Caracterização de cepas de plasmodium falciparum do Estado de Rondônia, Brasil, utilizando microtestes de sensibilidade aos antimaláricos, tipificação enzimática e anticorpos monoclonais

Di Santi, S. M.; Boulos, M.; Vasconcelos, M. A.; Oliveira, S.; Couto, A.; Rosario, V. E.

doi:10.1590/S0036-46651987000300005

Resumos

Nove amostras de Plasmodium falciparum foram coletadas de migrantes infectados no Estado de Rondônia. Estas amostras foram mantidas em cultivo para caracterização por tipificação enzimática em acetato de celulose, sensibilidade á cloroquina, amodiaquina, mefloquina e quinino e análise da diversidade antigê-nica através de anticorpos monoclonais específicos. Os resultados obtidos mostraram variação entre todas as amostras estudadas: encontrou-se resistência crescente à cloroquina, resistência intermediária à amodiaquina e quinino e sensibilidade a baixos níveis de mefloquina; apenas dois isolados mostraram sensibilidade a todas as drogas. A tipificação enzimática mostrou presença de parasitas GPI 1 e 2 e ADA 1 e 2, enquanto que para PEP e LDH todas as amostras foram do tipo 1. Sorotipagem com anticorpos monoclonais PSA mostrou presença de três sorotipos diferentes (II, III e IV). Estes resultados mostraram: a) variação entre as amostras para os marcadores analisados; b) nesta região, para o pequeno número de amostras analisadas, não foram observadas diferenças significativas ou novos tipos de parasitas.

Malária; Caracterização de cepas; P. falciparum

Nine samples of Plasmodium falciparum were collected from migrant workers who were infected in the State of Rondônia, Brazil. These samples were maintained in culture for characterization by enzyme typing using acetate cellulose electrophoresis, drug susceptibility to chlo-roquine, amodiaquine, mefloquine and quinine and antigenic diversity analysis using strain specific monoclonal antibodies. The results obtained have confirmed major variation among all samples studied: it was found consistent resistance to chloroquine moderated resistance to amodiaquine and quinine and susceptibility to low levels of mefloquine; only two isolates have shown susceptibility to all drugs in the in vitra assays. Enzyme typing showed presence of both GPI 1 and 2 and ADA 1 and 2 parasites, while for PEP and LDH all samples were type 1. Se-rotyping with PSA monoclonal antibodies showed presence of three different serotypes (II, III and IV). These results confirm: a) variation among samples for markers analysed; b) in this area and for the small number of samples studied, no significant differences or new types of parasites were seen.

ARTIGOS ORIGINAIS

Caracterização de cepas de plasmodium falciparum do Estado de Rondônia, Brasil, utilizando microtestes de sensibilidade aos antimaláricos, tipificação enzimática e anticorpos monoclonais

Characterization of Plasmodium falciparum isolates from Rondônia State, Brazil, by drug susceptibility, enzyme typing and monoclonal antibodies

S. M. Di Santi^I; M. Boulos^I; M. A. Vasconcelos^II; S. Oliveira^II; A. CoutoII; V. E. Rosario^III

^ILaboratório de Malária da Superintendência de Controle de Endemias (SUCEN), da Secretaria de Estado da Saúde Rua Cardeal Arcoverde, 2878. CEP 05408 São Pnulo, SP. - Brasil

^IIInstituto Evandro Chagas da FSESP. Av. Almirante Barroso. 492. Caixa Postal 621. CEP 66000 Belém, PA. - Brasil

^IIIBiomedical Research Institute. 12111 Parklawn Drive. Rockville, Maryland 20852 - U.S.A

RESUMO

Nove amostras de Plasmodium falciparum foram coletadas de migrantes infectados no Estado de Rondônia. Estas amostras foram mantidas em cultivo para caracterização por tipificação enzimática em acetato de celulose, sensibilidade á cloroquina, amodiaquina, mefloquina e quinino e análise da diversidade antigê-nica através de anticorpos monoclonais específicos.

Os resultados obtidos mostraram variação entre todas as amostras estudadas: encontrou-se resistência crescente à cloroquina, resistência intermediária à amodiaquina e quinino e sensibilidade a baixos níveis de mefloquina; apenas dois isolados mostraram sensibilidade a todas as drogas. A tipificação enzimática mostrou presença de parasitas GPI 1 e 2 e ADA 1 e 2, enquanto que para PEP e LDH todas as amostras foram do tipo 1. Sorotipagem com anticorpos monoclonais PSA mostrou presença de três sorotipos diferentes (II, III e IV). Estes resultados mostraram: a) variação entre as amostras para os marcadores analisados; b) nesta região, para o pequeno número de amostras analisadas, não foram observadas diferenças significativas ou novos tipos de parasitas.

Unitermos: Malária; Caracterização de cepas; P. falciparum.

SUMMARY

Nine samples of Plasmodium falciparum were collected from migrant workers who were infected in the State of Rondônia, Brazil. These samples were maintained in culture for characterization by enzyme typing using acetate cellulose electrophoresis, drug susceptibility to chlo-roquine, amodiaquine, mefloquine and quinine and antigenic diversity analysis using strain specific monoclonal antibodies. The results obtained have confirmed major variation among all samples studied: it was found consistent resistance to chloroquine moderated resistance to amodiaquine and quinine and susceptibility to low levels of mefloquine; only two isolates have shown susceptibility to all drugs in the in vitra assays. Enzyme typing showed presence of both GPI 1 and 2 and ADA 1 and 2 parasites, while for PEP and LDH all samples were type 1. Se-rotyping with PSA monoclonal antibodies showed presence of three different serotypes (II, III and IV). These results confirm: a) variation among samples for markers analysed; b) in this area and for the small number of samples studied, no significant differences or new types of parasites were seen.

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AGRADECIMENTOS

Este trabalho foi subsidiado pelo CNPq (PIDE VI e POLONOROESTE), Biomedical Re-search Institute e PAHO (Dr. F. J. Lopez-An-tunano). Agradecemos Dr. Jana McBride pelo fornecimento dos anticorpos monoclonais, produzidos pela Universidade de Edimburgo, Es cócia.

Recebido para publicação em 2/10/86.

1. BOX, E. D. BOX, A. T. & YOUNG, M. D. - Chlo-roquine-resistant Plasmodium falciparum from Porto Volho, Brazil. Amer. J. trop. Med. Hyg., 12: 300-304. 1963.
2. CARTER, R. & VOLLER, A. - The distribution OR enzyme variation in populations of Plasmodium falciparum in Africa. Trans, roy. Soc. trop. Med. Hyg.. 69: 371-376, 1975.
3. CORCORAN, L. M. FORSYTH, K. P. BIANCO, A. E. BROWN, G. V. & KEMP, D. - Chromosome size polymorphisms in Plasmodium falciparum can involve deletions and are frequent in natural parasite populations. Cell, 44: 87-95, 1986.
4 COUTO, A. ROSÁRIO, V. E. & WALLIKER, D. - Análise enzimática de 56 amostras de Plasmodium falciparum da Bacia Amazônica (Brasil). Rev. bras. Malar., 35: 11-18, 1983.
5. FRANZEN, L. SHABO, R. PERLMANN, H. WIG-ZELL, H. WESTIN, G. ASLUND, L. PERSSON, T. & PETERSSON, U. - Analysis of clinical specimens by hybridization with probe containing repetitive DNA from Plasmodium falciparum. Lancet, 1: 525-527, 1984.
6. JENSEN, J. B. & TRAGER, W. - Plasmodium falciparum in culture: use of outdated erythrocytes and description of the candle jar method. J. Parast., 63: 883-886, 1977.
7. LOPEZ-ANTUÑANO, F. J. & WERNSDORFER, W. H. - In vitro response to chloroquine resistant Plasmodium falciparum to mefloquine. Bull. Wld. Hlth. Org., 57: 663-665, 1979.
8. McBRIDE, J. NEWBOLD, C. I. & AN AND, R. - Polymorphism of a high molecular weigth schizont antigen of the human malaria parasite Plasmodium falciparum. J. exp. Med., 161: 160-180, 1985.
9. McBRIDE, J. WALLIKER, D. & MORGAN, G. - Antigenic diversity in the human malaria parasite Plasmodium falciparum Science, 217: 254-257, 1982.
10. PETERS, W. - Chemoterapy and drug resistance in malaria. London, Academic Press, 1970.
11. PINOTTI, M. - Urn novo método de profilaxia da malaria: associação de uma droga antimalárica ao sal de cozinha usado na alimentação diária. Rev. bras. Malar., 6: 5-12, 1954.
12. RIECKMANN, K. H. SAX, L. J. CAMPBELL, G. H. & UREMA, J. E. - Drug sensitivity of Plasmodium falciparum - an in vitro microtechnique. Lancet, J: 22-23, 1978.
13. ROSÁRIO, V. E. - Caracterização de cepas de Plasmodium falciparum do Brasil. Rev. Fund. SESP, 28 (2): 115-136, 1983.
14. SCHWARTZ, D. C & CANTOR, C R. - Separation of yeast chromosome-sized DNAs by pulse-field gradient gel electrophoresis. Ceil, 37: 67-75, 1984.
15. TAIT, A.- Analysis of protein variation jn Plasmodium falciparum by two-dimentional gel electrophoresis. Mol. Biochem. Parasit., 2: 205-218, 1981.
16. THAITHONG, S. - Biological characterization of malaria parasites by means of enzyme identification on pattern analysis. WHO/Mal., 81: 935, 1981.
17. THAITHONG, S. STJEBLINWONG, T. & BEALE, G. H. - Enzyme typing of some isolates on Plasmodium falciparum from Thailand. Trans, roy. Soc. trop. Med. Hyg., 75: 268-270, 1981.
18. TRAGER, W. & JENSEN, J. B. - Human malaria parasites in continuous culture. Science, 193: 674-675, 1976.
19. VAN DER PLOEG, L. H. T. SMITS, M. PONNU-DURAI, T. VERMEULEN, A. MEUWISSEN, J. H. E. T. & LANGSLEY, G. - Chromosome-sized DNA molecules of Plasmodium falciparum Science, 229: 658-661, 1985.
20. VASCONCELOS, M. A. & ROSÁRIO, V. E. - Testes de sensibilidade in vitro de amostras de Plasmodium falciparum da Bacia Amazônica (Brasil). Rev. bras. Malar., 35: 21-28, 1983.
21. WALLIKER, D. - Genetic variation in malaria parasites. Brit. med. Bull. 38: 123-128, 1982.
22. WEBSTER, H. K. BOUDREAU, E. F. PA VAN AND, K. YONGVANITCHIT, K. & PANG, L. W. - Antimalarial drug susceptibility testing of Plasmodium falciparum in Thailand using a microdilution radioisotope method. Amer. J. trop. Med. Hyg., 34: 228-235, 1985.
23. WORLD HEALTH ORGANIZATION. Chemotherapy of malaria. Report of a W.H.O. Scientific Group. Wld. Hlth. Org. techn. Rep. Ser., (375), 1967.

Endereço para correspondência:

Dr. Marcos Boulos.

Laboratório de Malária da Superintendência de Controle de Endemias (SUCEN).

Av. Cardeal Arcoverde, 2878.

CEP 05408 São Paulo, SP. - Brasil.

Datas de Publicação

Publicação nesta coleção
17 Fev 2011
Data do Fascículo
Jun 1987

Histórico

Recebido
02 Out 1986

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[1] 1. BOX, E. D. BOX, A. T. & YOUNG, M. D. - Chlo-roquine-resistant Plasmodium falciparum from Porto Volho, Brazil. Amer. J. trop. Med. Hyg., 12: 300-304. 1963.

[2] 2. CARTER, R. & VOLLER, A. - The distribution OR enzyme variation in populations of Plasmodium falciparum in Africa. Trans, roy. Soc. trop. Med. Hyg.. 69: 371-376, 1975.

[3] 3. CORCORAN, L. M. FORSYTH, K. P. BIANCO, A. E. BROWN, G. V. & KEMP, D. - Chromosome size polymorphisms in Plasmodium falciparum can involve deletions and are frequent in natural parasite populations. Cell, 44: 87-95, 1986.

[4] 4 COUTO, A. ROSÁRIO, V. E. & WALLIKER, D. - Análise enzimática de 56 amostras de Plasmodium falciparum da Bacia Amazônica (Brasil). Rev. bras. Malar., 35: 11-18, 1983.

[5] 5. FRANZEN, L. SHABO, R. PERLMANN, H. WIG-ZELL, H. WESTIN, G. ASLUND, L. PERSSON, T. & PETERSSON, U. - Analysis of clinical specimens by hybridization with probe containing repetitive DNA from Plasmodium falciparum. Lancet, 1: 525-527, 1984.

[6] 6. JENSEN, J. B. & TRAGER, W. - Plasmodium falciparum in culture: use of outdated erythrocytes and description of the candle jar method. J. Parast., 63: 883-886, 1977.

[7] 7. LOPEZ-ANTUÑANO, F. J. & WERNSDORFER, W. H. - In vitro response to chloroquine resistant Plasmodium falciparum to mefloquine. Bull. Wld. Hlth. Org., 57: 663-665, 1979.

[8] 8. McBRIDE, J. NEWBOLD, C. I. & AN AND, R. - Polymorphism of a high molecular weigth schizont antigen of the human malaria parasite Plasmodium falciparum. J. exp. Med., 161: 160-180, 1985.

[9] 9. McBRIDE, J. WALLIKER, D. & MORGAN, G. - Antigenic diversity in the human malaria parasite Plasmodium falciparum Science, 217: 254-257, 1982.

[10] 10. PETERS, W. - Chemoterapy and drug resistance in malaria. London, Academic Press, 1970.

[11] 11. PINOTTI, M. - Urn novo método de profilaxia da malaria: associação de uma droga antimalárica ao sal de cozinha usado na alimentação diária. Rev. bras. Malar., 6: 5-12, 1954.

[12] 12. RIECKMANN, K. H. SAX, L. J. CAMPBELL, G. H. & UREMA, J. E. - Drug sensitivity of Plasmodium falciparum - an in vitro microtechnique. Lancet, J: 22-23, 1978.

[13] 13. ROSÁRIO, V. E. - Caracterização de cepas de Plasmodium falciparum do Brasil. Rev. Fund. SESP, 28 (2): 115-136, 1983.

[14] 14. SCHWARTZ, D. C & CANTOR, C R. - Separation of yeast chromosome-sized DNAs by pulse-field gradient gel electrophoresis. Ceil, 37: 67-75, 1984.

[15] 15. TAIT, A.- Analysis of protein variation jn Plasmodium falciparum by two-dimentional gel electrophoresis. Mol. Biochem. Parasit., 2: 205-218, 1981.

[16] 16. THAITHONG, S. - Biological characterization of malaria parasites by means of enzyme identification on pattern analysis. WHO/Mal., 81: 935, 1981.

[17] 17. THAITHONG, S. STJEBLINWONG, T. & BEALE, G. H. - Enzyme typing of some isolates on Plasmodium falciparum from Thailand. Trans, roy. Soc. trop. Med. Hyg., 75: 268-270, 1981.

[18] 18. TRAGER, W. & JENSEN, J. B. - Human malaria parasites in continuous culture. Science, 193: 674-675, 1976.

[19] 19. VAN DER PLOEG, L. H. T. SMITS, M. PONNU-DURAI, T. VERMEULEN, A. MEUWISSEN, J. H. E. T. & LANGSLEY, G. - Chromosome-sized DNA molecules of Plasmodium falciparum Science, 229: 658-661, 1985.

[20] 20. VASCONCELOS, M. A. & ROSÁRIO, V. E. - Testes de sensibilidade in vitro de amostras de Plasmodium falciparum da Bacia Amazônica (Brasil). Rev. bras. Malar., 35: 21-28, 1983.

[21] 21. WALLIKER, D. - Genetic variation in malaria parasites. Brit. med. Bull. 38: 123-128, 1982.

[22] 22. WEBSTER, H. K. BOUDREAU, E. F. PA VAN AND, K. YONGVANITCHIT, K. & PANG, L. W. - Antimalarial drug susceptibility testing of Plasmodium falciparum in Thailand using a microdilution radioisotope method. Amer. J. trop. Med. Hyg., 34: 228-235, 1985.

[23] 23. WORLD HEALTH ORGANIZATION. Chemotherapy of malaria. Report of a W.H.O. Scientific Group. Wld. Hlth. Org. techn. Rep. Ser., (375), 1967.