Acessibilidade / Reportar erro
Artigos Originais • Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo 27 (3) • Jun 1985 • https://doi.org/10.1590/S0036-46651985000300002   copiar

Fracionamento do veneno Crotalus durissus terrificus por cromatografia de exclusão molecular

Fractionation of Crotalus durissus terrificus of chromatography technique by molecular exclusion

Autoria SCIMAGO INSTITUTIONS RANKINGS

Resumos

Através da técnica de cromatografia de exclusão molecular utilizando Sephadex G-75 foram estudadas as diferentes frações do veneno de Crotalus durissus terrificus, uma das serpentes peçonhentas mais comuns no Brasil. Foram obtidos 4 picos (correspondentes às frações 32, 60, 86 e 103) com peso molecular variando de 4.000 a 150.000. As frações de todo o diagrama de gel filtração foram triadas através de reação de imunoeletroforese a fim de se verificar suas cargas e velocidade de migração. As linhas de precipitação encontradas foram comparadas às 11 linhas apresentadas pela reação de imunoeletroforese do veneno total contra o soro anti-crotálico. Constatou-se que as frações de um mesmo pico apresentavam características próprias com exceção da fração 54 (subida do pico II) que mostrou diferenças significativas em relação à fração 60. Após a triagem foram escolhidas as frações de cada pico onde as linhas de precipitação foram mais nítidas e intensas, para estudo de identidade através da reação de difusão radial dupla e letalidade comparada a concentração de 0,0625 mg/ml do veneno total que corresponde a DL50 em camundongo pelo método de SPEARM & KÄRBER. As frações 32, 86 e 103 correspondentes respectivamente aos picos I, III e IV apresentaram letalidade nula ou negligenciada e a fração II foi a mais tóxica.

By means of chromatography technique by molecular exclusion using Sephadex G-75 were studied different fractions of venom Crotalus durissus terrificus, one the most common poisonous snakes in Brazil. It were obtained four peaks related to fractions 32, 60, 86 and 103, which molecular weight varied from 4.000 to 150.000. The fractions of all gel filtration diagram were screened through immunoelectrophoresis, in order to verify its charges and migration speed. The precipitation lines were compared with 11 lines obtained through immunoelectrophoresis of total venom against anti-Crotalus durissus terrificus serum. It was observed that fractions of same peak presented peculiar characteristics except fraction 54 (corresponding to the ascending of peak II), which showed significant differences when compared with fraction 60. After screening, fractions of each peak were chosen in order to identify means of double radial diffusion test and the letality was compared with 0,0625 mg/ml concentration of total venom, which corresponds to DL50 in mice by SPEARM & KÄRBER method. Fractions 32, 86 and 103 corresponding to peaks I, III and IV respectively, presented null or negligibe lethality, and fraction II was the most toxic.

ARTIGOS ORIGINAIS

Fracionamento do veneno Crotalus durissus terrificus por cromatografia de exclusão molecular (* (* ) Realizado na Seção de Imunologia do Instituto Adolfo Lutz, São Paulo, Brasil )

Fractionation of Crotalus durissus terrificus of chromatography technique by molecular exclusion

Augusta Kiyomi TakedaI; Sônia França Correia BarbosaII; Lucinda Maria da CostaIII; Maria das Graças Fernandes AdelinoIII

IPesquisador Científico Nível V. Seção de Imunologia do Instituto Adolfo Lutz, São Paulo, Brasil

IIPesquisador Científico Nível I. Seção de Imunologia do Instituto Adolfo Lutz, São Paulo, Brasil

IIIBiologista. Seção de Imunologia do Instituto Adolfo Lutz, São Paulo, Brasil

RESUMO

Através da técnica de cromatografia de exclusão molecular utilizando Sephadex G-75 foram estudadas as diferentes frações do veneno de Crotalus durissus terrificus, uma das serpentes peçonhentas mais comuns no Brasil. Foram obtidos 4 picos (correspondentes às frações 32, 60, 86 e 103) com peso molecular variando de 4.000 a 150.000. As frações de todo o diagrama de gel filtração foram triadas através de reação de imunoeletroforese a fim de se verificar suas cargas e velocidade de migração. As linhas de precipitação encontradas foram comparadas às 11 linhas apresentadas pela reação de imunoeletroforese do veneno total contra o soro anti-crotálico. Constatou-se que as frações de um mesmo pico apresentavam características próprias com exceção da fração 54 (subida do pico II) que mostrou diferenças significativas em relação à fração 60. Após a triagem foram escolhidas as frações de cada pico onde as linhas de precipitação foram mais nítidas e intensas, para estudo de identidade através da reação de difusão radial dupla e letalidade comparada a concentração de 0,0625 mg/ml do veneno total que corresponde a DL50 em camundongo pelo método de SPEARM & KÄRBER. As frações 32, 86 e 103 correspondentes respectivamente aos picos I, III e IV apresentaram letalidade nula ou negligenciada e a fração II foi a mais tóxica.

SUMMARY

By means of chromatography technique by molecular exclusion using Sephadex G-75 were studied different fractions of venom Crotalus durissus terrificus, one the most common poisonous snakes in Brazil.

It were obtained four peaks related to fractions 32, 60, 86 and 103, which molecular weight varied from 4.000 to 150.000.

The fractions of all gel filtration diagram were screened through immunoelectrophoresis, in order to verify its charges and migration speed. The precipitation lines were compared with 11 lines obtained through immunoelectrophoresis of total venom against anti-Crotalus durissus terrificus serum. It was observed that fractions of same peak presented peculiar characteristics except fraction 54 (corresponding to the ascending of peak II), which showed significant differences when compared with fraction 60.

After screening, fractions of each peak were chosen in order to identify means of double radial diffusion test and the letality was compared with 0,0625 mg/ml concentration of total venom, which corresponds to DL50 in mice by SPEARM & KÄRBER method.

Fractions 32, 86 and 103 corresponding to peaks I, III and IV respectively, presented null or negligibe lethality, and fraction II was the most toxic.

Texto completo disponível apenas em PDF.

Full text available only in PDF format.

Recebido para publicação em 5/6/1984.

  • 1. ANDREWS, P. Estimation of molecular size and molecular wrights of biological compounds by gel filtration. Meth. Biochem. Anal. 18 (pte. 1): 26-29, 1970.
  • 2. BERINE, H. B. Descepant equations derived from the single radial immunodifusion technique. Immunochemistry 8: 1256-1259, 1972.
  • 3. BRAZIL, V. A. A Defesa Contra o Ofidismo. São Paulo, Pocai & Weiss, 1911, 152 p.
  • 4. ORGANIZACION MUNDIAL DE LA SALUD Curso internacional sobre produccion y control de obrologicos. México, O.M.S., 1978, p. 1-8.
  • 5
    ORGANISATION MONDIALE DE LA SANTÉ — Caractérisation des venins et standardisation des sérums antivenimeux: progrès réalisés. Genève, O.M.S., 1981, 49 p. (OMS Publication offset, 58).
  • 6. GRILLO RODRIGUES & SCANNONE, H. R. Fractionation of Crotalus durissus terrificus venom by gel filtration. Toxicon 14: 400-403, 1976.
  • 7. PIZA JR., S. T. As cobras venenosas e o problema ophídico em São Paulo. Bol. Agric. Série 31 (5/6): 307-389, 1930.
  • 8. PORATH, J. Gel filtration of proteins, peptides and amino acids. Biochim. Biophys. Acta 39: 193-207, 1960.
  • 9. RUSSEL, W. Y. In analysis of certain factors related to the quantitation of immunoelectrophoresis. J. Immunol. 94: 942-949, 1965.
  • 10. SILVA JR., M. O Ofidismo no Brasil. Rio de Janeiro, Serviço Nacional de Educação Sanitária, 1956, 350 p.
  • 11. STANKE, H. L. et al. Pre treatment of snakebite Amer. J. Trop. Med. 6: 323-335, 1957.
  • (*
    ) Realizado na Seção de Imunologia do Instituto Adolfo Lutz, São Paulo, Brasil

    • Datas de Publicação

    • Publicação nesta coleção
      26 Out 2012
    • Data do Fascículo
      Jun 1985

    Histórico

    • Recebido
      05 Jun 1984
    Creative Common - by-nc 4.0
    This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.
    Instituto de Medicina Tropical de São Paulo Av. Dr. Enéas de Carvalho Aguiar, 470, 05403-000 - São Paulo - SP - Brazil, Tel. +55 11 3061-7005 - São Paulo - SP - Brazil
    E-mail: revimtsp@usp.br
    Acompanhe os números deste periódico no seu leitor de RSS