Para melhores esclarecimentos vide também item 3.1.2.2 –Aspectos funcionais.

5

Página 207,

Figura 20.

6

Pelo aspecto essas granulações assemelham-se à deposição de material lipídico, entretanto cascas colocadas em maceração em solvente, como acetona, éter, xilol e álcool, por 24, 48 e 72 horas, não sofreram nenhuma modificação em sua estrutura morfológica. Assim como material tratado pelo sistema de ultrasom não sofreu nenhuma alteração.

7

Provavelmente o tipo grande e fosco de Galliard

²²(1935).

8

Triatoma delpontei Romaña e Abalos, 1947 foi a única espécie da qual não dispusemos de material, mas pela descrição do exocório (Abalos e Wygodzinsky

¹ , 1951) parece estar neste grupo.

9

Departamento de Epidemiologia da Faculdade de Saúde Pública da Universidade de São Paulo.

10

A notação usada em todas as espécies estudadas, de X ± a, indica simplesmente o valor médio das medidas (X) e o desvio padrão (a). Não se intenciona com esta notação qualquer referência a intervalos de confiança ou de erros para a média.

11

Em

R. pictipes foi constatada semelhante formação discretamente.

12

Mesmo porque o fato de esse material ter sido originário de duas distintas colônias, que não obstante todos os esforços envidados extinguiram-se natural, rápida e progressivamente, poderia levar-nos a supor na ação de um agente patogênico, talvez um vírus ou um fungo adaptado a esse material. Coincidentemente ou não, o fato de ovos não eclodidos (portanto com embrião morto precocemente) apresentarem mais intensamente essa formação e ovos eclodidos (portanto com ninfas mortas tardiamente) apresentarem-na discretamente, viria a reforçar tal hipótese.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  01 Nov 2005
• Data do Fascículo
  Out 1981

Histórico

• Recebido
  11 Mar 1981
• Aceito
  21 Jul 1981