Estandarizacion y evaluacion de un enzimoinmunoensayo para diagnostico y seroepidemiologia de triquinosis humana

Coltorti, Emílio; Fernandez, Eduardo; Santillán, Graciela

doi:10.1590/S0036-46651987000600001

Resúmenes

Se estandarizó un enzimoinmunoensayo (EIE) en fase sólida en el que se empleó un antígeno soluble total de T. spiralis y una dilución única de suero, y se evaluó la capacidad del sistema para detectar anticuerpos totales antitriquina con fines diagnósticos y seroepidemiológicos. Las curvas dosis respuesta mostraron que trabajando con una dilución de suero de 1:100 se obtenía una buena diferenciación entre sueros de indivíduos no infectados y pacientes de triquinosis con baja concentración de anticuerpos circulantes y la respuesta fue lineal entre valores de 0.15 y 0.64 unidades de densidad óptica (DO). El estúdio de 720 sueros de población general no infectada revelo una X k = 0.07 y una S = 0.03 unidades de DO. El 98,61% de esta población presentó valores de DO < X k + 3S; el 1,25% valores de DO entre > X k + 3S y < X k + 4S; y el 0.14% restante valores entre > X k + 4S y < X k + 5S. Se empleó un valor de DO = X k + 5S como nivel diagnóstico para estudiar 4 brotes de triquinosis humana, 80 sueros de pacientes de triquinosis con diferentes títulos en inmunofluorescencia indirecta (IFI) y 20 sueros de pacientes de hidatidosis. El EIE propuesto permitió diferenciar en forma confiable y eficiente población infectada de no infectada y tuvo una buena correlación con la IFI. Todos los sueros de pacientes hidatídicos presentaron valores de DO < X k + 4S.

Triquinosis; Inmunodiagnóstico; Enzimoinmunoensayo

An enzyme immunoassay (EIA) in solid phase'in which a whole soluble Trichinella spiralis antigen and a single serum dilution were used was standardized and its capacity for detecting total anti-trichinella antibodies for diagnostic and seroepidemiological purpose was evaluated. Dose response curves showed that a working dilution of 1:100 permitted an adequate differentiation between trichinosis patients with low circulating antibodies concentration and non infected individuals; the response was linear between OD values of 0.15 and 0.64. A group of 720 sera from trichinosis free general population showed an arithmetic mean of OD values of 0.07 and a standard deviation of 0.03. OD values were < (X) + 3S in 98,1% of those sera; between > X k+ 3S and < X k + 4S in 1,25% and between > X k + 4S and < X k + 5S in the remaining 0.14%. An OD value = X k + 5S was used as a diagnostic criterion to study sera from four human trichinosis outbreaks; 80 sera from trichinosis patients with different immunofluorescence assay (IFA) titers, and 20 sera from hydatid patients. The proposed EIA differentiates sera from infected and non infected populations both efficiently and reliably. It also showed a good correlation with the IFA results. All sera from hydatid patients showed OD values < X k + 4S.

ARTIGO ORIGINAL

Emílio Coltorti^I; Eduardo Fernandez^II; Graciela Santillán^III

^ICentro Panamericano de Zoonosis, Programa de Salud Pública Veterinaria, Organización Panamericana de la Salud/Organización Mundial de la Salud, Casula de Correo 3092, Correo Central, 1000 Buenos Aires, Argentina

^IILaboratório de Control de Patologia Prevalentes. Subsecretaría de Salud. Trelew, Chubut, Argentina

^IIIDivisión de Inmunoparasitología, Instituto Nacional de Microbiología "Carlos G. Malbrán". Buenos Aires Argentina

RESUMEN

Se estandarizó un enzimoinmunoensayo (EIE) en fase sólida en el que se empleó un antígeno soluble total de T. spiralis y una dilución única de suero, y se evaluó la capacidad del sistema para detectar anticuerpos totales antitriquina con fines diagnósticos y seroepidemiológicos.

Las curvas dosis respuesta mostraron que trabajando con una dilución de suero de 1:100 se obtenía una buena diferenciación entre sueros de indivíduos no infectados y pacientes de triquinosis con baja concentración de anticuerpos circulantes y la respuesta fue lineal entre valores de 0.15 y 0.64 unidades de densidad óptica (DO). El estúdio de 720 sueros de población general no infectada revelo una X з = 0.07 y una S = 0.03 unidades de DO. El 98,61% de esta población presentó valores de DO < X з + 3S; el 1,25% valores de DO entre > X з + 3S y < X з + 4S; y el 0.14% restante valores entre > X з + 4S y < X з + 5S.

Se empleó un valor de DO = X з + 5S como nivel diagnóstico para estudiar 4 brotes de triquinosis humana, 80 sueros de pacientes de triquinosis con diferentes títulos en inmunofluorescencia indirecta (IFI) y 20 sueros de pacientes de hidatidosis. El EIE propuesto permitió diferenciar en forma confiable y eficiente población infectada de no infectada y tuvo una buena correlación con la IFI. Todos los sueros de pacientes hidatídicos presentaron valores de DO < X з + 4S.

Unitermos: Triquinosis, Inmunodiagnóstico, Enzimoinmunoensayo.

SUMMARY

An enzyme immunoassay (EIA) in solid phase'in which a whole soluble Trichinella spiralis antigen and a single serum dilution were used was standardized and its capacity for detecting total anti-trichinella antibodies for diagnostic and seroepidemiological purpose was evaluated. Dose response curves showed that a working dilution of 1:100 permitted an adequate differentiation between trichinosis patients with low circulating antibodies concentration and non infected individuals; the response was linear between OD values of 0.15 and 0.64. A group of 720 sera from trichinosis free general population showed an arithmetic mean of OD values of 0.07 and a standard deviation of 0.03. OD values were < (X) + 3S in 98,1% of those sera; between > X з+ 3S and < X з + 4S in 1,25% and between > X з + 4S and < X з + 5S in the remaining 0.14%.

An OD value = X з + 5S was used as a diagnostic criterion to study sera from four human trichinosis outbreaks; 80 sera from trichinosis patients with different immunofluorescence assay (IFA) titers, and 20 sera from hydatid patients. The proposed EIA differentiates sera from infected and non infected populations both efficiently and reliably. It also showed a good correlation with the IFA results. All sera from hydatid patients showed OD values < X з + 4S.

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AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecen al Sr. Roberto O. García por su esmerada colaboración técnica.

Recebido para publicação em 21/4/1987.

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